一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒制造技術

本實用新型專利技術公開了一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，涉及化學發光免疫分析技術領域，解決目前乙型肝炎病毒核心抗體IgM超微量檢測的技術問題。本實用新型專利技術乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，包括盒體和盒蓋，盒體上方連接盒蓋，盒體的底部放置有2cm厚與盒的尺寸大小相同的海綿托，所述海綿托的左半部設有11個第一凹槽、中間區域設有4個第二凹槽、右半部設有2個第三凹槽，第一凹槽內分別裝有11個對照品瓶，第二凹槽內分別裝有磁性顆粒瓶、生物素化合物瓶和、記物瓶和濃縮樣本稀釋液瓶，第三凹槽分別裝有化學發光底物瓶和濃縮洗滌液瓶。本實用新型專利技術試劑盒主要用途為乙型肝炎病毒核心抗體IgM超微量檢測。（*該技術在2022年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本技術涉及一種試劑盒，屬于乙型肝炎病毒核心抗體IgM化學發光免疫分析

技術介紹
乙型肝炎核心抗體也叫抗-HBc，英文縮寫是HBcAb。包括乙型肝炎核心抗體IgM和乙型肝炎核心抗體IgG，常用競爭法檢測。HBV感染后，在多數人血清中能檢出此抗體，是一種敏感的血清學標志，也是乙型肝炎急性感染的早期標志，在血清中存在的時間很長，有些人滴度很高。在HBsAg和抗-HBs陰性時，能從血清中檢出乙肝核心抗體，高滴度的乙肝核心抗體也是一種傳染標志。抗-HBc可分為三型抗-HBcIgM、抗-HBcIgA、抗-HBcIgG，在HBV感染中這幾個型依次出現，也會依次消失，只有IgG這一型可長期存在。在化驗室報告的化驗單中，如果只標明“抗-HBc”，沒有分型，那么它應當是這三型的總和，不過大部分醫院化驗室報告的都分為IgM和IgG 二型。抗-HDc IgM型，叫做“乙型肝炎核心抗體IgM型”，常常提示為急性HBV感染，或者在慢性乙肝急性發作、慢性乙肝進入活動期，隨著病程的延長或者病情的好轉，IgM逐步消失，而由IgG取代。乙型肝炎病毒核心抗體IgM用于科學研究過程中，對于微量檢測要求較高。目前乙型肝炎病毒核心抗體IgM測定方法有膠體金免疫層析(GICA);蛋白印跡(WB);酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，化學發光法免疫分析(CLIA);其中GICA、ELISA、WB的優點是相對成本低廉，缺點是靈敏度低，乙型肝炎病毒核心抗體IgM含量少的情況下檢測不出；而化學發光法CLIA試劑盒檢測靈敏度比上述方法試劑盒高，但還是不能滿足科研上對乙型肝炎病毒核心抗體IgM超微量檢測的需要。
技術實現思路
本技術克服了當前化學發光法試劑盒不能滿足對乙型肝炎病毒核心抗體IgM超微量檢測的技術問題，提供了一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，解決目前乙型肝炎病毒核心抗體IgM蛋白超微量檢測的問題。本技術采用了以下技術方案來解決技術問題一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，包括盒體和盒蓋，盒體(I)上方連接盒蓋(2)，盒體(I)的底部放置有2cm厚與盒的尺寸大小相同的海綿托(3)，所述海綿托(3)的左半部設有11個第一凹槽、中間區域設有4個第二凹槽、右半部設有2個第三凹槽，第一凹槽內分別裝有11個對照品瓶(5)，第二凹槽內分別裝有磁性顆粒瓶(6)、生物素化合物瓶、標記物瓶(8)和濃縮樣本稀釋液瓶(9)，第三凹槽分別裝有化學發光底物瓶(10)和濃縮洗滌液瓶(11)。作為本技術進一步改進，所述的盒體(I)、盒蓋(2)均采用塑化防水紙質材料制成。作為本技術進一步改進，第一凹槽的截面形狀與所述對照品瓶(5)的截面形狀匹配。作為本技術進一步改進，4個第二凹槽的截面形狀分別與磁性顆粒瓶(6)、生物素化合物瓶(7)、標記物瓶(8)以及濃縮樣本稀釋液瓶(9)的截面形狀匹配。作為本技術進一步改進，2個第三凹槽的截面形狀分別與化學發光底物瓶(10)和濃縮洗滌液瓶(11)的截面形狀匹配。作為本技術進一步改進，所述的對照品瓶(5)，磁性顆粒瓶(6)，生物素化合物瓶(7)，標記物瓶(8)，濃縮樣本稀釋液瓶(9)，化學發光底物瓶(10)和濃縮洗滌液瓶(11)均采用玻璃瓶。與現有技術相比，本技術的有益效果是發光信號明顯提高，對超微量的乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測效果明顯優于現有化學發光免疫分析試劑盒，本技術試劑盒具有靈敏度高，穩定的特點。附圖說明圖1是本技術整體結構示意圖。圖中1盒體；2盒蓋；3海綿托；4第三凹槽；5對照品瓶；6磁性顆粒瓶；7生物素化合物瓶；8標記物瓶；9濃縮樣本稀釋液瓶；10化學發光底物瓶；11濃縮洗滌液瓶。具體實施方式如圖1所示，為本技術乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒的一種實施例。該乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒包括盒體I和盒蓋2，盒體1、盒蓋2均采用塑化防水紙質材料制成。盒體上方連接盒蓋，盒體的底部放置有2cm厚與盒的尺寸大小相同的海綿托3。所述海綿托3的左半部設有11個第一凹槽、中間區域設有4個第二凹槽、右半部設有2個第三凹槽4。第一凹槽內分別裝有11個對照品瓶5，并且第一凹槽的截面形狀與所述對照品瓶5的截面形狀匹配。第二凹槽內分別裝有磁性顆粒瓶6、生物素化合物瓶7、標記物瓶8和濃縮樣本稀釋液瓶9，并且4個第二凹槽的截面形狀分別與磁性顆粒瓶6、生物素化合物瓶7、標記物瓶8以及濃縮樣本稀釋液瓶9的截面形狀匹配。第三凹槽4分別裝有化學發光底物瓶10和濃縮洗滌液瓶11，并且2個第三凹槽的截面形狀分別與化學發光底物瓶10和濃縮洗滌液瓶11的截面形狀匹配。在本實施例中，對照品瓶5，磁性顆粒瓶6，生物素化合物瓶7，標記物瓶8，濃縮樣本稀釋液瓶9，化學發光底物瓶10和濃縮洗滌液瓶11均采用玻璃瓶。制備本技術乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒一、對照品瓶的制備用對照品基質液及乙型肝炎病毒核心抗體IgM純品配制對照品，濃度分別為O、0. 01,0. 02,0. 05,0. 1,0. 2,0. 5、1、2、5、10ng/mL,(其中 Ong/mL 為對照品基質液，不含乙型肝炎病毒核心抗體IgM)，配制11種系列濃度對照品，各濃度對照品分別用3mL規格的西林玻璃瓶分裝ImL/瓶，凍干處理后，_20°C保存，得到本技術對照品瓶5。二、磁性顆粒瓶的制備(I)稱取250mg氨基末端磁性顆粒置于燒杯；(2)加入甲醇及丙酮各5mL反復清洗5遍；(3)磁性分離，棄去上清；(4)加入DMF溶解的IOmLO. 2%的1，4 一苯二異硫氰酸酯(PDITC)溶液，置于恒溫振蕩器，反應10h ；(5)將反應后的磁性顆粒用丙酮及超純水反復清洗6遍；(6)取新制備經PDITC活化的磁性顆粒置于30mL離心管中；(7)加入PBS 25mL,加入4mg鏈親和素，置于恒溫振蕩器中反應20min ；(8)磁性分離，測定反應前后溶液在280nm的OD值，以PBS清洗3次，收集，加入等量丙三醇，-20°C保存 通過實驗檢測效價，在根據最近效價稀釋比例配制鏈親和素化固相磁性顆粒工作液。用5mL規格西林玻璃瓶分裝ImL/瓶，凍干處理后，_20°C保存，得到本技術磁性顆粒瓶6。三、生物素化合物瓶的制備(I)將生物素-N-羥基磺酸基琥珀酰亞胺酯(Sulf0-NHS-Biotin)冰箱取出平衡至室溫;(2) 0. OlM的PBS稀釋抗U鏈抗體至濃度2mg/mL ；(3)稱取Sulfo-NHS-Biotin 2mg于西林瓶中加超純水300 U L，輕輕搖勻活化。(4)立即將活化的生物素溶液54 ii L緩慢加入2mL抗y鏈抗體溶液中，室溫反應30min ；(5)反應液用0. OlM的PBS透析4°C 8h (換液4次)，收集，加入等量丙三醇，_20°C保存。通過實驗檢測效價，在根據最近效價稀釋比例配制抗U鏈抗體生物素化工作液。用5mL規格西林玻璃瓶分裝ImL/瓶，凍干處理后，_20°C保存，得到本技術生物素化合物瓶7。四、標記物瓶的制備(I)將1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(EDC)冰柜取出平衡至室溫；(2)取IOmg 5，10，15-三(4-吡啶基)-20-對苯乙酸卟啉和20mgEDC分別溶于Im本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，包括盒體和盒蓋，其特征在于：盒體(1)上方連接盒蓋(2)，盒體(1)的底部放置有2cm厚與盒的尺寸大小相同的海綿托(3)，所述海綿托(3)的左半部設有11個第一凹槽、中間區域設有4個第二凹槽、右半部設有2個第三凹槽，第一凹槽內分別裝有11個對照品瓶(5)，第二凹槽內分別裝有磁性顆粒瓶(6)、生物素化合物瓶(7)、標記物瓶(8)和濃縮樣本稀釋液瓶(9)，第三凹槽分別裝有化學發光底物瓶(10)和濃縮洗滌液瓶(11)。

【技術特征摘要】
1.一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，包括盒體和盒蓋，其特征在于盒體(I)上方連接盒蓋(2)，盒體(I)的底部放置有2cm厚與盒的尺寸大小相同的海綿托(3)，所述海綿托(3)的左半部設有11個第一凹槽、中間區域設有4個第二凹槽、右半部設有2個第三凹槽，第一凹槽內分別裝有11個對照品瓶(5)，第二凹槽內分別裝有磁性顆粒瓶(6)、生物素化合物瓶(7)、標記物瓶(8)和濃縮樣本稀釋液瓶(9)，第三凹槽分別裝有化學發光底物瓶(10)和濃縮洗滌液瓶(11)。2.根據權利要求1所述的一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，其特征在于所述的盒體(I)、盒蓋(2)均采用塑化防水紙質材料制成。3.根據權利要求1所述的一種乙型肝炎病毒核心抗體IgM檢測試劑盒，其...

【專利技術屬性】
技術研發人員：李勇，胡慶鋒，常立峻，徐海偉，陳秀發，
申請(專利權)人：蘇州長光華醫生物試劑有限公司，
類型：實用新型
國別省市：