本發明專利技術屬于環境工程和微生物工程技術領域。尤其涉及一株降解多環芳烴的解脂耶氏酵母菌(Yarrowia?lipolytica)tzyx3及其與表面活性劑協同在土壤修復中的應用。該菌株為解脂耶氏酵母菌(Yarrowia?lipolytica)tzyx3,在中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC?NO:M?2012241,具備降解多環芳烴的能力。該菌株與表面活性劑發揮協同作用,在治理多環芳烴污染土壤中可以應用。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于環境工程和微生物工程
尤其涉及一株降解多環芳烴的解脂耶氏酵母菌Upolytica ) tzyx3及其與表面活性劑協同在土壤修復中的應用。
技術介紹
多環芳烴(PAHs)是一類持久性有機污染物(POPs)。PAHs污染源主要來自于廢舊機器油、電器產品的潤滑油和來自廢舊金屬拆解中的木材、有機高分子化合物、紙張等含碳氫化合物的物質經不完全燃燒或在還原性氣氛中經熱分解而生成的。由于多環芳烴及其衍生物具有致癌性、致突變性和致畸性,以及急性毒性和亞致死作用,目前已引起人們的極大 關注。多環芳烴(PAHs)污染土壤修復是當前環境修復中研究的熱點。生物降解是對PAHs污染土壤進行修復的重要途徑之一。對于多環芳烴污染,國內外進行了大量多環芳烴降解微生物的篩選工作。到目前為止,已分離出多個具有多環芳烴降解能力的菌株,如假單胞菌屬、分枝桿菌屬、芽孢桿菌屬等,并沒有隱球酵母科用于多環芳烴修復的報道。但是土壤中的PAHs的生物利用率一般較低,通常認為,溶解于液相中的PAHs或其他的底物可被微生物利用,反之若被吸附于土壤上,則較難被微生物利用。有研究表明,表面活性劑能促進PAHs從土壤中釋放,使PAHs分配到表面活性劑膠束中或吸附到表面活性劑單體上,提高其生物有效性。
技術實現思路
本專利技術針對現有技術中單微生物修復存在的不足之處、針對多環芳烴吸附于土壤中難降解的特點,提供一種降解多環芳烴菌株、該菌株與表面活性劑發揮協同作用,在治理多環芳烴污染土壤中可以應用。為達到上述目的,本專利技術是通過以下技術方案得以實現的一株降解多環芳烴的菌株,其特征在于,該菌株為解脂耶氏酵母菌(ferroWatzyx3,在中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC NO M 2012241,具備降解多環芳烴的能力。所述菌株具有以多環芳烴為唯一碳源和能源進行生長的能力。所述菌株在多環芳烴土壤中具有良好的降解多環芳烴的能力。所述菌株的ITS序列如SEQ NO.1所示。根據所述降解多環芳烴的菌株,其特征在于所述多環芳烴選自萘、菲、熒蒽、芘、苯并蒽、苯并芘的的一種或多種的混合物。所述降解多環芳烴的菌株在多環芳烴污染的土壤的生物修復中的應用。所述降解多環芳烴的菌株與表面活性劑協同作用在快速降解土壤中多環芳烴中的應用。利用所述降解多環芳烴的菌株進行土壤生物修復的方法,其特征在于該方法由以下步驟組成選取多環芳烴污染土壤100g,tzyX3按質量百分比2. 0%用量與土壤混合均勻,表面活性劑加入量為污染土壤的干重的O. 1%,加水使土壤含水率保持在15%,放入恒溫振蕩器中,控制培養溫度在25°C的恒溫條件下,振蕩培養修復15天。所述表面活性劑選自腐植酸、鼠李糖脂、Triton X-100、Tween80、β_環糊精中的一種。·本專利技術提供的解脂耶氏酵母菌(/arroffia Iipolytica),命名為tzyx3,于2012年6月24日保藏于“中國典型培養物保藏中心”,其保藏號CCTCC NO M 2012241。地址中國武漢武漢大學。tzyx3是從浙江省臺州市固體廢棄物拆解場某污染土壤中分離并篩選得到。菌株可在15 35 °C,pH值6. O 8. 5培養條件下較好生長;菌株在YETO平板上培養三天菌落特征為圓形,白色奶油狀,表面光滑,邊緣整齊;細胞卵圓形,進行出芽生殖,培養七天后出現不太發達的有隔假菌絲。作為優選,本專利技術所述菌株能以多環芳烴為唯一碳源和能源生長。作為優選,本專利技術菌株與表面活性劑聯用具有快速降解土壤中多環芳烴的能力。上述與表面活性劑發揮協同作用修復土壤的多環芳烴降解菌的篩選方法,可按如下步驟依次實施(1)從固廢拆解場采集距地表下5 20cm處表層土壤樣品,作為菌源進行自然富集培養;所述富集培養基含有胰蛋白胨、葡萄糖及酵母膏;(2)取(I)中所述富集培養液接種于無機鹽選擇培養基中進行選擇培養,所無機鹽選擇培養基含有K2HP04、MgS04 ·7Η20、(NH4) 2S04、萘、菲、熒蒽、芘、苯并蒽、苯并芘等多環芳烴(多環芳烴萘、菲、突蒽、花、苯并蒽、苯并花的濃度均為150mg/L 250mg/L);(3)取(2)中所述選擇培養物稀釋涂布于固體無機鹽選擇培養基上,進行分離進行分離即得到多環芳烴降解菌tzyx3。上述多環芳烴降解菌tzyx3可用于多環芳烴土壤污染的生物修復。具體地,本專利技術可采用降解多環芳烴菌株與表面活性劑聯合對多環芳烴污染土壤進行修復。本專利技術tzyx3可在15 35 °C,pH值6. O 8. 5培養條件下較好生長;菌株在YEH)平板上培養三天菌落特征為圓形,白色奶油狀,表面光滑,邊緣整齊;細胞卵圓形,進行出芽生殖,培養七天后出現不太發達的有隔假菌絲。tzyx3在YETO (葡萄糖2. 0% ;胰蛋白胨2. 0% ;酵母粉1. 0%)培養基上培養三天菌落特征為圓形,白色奶油狀,表面光滑,邊緣整齊;細胞卵圓形,進行出芽生殖,培養七天后出現不太發達的有隔假菌絲。tzyx3的生理生化特征,見表1.表I Tzyx3的生理生化特征權利要求1.一株降解多環芳烴的菌株,其特征在于,該菌株為解脂耶氏酵母菌(ferroffia 7i/7o7_Fiica) tzyx3,在中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC NO M 2012241,具備降解多環芳烴的能力。2.根據權利要求1所述降解多環芳烴的菌株,其特征在于所述菌株具有以多環芳烴為唯一碳源和能源進行生長的能力。3.根據權利要求1所述降解多環芳烴菌株,其特征在于所述菌株在多環芳烴土壤中具有良好的降解多環芳烴的能力。4.根據權利要求1所述降解多環芳烴的菌株,其特征在于所述菌株的ITS序列如SEQ NO.1所示。5.根據權利要求1所述降解多環芳烴的菌株,其特征在于所述多環芳烴選自萘、菲、熒蒽、芘、苯并蒽、苯并芘的的一種或多種的混合物。6.根據權利要求1所述降解多環芳烴的菌株在多環芳烴污染的土壤的生物修復中的應用。7.根據權利要求1所述降解多環芳烴的菌株與表面活性劑協同作用在快速降解土壤中多環芳烴中的應用。8.利用權利要求1所述降解多環芳烴的菌株進行土壤生物修復的方法,其特征在于該方法由以下步驟組成選取多環芳烴污染土壤100g,tzyx3按質量百分比2. 0%用量與土壤混合均勻,表面活性劑加入量為污染土壤的干重的O. 1%,加水使土壤含水率保持在15%,放入恒溫振蕩器中,控制培養溫度在25°C的恒溫條件下,振蕩培養修復15天。9.根據權利要求8所述降解多環芳烴的菌株進行土壤生物修復的方法,其特征在于所述表面活性劑選自腐植酸、鼠李糖脂、Triton X-100、Tween80、β-環糊精中的一種。全文摘要本專利技術屬于環境工程和微生物工程
尤其涉及一株降解多環芳烴的解脂耶氏酵母菌(Yarrowia lipolytica)tzyx3及其與表面活性劑協同在土壤修復中的應用。該菌株為解脂耶氏酵母菌(Yarrowia lipolytica)tzyx3,在中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC NOM 2012241,具備降解多環芳烴的能力。該菌株與表面活性劑發揮協同作用,在治理多環芳烴污染土壤中可以應用。文檔編號B09C1/10GK102994404SQ20121038716公開日2013本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一株降解多環芳烴的菌株,其特征在于,該菌株為解脂耶氏酵母菌(Yarrowia?lipolytica)tzyx3,在中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC?NO:M?2012241,具備降解多環芳烴的能力。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員:張昕欣,于紅艷,奚立民,
申請(專利權)人:臺州職業技術學院,
類型:發明
國別省市:
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