一種竹蓀水提殘渣中抗氧化劑多糖的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種竹蓀水提殘渣中抗氧化劑多糖的制備方法，該方法包括以下操作步驟：竹蓀水提殘渣的制備，多糖提取液的配置，竹蓀水提殘渣中多糖的提取，多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除，脫色，小分子雜質(zhì)的去除，多糖的純化，透析與冷凍干燥，抗氧化活性檢測等。本發(fā)明專利技術(shù)不僅提供了一種成本低、高效、無污染的竹蓀中抗氧化劑多糖的制備方法，而且提供了竹蓀水提殘渣綜合加工利用的方法，拓展了竹蓀的深加工領(lǐng)域。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及多糖領(lǐng)域，確切地說是一種竹蓀水提殘渣中高活性多糖的制備方法。
技術(shù)介紹
竹蘇Dietyophora indusiata俗名有竹參、竹筌、面紗菌、網(wǎng)紗菌、竹姑娘，隸屬于腹菌綱、鬼筆目、鬼筆科、竹蓀屬，是名貴的食用菌，歷史上列為“宮廷貢品”，近代做為國宴名菜，為食療佳品。據(jù)報道竹蓀能補(bǔ)氣養(yǎng)陰、潤肺止咳、清熱利濕，具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、益氣補(bǔ)腦、寧神健體的功效；另外，竹蓀能夠保護(hù)肝臟，減少腹壁脂肪的積存，有俗稱“刮油”的作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明其對高血壓、神經(jīng)衰弱、腸胃疾病等具有一定的保健作用。雖然竹蓀很珍貴，但對竹蓀的研究與開發(fā)利用并不充分，目前主要集中在竹蓀的種植、化學(xué)成分的測定與藥理活性檢測等方面，而對竹蓀的主要活性化學(xué)成分多糖的研究不多，也未見對竹蓀水提殘渣中高活性多糖分離純化的報道。而本專利技術(shù)即是提供了一種竹蓀水提殘渣中高活性抗氧化劑多糖的制備方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供。本專利技術(shù)通過以下方案實(shí)現(xiàn) ，包括以下步驟 (1)竹蓀水提殘渣的制備將干燥的竹蓀磨碎，過80-100目篩得竹蓀粉末。稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40-50倍蒸餾水，攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1-2小時，過濾。濾渣重復(fù)上述提取步驟1-2次。過濾獲得竹蓀水提殘渣； (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合堿溶液； (3)竹蓀水提殘渣中多糖的提`取取一定量的竹蓀水提殘渣加入混合堿提液進(jìn)行提取，用雙層濾布過濾，濾液濃縮到原來體積的1/3-1/5后即得竹蓀水提殘渣的多糖提取液； (4)多糖提取液中水不溶性α-(1— 3)-d-葡聚糖的去除攪拌過程中加入冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的PH至6-7，離心去除α-(1 —3)_d型不溶的沉淀，上清液即為所需的β _D_葡聚糖； (5)脫色上清液用25-30%H202進(jìn)行脫色； (6)小分子雜質(zhì)的去除將脫色后的糖液濃縮到原來體積的1/3-1/4，徹底透析，透析液濃縮到原來體積的1/5-1/7后離心去除去沉淀，獲得純凈的多糖濃縮液； (7)多糖的純化把多糖濃縮液稀釋到濃度為1_2%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至45-50°C，保持2-3 h后，立即離心分出沉淀物； (8)透析與冷凍干燥把沉淀溶于蒸餾水中，用截留分子量3500Da的透析袋先對自來水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天。透析液濃縮后冷凍干燥即得干燥的竹蓀多糖。(9)抗氧化活性檢測取凍干的竹蓀多糖進(jìn)行體外清除· OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化試驗(yàn)。所述步驟(3)中混合堿提液的加入量為竹蓀水提殘渣的20-25倍，提取溫度為25-30°C，提取時間為1-2 h，提取次數(shù)為2-3次。所述步驟(4)中乙酸的濃度為1-1. 5 mol/L,離心機(jī)轉(zhuǎn)速5000-8000 rpm,離心時間為 15-30 Hiin0所述步驟(5)中加入H2O2的量為總體積的1/7-1/10，然后加熱到40_50°C，保持2-3 ho所述步驟(6)中透析袋規(guī)格為3500 Da,自來水水透析5-6天,蒸懼水透析3-4天，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為8000-10000 rpm,離心時間為10-15 min。本專利技術(shù)的有益效果 (O提供一種簡單、成本低、高效、無污染的竹蓀水提殘渣中抗氧化劑多糖的制備方法; (2)可實(shí)現(xiàn)竹蓀水提殘渣的充分利用，提高工業(yè)生產(chǎn)過程中的附加值； (3)拓展了竹蓀的深加工領(lǐng)域，為竹蓀的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。具體實(shí)施例方式竹蓀水提殘渣中抗氧化劑多糖的制備方法 (1)竹蓀水提殘渣的制備將干燥的竹蓀磨碎，過80目篩獲得竹蓀粉末。稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40倍蒸餾水， 攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1. 5小時，過濾。濾渣重復(fù)上述提取步驟1-2次，過濾獲得竹蓀水提殘渣； (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合堿溶液； (3)竹蓀水提殘渣中多糖的提取取一定量的竹蓀水提殘渣加入20倍質(zhì)量比的混合堿提液于25°C下提取2 h，用雙層濾布過濾，濾渣重復(fù)提取I次，濾液濃縮到原來體積的1/4后即得竹蓀水提殘渣的多糖提取液； (4)、多糖提取液中水不溶性α-(1— 3)-d-葡聚糖的去除攪拌過程中加入I mol/L冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的pH到為7，然后于5000-8000 rpm轉(zhuǎn)速下離心時間為15-30 min，離心去除α-(1 —3)-d型不溶的沉淀，上清液即為所需的β-D-葡聚糖； (5)脫色上清液加入總體積1/7-1/10的30%Η202，然后加熱到50°C，保持2h，進(jìn)行脫色 (6)小分子雜質(zhì)的去除將脫色后的糖液濃縮為原來的1/3-1/4，用規(guī)格為3500Da透析袋對自來水水透析5天，蒸餾水透析3天，透析液濃縮到原來體積的1/10后于8000-10000 rpm轉(zhuǎn)速下離心10 - 15 min去除去沉淀,獲得純凈的多糖濃縮液； (7)多糖的純化把多糖濃縮液稀釋到1%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至50°C，保持2 h后，立即離心分出沉淀物； (8)透析與冷凍干燥把沉淀溶于蒸餾水中，用截留分子量3500Da的透析袋先對自來水透析，后用重蒸水透析。透析液濃縮后冷凍干燥即得干燥的竹蓀多糖。(9)、抗氧化活性檢測取凍干的竹蓀多糖進(jìn)行體外清除· OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化試驗(yàn)。結(jié)果表明，竹蓀多糖在濃度為2 mg/mL時對0H、02__、H2O2及DPPH的體外清除率達(dá)到86%、83%、74%和91%。說明竹蓀多糖具有較強(qiáng)的清除氧自由基的能力，是一種天然高效的抗氧化 劑。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種竹蓀水提殘渣中抗氧化劑多糖的制備方法，其特征在于包括以下步驟：（1）竹蓀水提殘渣的制備：將干燥的竹蓀磨碎，過80?100目篩得竹蓀粉末；稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40?50倍蒸餾水，攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1?2小時，過濾，濾渣重復(fù)上述提取步驟1?2次，過濾獲得竹蓀水提殘渣；（2）多糖提取液的配置：配制5%NaOH/0.05%?NaBH4?的混合堿溶液；（3）竹蓀水提殘渣中多糖的提?。喝∫欢康闹裆p水提殘渣加入混合堿提液進(jìn)行提取，用雙層濾布過濾，濾液濃縮到原來體積的1/3?1/5后即得竹蓀水提殘渣的多糖提取液；（4）多糖提取液中水不溶性α?(1→3)?d?葡聚糖的去除：攪拌過程中加入冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的pH至6?7，離心去除α?(1→3)?d?型不溶的沉淀，上清液即為所需的β?D?葡聚糖；（5）脫色：上清液用25?30%H2O2進(jìn)行脫色；（6）小分子雜質(zhì)的去除：將脫色后的糖液濃縮到原來體積的1/3?1/4，徹底透析，透析液濃縮到原來體積的1/5?1/7后離心去除去沉淀，獲得純凈的多糖濃縮液；（7）多糖的純化：把多糖濃縮液稀釋到濃度為1?2%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至45?50℃，保持2?3?h后，立即離心分出沉淀物；（8）透析與冷凍干燥：把沉淀溶于蒸餾水中，用截留分子量3500?Da的透析袋先對自來水透析3?4天，后用重蒸水透析2?3天；透析液濃縮后冷凍干燥即得干燥的竹蓀多糖；（9）抗氧化活性檢測：取凍干的竹蓀多糖進(jìn)行體外清除·OH、O2.?、H2O2及DPPH的抗氧化試驗(yàn)。...

【技術(shù)特征摘要】
1.一種竹蓀水提殘渣中抗氧化劑多糖的制備方法，其特征在于包括以下步驟 (1)竹蓀水提殘渣的制備將干燥的竹蓀磨碎，過80-100目篩得竹蓀粉末； 稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40-50倍蒸餾水，攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1-2小時，過濾，濾渣重復(fù)上述提取步驟1-2次，過濾獲得竹蓀水提殘渣； (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合堿溶液； (3)竹蓀水提殘渣中多糖的提取取一定量的竹蓀水提殘渣加入混合堿提液進(jìn)行提取，用雙層濾布過濾，濾液濃縮到原來體積的1/3-1/5后即得竹蓀水提殘渣的多糖提取液； (4)多糖提取液中水不溶性a- (I — 3)-d-葡聚糖的去除攪拌過程中加入冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的PH至6-7，離心去除a-(l —3)_d型不溶的沉淀，上清液即為所需的P-D-葡聚糖； (5)脫色上清液用25-30%H202進(jìn)行脫色； (6)小分子雜質(zhì)的去除將脫色后的糖液濃縮到原來體積的1/3-1/4，徹底透析，透析液濃縮到原來體積的1/5-1/7后離心去除去沉淀，獲得純凈的多糖濃縮液； (7)多糖的純化把多糖濃縮液稀釋到濃度為1_2%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至45-50°C，保持2-3 h后，立即離心分...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王軍輝，孫漢巨，劉詠，李軍紅，姚玉飛，單亮，孫克范，
申請(專利權(quán))人：合肥工業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：