本發明專利技術公開了一種主要用于中國人群的，用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的引物組及試劑盒。用于ABO血型基因測定的引物組包括ABOINTRON2396G引物對，ABOINTRON2396C引物對，ABOEXON7272A引物對，ABOEXON7272T引物對，ABOEXON7429C引物對，ABOEXON7429G引物對，ABOEXON7635G引物對，ABOEXON7635A引物對，ABOEXON622A引物對，ABOEXON7688G引物對，ABOEXON7688C引物對及內參引物對。本發明專利技術的試劑盒克服了血清學方法鑒定ABO血型的種種限制、是正確判定血型不可缺少的輔助手段，具有廣泛的應用前景和臨床參考價值。
【技術實現步驟摘要】
用于檢測人類紅細胞ABO血型基因分型的引物組及試劑盒
本專利技術屬于生物
，特別涉及一種用于檢測人類紅細胞ABO血型基因分型的試劑盒(PCR-SSP法)。
技術介紹
人類ABO基因座位于第9號染色體(9q34)，且A、B、O基因高度同源性，有7個外顯子。ABO基因長度約1060bp，編碼353個氨基酸。A基因和B基因編碼糖基轉移酶，而O基因為無效基因。B基因與A基因在cDNA序列第297、703、796和803bp這4個堿基位點存差異；0基因與A基因的區別為cDNA第26Ibp堿基G缺失。A型主要有Al與A2亞型，此外還有A3、Am和Ax等。與Al基因比較，A2基因在cDNA第467bp存在A/T替換和第1061bp堿基C缺失。O型主要有01與02亞型。與01基因比較，02基因除了第261bp堿基G缺失外，還存在第646T>A、681G>A、771C>T和829G>A等4個堿基替換。ABO基因的基因產物是糖基轉移酶，這些酶控制ABO血型抗原的合成。ABO抗原的化學結構是糖蛋白，A基因表達A酶(a -3-N-D-氨基半乳糖轉移酶)，能夠將N-乙酰半乳糖加在H物質的巖藻糖末端上，產生A抗原特異性；Β基因表達B酶(a -3-D-半乳糖基轉移酶)，能將半乳糖加在H物質糖末端產生B抗原特異性。AB型個體帶有A和B兩種糖基轉移酶，因此紅細胞上同時有A和B抗原。O型個體不具有A酶和B酶，所以紅細胞表面不顯示A和B抗原。血 清學方法通常靠檢測紅細胞表面抗原和血液中存在的抗體來鑒定ABO血型，而ABO血型的基因學分型方法則通過直接檢測ABO基因對其進行分型。ABO血型系統是人類血型系統中免疫原性最強的血型系統，在輸血醫學以及器官、干細胞移植等臨床醫學中有重要作用。血清學技術鑒定ABO血型系統只能鑒定表型，在鑒定異常表達的個體和作遺傳學分析時受到局限。ABO血型基因分型技術在輸血醫學中可結合血清學診斷結果應用于臨床，ABO基因分型結果可作為遺傳標記物應用于干細胞移植后嵌合體檢測及亞型的家系研究。此外，ABO血型基因分型技術不受檢材限制，羊水、毛發等包含有核細胞的物質都可作為檢材，使其在胎兒和新生兒血型鑒定方面有潛在而廣泛的應用價值。當患者由于疾病或衰老，ABO基因產物表達降低，造成Α，B抗原表達減弱時，基因分型技術因其不受表達影響的優勢成為ABO血型準確定型的首選。不受血清中自身抗體、不規則抗體的影響，ABO血型基因分型技術克服了血清學方法的種種限制，是正確判定血型不可缺少的輔助手段，具有廣泛的應用前景和臨床參考價值。
技術實現思路
本專利技術的目的是:克服現有技術中的不足，提供一種適合中國人群的用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的引物組。本專利技術的第二個目的是提供一種適合中國人群的具有靈敏、特異、經濟、簡便、快速的用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的試劑盒。一種適合中國人群的用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的引物組，其特征是包括ABO INTR0N2 396G 引物對，ABO INTR0N2 396C 引物對，ABO EX0N7 272A 引物對，ABO EX0N7272T 引物對，ABO EX0N7 429C 引物對，ABO EX0N7 429G 引物對，ABO EX0N7 635G 引物對，ABOEX0N7 635A 引物對，ABO EX0N6 22A 引物對，ABO EX0N7 688G 引物對，ABO EX0N7 688C 引物對及內參引物對； 所述 ABO INTR0N2 396G 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所示的核苷酸序列； 所述 ABO INTR0N2 396C 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.3所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272A位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.5所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272T位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.6所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429C位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.8所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429G位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.9所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635G位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.11所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635A位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.12所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N6 22A位于EX0N6 1_22和INTR0N6 124-146的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.13、SEQ ID N0.14所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688G位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.16所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688C位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.17所示的核苷酸序列。一種適合中國人群的用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的試劑盒，其特征是包括包被有 ABO INTR0N2 396G 引物對，ABO INTR0N2 396C 引物對，ABO EX0N7 272A 引物對，ABOEX0N7 272T 引物對，ABO EX0N7 429C 引物對，ABO EX0N7 429G 引物對，ABO EX0N7 635G 引物對，ABO EX0N7 635A 引物對，ABO EX0N6 22A 引物對，ABO EX0N7 688G 引物對，ABO EX0N7 688C引物對及內參引物對的引物板和濃縮dNTP-Buffer ； 所述 ABO INTR0N2 396G位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所示的核苷酸序列； 所述 ABO INTR0N2 396C 位于 Intron2 520-537 和 Intron2本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的引物組，其特征是包括ABO?INTRON2?396G引物對，ABO?INTRON2?396C引物對，ABO?EXON7?272A引物對，ABO?EXON7?272T引物對，ABO?EXON7?429C引物對，ABO?EXON7?429G引物對，ABO?EXON7?635G引物對，ABO?EXON7?635A引物對，ABO?EXON6?22A引物對，ABO?EXON7?688G引物對，ABO?EXON7?688C引物對及內參引物對；所述ABO?INTRON2?396G位于Intron2?520?537和Intron2?347?369的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列；所述ABO?INTRON2?396C位于Intron2?520?537和Intron2?347?369的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.3所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?272A位于EXON7455?472和EXON7?253?272的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?272T位于EXON7455?472和EXON7?253?272的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.6所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?429C位于EXON7?202?221和EXON7?429?446的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.7、SEQ?ID?NO.8所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?429G?位于EXON7?202?221和EXON7?429?446的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.7、SEQ?ID?NO.9所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?635G位于EXON7?500?517和EXON7?635?654的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.10、SEQ?ID?NO.11所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?635A位于EXON7?500?517和EXON7?635?654的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.10、SEQ?ID?NO.12所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON6?22A位于EXON6?1?22和INTRON6?124?146的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.13、SEQ?ID?NO.14所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?688G位于3’NCR?97?119和EXON7?671?688的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.15、SEQ?ID?NO.16所示的核苷酸序列；所述ABO?EXON7?688C位于3’NCR?97?119和EXON7?671?688的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ?ID?NO.15、SEQ?ID?NO.17所示的核苷酸序列。...
【技術特征摘要】
1.一種用于檢測人類紅細胞ABO血型基因的引物組，其特征是包括ABO INTR0N2 396G引物對，ABO INTR0N2 396C 引物對，ABO EX0N7 272A 引物對，ABO EX0N7 272T 引物對，ABOEX0N7 429C 引物對，ABO EX0N7 429G 引物對，ABO EX0N7 635G 引物對，ABO EX0N7 635A 引物對，ABO EX0N6 22A引物對，ABO EX0N7 688G引物對，ABO EX0N7 688C引物對及內參引物對； 所述 ABO INTR0N2 396G 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所示的核苷酸序列；所述 ABO INTR0N2 396C 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.3所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272A位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.5所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272T位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.6所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429C位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.8所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429G位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.9所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635G位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.11所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635A位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.12所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N6 22A位于EX0N6 1_22和INTR0N6 124-146的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.13、SEQ ID N0.14所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688G位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.16所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688C位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物對的上、下游引物分別是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.17所示的核苷酸序列。2.一種用于檢測人類紅細胞...
【專利技術屬性】
技術研發人員：趙衛軍，李勁松，馬靜，
申請(專利權)人：天津市秀鵬生物技術開發有限公司，
類型：發明
國別省市：天津;12
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