本發明專利技術公開了一種G6PD缺乏癥基因檢測試劑盒，包括：一個基因芯片，其上帶有針對葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因突變位點設計的突變檢測探針和對應的正常對照探針，所述的突變檢測探針為SEQ?ID?Nos：1-13中的至少一條序列或其反向互補的序列；正常對照探針為SEQ?ID?Nos：14-24中的至少一條序列或其反向互補的序列；還包含一組引物,用于擴增臨床樣本G6PD基因序列，引物的DNA序列為SEQ?ID?Nos.25-34。本發明專利技術可直接對待檢者的基因型進行確診，大大降低女性雜合子的漏診率，將檢測時間縮短為3.5小時左右，實現G6PD基因的快速檢測。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及基因領域，具體是用于診斷人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,縮略詞為G6PD)缺乏癥的基因檢測試劑盒。
技術介紹
G6H)缺乏癥是最常見的一種遺傳性酶缺乏病，俗稱蠶豆病，全世界約4億人受累。我國是本病的高發區之一，約有I億Gero缺乏癥患者，主要分布在長江以南各省，以海南、廣東、廣西、云南、貴州、四川等省為高。該病特征是平時無癥狀，但患者的紅細胞容易受到某些特定物質的破壞而發生溶血，導致溶血性貧血、藥物性溶血、感染性溶血、蠶豆病等，最嚴重的是新生兒溶血，導致核黃疸從而發展為兒童終身智力低下或死亡。G6H)基因突變是引起G6H)缺乏癥的主要原因。G6H)基因定位于X染色體，男性 只有一條X染色體，一旦有G6ro基因缺陷，則表現為G6H)嚴重缺乏。女性有兩條X染色體，若一條染色有G6ro基因缺陷，則為雜合子，其臨床表現變化很大，其酶活性可從正常至完全缺乏，給檢出造成困難。如果2條X染色體都有G6ro基因缺陷，則為純合子，表現為G6ro嚴重缺乏。在女性G6ro基因缺陷者中，多以致病基因攜帶者(雜合子)普遍存在人群中，且酶活性不定；但女性雜合子會將致病基因傳給下一代，如在她們妊娠、生產、哺乳期發生急性溶血，會導致新生兒溶血、新生兒核黃疸或發育生長遲緩等。目前臨床上常用的G6ro缺乏癥檢測方法包括高鐵血紅蛋白實驗、熒光斑點法、四氮唑藍定性定量法、G-6-PD活性直接測定、G-6-PD/6-P-GD比值法等。這些化學試驗方法雖然過程簡單、價格低廉，適宜基層醫院使用或普查，但其準確性不高，特別是對于女性雜合子檢出率不足50%，容易造成漏診。
技術實現思路
本專利技術目的是為了彌補現有化學試驗方法對女性Gero雜合子檢出率的不足，提供一種G6ro缺乏癥基因檢測試劑盒。本專利技術的G6H)缺乏癥基因檢測試劑盒，包括 (I)一個基因芯片，其上帶有針對葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因突變位點設計的突變檢測探針和對應的正常對照探針，所述的突變檢測探針為SEQ ID Nos :1-13中的至少一條序列或其反向互補的序列；正常對照探針為SEQ ID Nos :14-24中的至少一條序列或其反向互補的序列，探針序列如下名稱序列序列號 95M5' - GATACACGCATATTCATC -3'SEQ ID NO. I 392M5' - TCCACCTGGTGTCACAG -3'SEQ ID NO. 2 493M5' - CTGGGACCGCATCATC -3'SEQ ID NO. 3 592M5' - ATCTACTGCATCGACCA -3'SEQ ID NO. 4 87IM5' - TCAGGTCAAGATGTTGAAA -3/SEQ ID NO. 51004M 5' - ACCACCGTCACTTTTG -3/ SEQ IDNO. 6 1024M 5' - GCCGTCGTCTTCTATGT -3/ SEQ IDNO. 7 131IM 5' - CCTGACGCCTATGAGC -3/ SEQ IDNO. 8 1360M 5' - ACTTCGTGTGCAGGTGA -3/ SEQ IDNO. 9 1376M 5' - CGACGAGCTCCTTGAG -3/ SEQ IDNO. 10 1381M 5' - AGCTCCGTGAGACCTG -3/ SEQ IDNO. 11 1387M 5' - CCTGGTGTATTTTCACC -3/ SEQ IDNO. 12 1388M 5' - CCTGGCATATTTTCACCC -3/ SEQ IDNO. 13· 95N 5' - CGGATACACACATATTCATC -3/ SEQ IDNO. 14 392N 5' - TCCACCTGGGGTCACAG -3/ SEQ IDNO. 15 493N 5' - GCTGGAACCGCATCATC -3/ SEQ IDNO. 16 592N 5' - CAGATCTACCGCATCGA -3/ SEQ IDNO. 17 871N 5' - CAGGTCAAGGTGTTGAAA -3/ SEQ IDNO. 18 1004N 5' - ACCACCGCCACTTTTG -3/ SEQ IDNO. 19 1024N 5' - CCGTCGTCCTCTATGTG -3/ SEQ IDNO. 20 1311N 5' - CCTGACGCCTACGAGC -3/ SEQ IDNO. 21 1360N 5' - CACTTCGTGCGCAGGTG -3/ SEQ IDNO. 22 1376/1381N 5' - CTCCGTGAGGCCTGG -3/ SEQ IDNO. 23 1387/1388N 5' - CCTGGCGTATTTTCACC -3/ SEQ IDNO. 24(2)還包含一組引物(10條)，用于擴增臨床樣本G6H)基因序列，引物的DNA序列為SEQ ID Nos. 25-34，引物序列如下名稱序列序列號 exon2-F 5' - TCAAGAAAGGGGCTAACTTCTCAA -3' SEQ IDNO. 25 exon2-R 5' - CACTTCCTGGCTTTTAAGATTGGG -3' SEQ IDNO. 26 exon5-F 5' - AAGCTGGAGGACTTCTTTGC -3' SEQ IDNO. 27 exon5-R 5' - ACACGCTCATAGAGTGGTGG -3' SEQ IDNO. 28 exon6-F 5' - TGGGAGGGCGTCTGAATGA -3' SEQ IDNO. 29 exon6-R 5' - GGGCAAGGTGGAGGAACTG -3' SEQ IDNO. 30 exon9-F 5' - ACACCCAAGGAGCCCATTC -3/ SEQ IDNO. 31 exon9-R 5' - ACTGCTGGTGGAAGATGTCG -3' SEQ IDNO. 32 exonll/12-F 5' - TGGCATCAGCAAGACACTCTCT -3/ SEQ IDNO. 33 exonll/12-R 5' - CCTTTCCTCACCTGCCATAAA -3/ SEQ IDNO. 34 所述的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因突變位點為cDNA95 (A>G) , cDNA392 (G>A),cDNA493 (A>G), cDNA592 (C>T)， cDNA871 (G>A), cDNA1004 (C>T)，cDNA1024 (C>T),cDNA1311 (C>T), cDNA1360 (C>T), cDNA1376 (G>T), cDNA1381 (G>A), cDNA1387 (C>T)和 cDNA1388 (G>A)。本專利技術上述的試劑盒，所述探針5'或3'端經過胺基化處理。本專利技術上述的試劑盒，所述基因芯片的探本文檔來自技高網...
【技術保護點】
G6PD缺乏癥基因檢測試劑盒，包括：（1）一個基因芯片，其上帶有針對葡萄糖？6？磷酸脫氫酶基因突變位點設計的突變檢測探針和對應的正常對照探針，所述的突變檢測探針為SEQ？ID？Nos：1？13中的至少一條序列或其反向互補的序列；正常對照探針為SEQ？ID？Nos：14？24中的至少一條序列或其反向互補的序列；（2）還包含一組引物,用于擴增臨床樣本G6PD基因序列，引物的DNA序列為SEQ？ID？Nos.25？34。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：陳偉堅，朱娟娟，盧敏，
申請(專利權)人：廣東凱普生物科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
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