肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒制造技術(shù)

本實用新型專利技術(shù)公開了一種肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成；所述試紙條寬4mm；所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成。本實用新型專利技術(shù)的有益效果為：肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒具有快速、簡便、準(zhǔn)確和靈敏度高的特點，整個操作時間僅需20分鐘就可以判讀結(jié)果。膠體金快速檢測試紙條，以多表位的重組抗原為原料，具有操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高的特點，可單份檢測，易于普及，對于肺炎衣原體IgM抗體的檢測和控制效果明顯。（*該技術(shù)在2022年保護(hù)過期，可自由使用*）

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本技術(shù)涉及一種醫(yī)療器械，具體涉及一種肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒。
技術(shù)介紹
肺炎衣原體(Chlamydia p neumoniae Cpn, Cpn)是人類呼吸道疾病的重要病原體，可引起急慢性呼吸道疾病，社區(qū)獲得的肺炎、支氣管炎和鼻竇炎5-10%由肺炎衣原體引起。緊張引起成人及青少年的非典范肺炎，亦可引起支氣管炎、咽炎及扁桃體炎等急性呼吸道傳染。肺炎衣原體呼吸道感染的臨床表現(xiàn)不典型，通常以咽痛和音啞起病，數(shù)日至7天后出現(xiàn)咳嗽，與其他呼吸道疾病相比，自起病至就醫(yī)的時間以肺炎衣原體感染為最長，因此病初時的低熱，檢查時多已降至正常，異常呼吸音和鼻竇區(qū)壓痛為最常見的特征，白細(xì)胞計數(shù)大多正常，血沉增速，X線胸片常顯示單側(cè)節(jié)段性肺炎，類似非典型性肺炎，嚴(yán)重者病變較廣泛，甚至波及雙肺，也可伴有胸膜炎或胸腔積水。目前，肺炎衣原 體的檢測方法主要有以下幾種實行室檢測1.血象血白細(xì)胞計數(shù)多平常，重癥患者可升高。血沉多增快。2.病原學(xué)查抄是確診本病的靠得住方法。臨床診斷不常用。(I)直接涂片涂片后用Giemsa或免疫熒光單克隆抗體染色，檢測肺炎衣原體包涵體及原體，方法輕巧，但陽性率低。(2)構(gòu)造培養(yǎng)法雞胚卵黃囊接種因檢出陽性率低已罕用。可用細(xì)胞培養(yǎng)法，取咽拭子或收集下呼吸道標(biāo)本，用HEP-2細(xì)胞(喉癌細(xì)胞)或Hela229細(xì)胞培養(yǎng)24 h，再用肺炎衣原體特異性單克隆抗體染色，檢測特異性包涵體。方法較繁雜，且較其他衣原體檢出率低。3.免疫學(xué)檢測是常用的診斷方法。(I)直接免疫熒光法用肺炎衣原體單克隆抗體染色，直接免疫熒光法檢測肺炎衣原體抗原，方法特異靈活且急劇輕巧。(2)微量免疫熒光(MIF)法檢測肺炎衣原體抗體，特異性IgM滴度彡1: 16和(或)IgG彡I 512或雙份血清滴度4倍以上升高者，均可診斷急性傳染。如IgM彡I 16或IgG彡I 512，則為既往傳染。本方法特異性靈活性均較高，且可用于區(qū)分原發(fā)傳染和再傳染，是如今最常用且最靈活的血清學(xué)方法。但要清除血輪回中類風(fēng)濕因子的感化。(3)補體聯(lián)合抗體檢測滴度彡I 64和(或)雙份血清滴度4倍以上升高者，均可診斷急性傳染，但不能用于早期診斷，亦不能區(qū)分為哪種衣原體傳染。4. PCR法檢測肺炎衣原體DNA，靈活性更高，且可和其他種衣原體區(qū)分，其特異性靈活性高于其他方法。據(jù)統(tǒng)計，PCR法檢出率為50% 55%，而直接免疫熒光法及涂片法別離為24% 27%和6% 10%。用連接聚合酶鏈反響(LCR)檢測，可進(jìn)一步進(jìn)步伶俐性及檢出率，但尚未在臨床應(yīng)用。據(jù)報告，PCR-EIA法是一種急劇、輕巧的酶免疫測定法，能進(jìn)步PCR對肺炎衣原體DNA的擴(kuò)增檢測效果，優(yōu)于PCR法，更優(yōu)于培養(yǎng)法。以上方法或多或少地存在著一些不足，如成本高、檢出率低、程序繁瑣等等，這些問題都是當(dāng)前的行業(yè)難題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本技術(shù)的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了一種可以快速定性檢測血清樣本中的肺炎衣原體IgM抗體的肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒。為了實現(xiàn)上述目的，本技術(shù)提供的技術(shù)方案為肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成；所述試紙條寬4_ ;所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應(yīng)膜是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組Cpn-Ag和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的；所述反應(yīng)膜設(shè)置在膠板上；所述膠板上部設(shè)置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙；粗纖維濾紙的下部壓住反應(yīng)膜；所述膠板下部依次設(shè)置有鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊和樣品墊；所述鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊寬O. 9cm ;所述鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊的上部壓住反應(yīng)膜；所述樣品墊位于鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊的下部；所述樣品墊的上部壓住鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊。本技術(shù)的有益效果為肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，具有快速、簡便、準(zhǔn)確和靈敏度高的特點，整個操作時間僅需20分鐘就可以判讀結(jié)果。膠體金快速檢測試紙條，以多表位的重組抗原為原料，具有操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高的特點，可單份檢測，易于普及，對于肺炎衣原體IgM抗體的檢測和控制效果明顯。附圖說明圖1為本技術(shù)提供的肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的盒體示意圖。圖2為本技術(shù)提供的肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的鋁箔袋示意圖。圖3為本技術(shù)提供的肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的未切割前的反應(yīng)板示意圖。圖4為本技術(shù)提供的肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的切割后試紙條的不意圖。其中，I為膠板，2為反應(yīng)膜,3為粗纖維濾紙,4為鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊,5為樣品墊。具體實施方式以下結(jié)合附圖詳細(xì)說明本技術(shù)的具體實施方式。本技術(shù)有多種實施方式，實施例中只是用來表示實施過程及部分最終產(chǎn)品，并不限制本技術(shù)的其它實施方式。實施例1 :肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成,盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；試紙條由反應(yīng)板切割而成；試紙條寬4_ ;反應(yīng)板由膠板1、反應(yīng)膜2、鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊4、粗纖維濾紙3和樣品墊5組成；反應(yīng)膜2是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組Cpn-Ag和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的；反應(yīng)膜2設(shè)置在膠板I上；膠板I上部設(shè)置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙3 ;粗纖維濾紙3的下部壓住反應(yīng)膜2 ;膠板I下部依次設(shè)置有鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊4和樣品墊5 ；鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊4寬O. 9cm ；鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊4的上部壓住反應(yīng)膜2 ;樣品墊5位于鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊4的下部；樣品墊5的上部壓住鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊4。本專利技術(shù)的檢驗原理本試劑盒是采用膠體金免疫層析技術(shù)原理，在硝酸纖維素膜上的檢測線(T線)包被重組肺炎衣原體(Cpn-Ag)，在質(zhì)控線(C線)包被羊抗鼠IgG抗體，在金標(biāo)墊上包被膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgM單抗，用于定性檢測血清(漿)樣本中的肺炎衣原體IgM抗體(Cpn -1gM)。檢測陽性樣本時，樣本中的肺炎衣原體IgM抗體可與膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgM單抗結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合物及樣本在硝酸纖維素膜內(nèi)部向前流動。當(dāng)復(fù)合物經(jīng)過檢測線(T線)時與包被的重組Cpn -Ag結(jié)合，形成“Au—鼠抗人IgM單抗一(Cpn -1gM) — (Cpn- Ag)”而凝集顯色。剩余的膠體金標(biāo)記鼠抗人IgM單抗與C線處包被的羊抗鼠IgG抗體結(jié)合而凝集顯色，檢測陰性樣本時，樣本中不含肺炎衣原體IgM抗體，致使不能形成免疫復(fù)合物，則只能在C線處顯色。一、制備中各指標(biāo)的確定1.膠體金顆粒的選擇1.1原理根據(jù)煮沸條件下氯金酸與檸檬酸三鈉發(fā)生氧化還原反應(yīng)制備膠體金。可以通過調(diào)節(jié)氯金酸和檸檬酸三鈉的加入比例來改變和控制膠體金的顆粒大小。1. 2操作在IOOmL純化水中加入O.1mL 10%氯金酸煮沸、在攪拌條件下加入不同體積的1%檸檬酸三鈉溶液，煮沸5分鐘，制備不同條件的膠體金顆粒，待其自然冷卻回復(fù)至原體積。用鼠抗人IgM單抗標(biāo)記不同顆粒的膠體金，然后再用企業(yè)本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，其特征在于：盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成；所述試紙條寬4mm；所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應(yīng)膜設(shè)置在膠板上；所述膠板上部設(shè)置有1.5cm寬的粗纖維濾紙；粗纖維濾紙的下部壓住反應(yīng)膜；所述膠板下部依次設(shè)置有鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊和樣品墊；所述鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊寬0.9cm；所述鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊的上部壓住反應(yīng)膜；所述樣品墊位于鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊的下部；所述樣品墊的上部壓住鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊。

【技術(shù)特征摘要】
1.肺炎衣原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，其特征在于盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成；所述試紙條寬4_ ;所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、鼠抗人IgM單抗金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應(yīng)膜設(shè)置在膠板上；所述膠板上部設(shè)置有1....

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李習(xí)榮，
申請(專利權(quán))人：北京中檢安泰診斷科技有限公司，
類型：實用新型
國別省市：