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    一株多環芳烴降解菌1-25R09ZXC-2及其應用制造技術

    技術編號:10367984 閱讀:189 留言:0更新日期:2014-08-28 11:32
    一株多環芳烴降解菌1-25R09ZXC-2及其應用,涉及環境污染物生物處理。所述多環芳烴降解菌為(Dietzia?sp.)1-25R09ZXC-2,登記入冊編號為CGMCC?No.9031。可用于降解各種有機化合物中的多環芳烴,可用于多環芳烴污染的水體和土壤生物處理與修復。所述有機化合物包括但不限于萘、菲、芘的混合多環芳烴。實驗證明,所述多環芳烴降解菌為(Dietzia?sp.)1-25R09ZXC-2能夠利用萘、菲、芘的混合多環芳烴作為能源和碳源生長繁殖,該菌15天能將無機鹽培養基中的萘、菲、芘的混合多環芳烴降解68.43%。

    【技術實現步驟摘要】
    —株多環芳烴降解菌1-25R09ZXC-2及其應用
    本專利技術涉及環境污染物生物處理,尤其是涉及一株多環芳烴降解菌1-25R09ZXC-2及其應用
    技術介紹
    多環芳經(PolycyclicAromatic Hydrocarbons, PAHs)是一類含有至少 2 個苯環的芳香化合物,化學結構十分穩定,疏水性強,不易降解,包括萘、菲、芘等在內,有200多種。PAHs具有高毒性,有很強的“三致”作用,即:致癌、致畸和致突變作用(Sato H, Aoki Y.Mutagenesis by environmental pollutants and bio-monitoring ofenvironmental mutagens[J].Curr Drug Metab.2002,3(3):311-319 ;Phillips DH.Fiftyyears of benzo (a)pyrene[J].Nature.1983, 303(5917):468-472 ;Sternberg SS.Thecarcinogenesis, mutagenesis and teratogenesis of insecticides.Review of studiesin animals and man[J].Pharmacology&Therapeutics.1979,6(I):147-166.)。PAHs 是環境致癌化學物質中最大的一類,其中,苯并[α]芘、苯并[α]蒽等是危害最大的,苯并[α]芘是第一個被發現的環境化學致癌物,被國際癌癥研究機構指定為一級致癌物質(Autrup H, Harris CC, Trump BF et al.Metabolism of benzo (a) pyrene and identificationof the major benzo(a)pyrene-DNA adducts in cultured human colon[J].CancerRes.1978,38(llPtl):3689-3696.),已列為國內外環境監測的常規項目之一。PAHs已受至Ij各國環境保護組織的重視,美國環境保護署將16種未帶取代基的PAHs列入了優先治理的污染物黑名單。 環境中的PAHs可以通過多種方式去除,包括自然揮發、光降解、化學降解、生物降解、顆粒吸附等,微生物轉化與降解被認為是環境中PAHs去除最為徹底有效的方式(Dua M,Singh, A., Sethunathan, N., Johri, A.K.Biotechnology and bioremediation:successesand I imitations[J].Appl Microbiol Biotechnol.2002,59 (2-3):143-152.)。 目前,已知的環境中PAHs降解微生物有許多,包括細菌、放線菌、真菌、藻類等。PAHs的細菌降解已有廣泛的研究,許多細菌被分離鑒定為PAHs降解菌,這些菌株主要包括Pseudomonas、Sphingomonas、Cycloclasticus、Burkholderia、Rhodococcus > Polaromonas >Neptunomonas> Janibacter> Nocardia、Bacillus、Mycobacterium 等屬。
    技術實現思路
    本專利技術的目的是提供一株多環芳烴降解菌。本專利技術的另一目的是提供一株多環芳烴降解菌在降解各種有機化合物中的應用。所述多環芳烴降解菌為(Dietzia sp.) 1-25R09ZXC-2,菌株已于2014年04月09日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,保藏地址:北京市朝陽區北辰西路I號院3號,中國科學院微生物研究所,郵政編碼:100101,登記入冊編號為=CGMCCN0.9031。該菌株來源于楚科奇海的表層沉積物,經人工富集培養、分離純化得到;該菌株為革蘭氏染色陰性的迪茨氏菌(Dietzia sp.)的菌株1_25R09ZXC_2,生物學特性為觸酶陰性,氧化酶陽性,非發酵型,專性需氧,菌體形態為圓形,橙黃色不透明,表面光滑濕潤,邊緣規則,無暈環,中央凸起,直徑為I~2mm ;該菌株的最適生長條件為:pH = 6.5~8.5,溫度25 ~28?。可用于降解各種有機化合物中的多環芳烴,可用于多環芳烴污染的水體和土壤生物處理與修復。所述有機化合物包括但不限于萘、菲、芘的混合多環芳烴。實驗證明,所述多環芳烴降解菌為(Dietzia sp.) 1_25R09ZXC_2能夠利用萘、菲、芘的混合多環芳烴作為能源和碳源生長繁殖,該菌15天能將無機鹽培養基中的萘、菲、芘的混合多環芳烴降解68.43%。【附圖說明】圖1為1-25R09ZXC-2在混合多環芳烴中的降解圖。【具體實施方式】實例一:Dietzia sp.1-25R09ZXC-2 的分離與鑒定現場采集楚科奇海的表層沉積物,采用IOOmL海水培養基加入萘、菲、芘混合多環芳烴在25°C 180r/min條件下進行富集培養。兩周后,在固體培養基(M2)中稀釋涂布平板,得到多株純菌,純菌經過接種至液體培養基中驗證其降解石油烴的能力,最后得到一株多環芳烴烴的高效降解菌1-25R09ZXC-2,該菌經16S rDNA鑒定為迪茨氏菌(Dietzia sp.);選取其中相似序列,用MEGA5.0計算出序列的系統進化距離,構建系統進化樹。進化樹顯示,與其相似度最高的菌株都為Dietzia sp.菌株。結合菌株的16S rDNA的測定結果,將其歸屬于迪茨氏菌(Dietzia sp.)。固體培養基(M2)的成分:乙酸鈉5g/L,檸檬酸鈉0.05g/L,普通肉湯培養基0.5g/L,蛋白胨0.lg/L,酵母粉0.lg/L,蘋果酸0.05g/L,葡萄糖lg/L,鹿糖0.5g/L,硝酸銨lg/L,氯化銨0.2g/L,酒石酸鈉0.05g/L,可溶性淀粉0.5g/L,瓊脂粉15g/L,加海水至1L,調pH7.5,115°C高壓蒸汽滅菌30min后補加I %體積已滅菌的KH2PO4溶液(10g/L, ρΗ6.7)及 0.1%體積 0.22 μ m 濾膜除菌的 FeSO4 (0.4g/L)。實例二:Dietzia sp.1_25R09ZXC_2降解混合多環芳烴的能力測試將Dietzia sp.1_25R09ZXC_2接種至含萘、菲、芘混合多環芳烴的海水培養基中,在180r/min、25°C搖床中避光培養,每隔兩天分別取樣測定培養液中萘、菲、芘混合多環芳烴的降解率,實驗結果見圖1。由圖1可以看出Dietziasp.1_25R09ZXC_2在兩周內將無機鹽培養基中的萘、菲、芘的混合多環芳烴降解68.43%。本文檔來自技高網
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    【技術保護點】
    多環芳烴降解菌(Dietzia?sp.)1?25R09ZXC?2,菌株已于2014年04月09日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,登記入冊編號為CGMCC?No.9031。

    【技術特征摘要】
    1.多環芳烴降解菌(Dietziasp.)l-25R09ZXC-2,菌株已于2014年04月09日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,登記入冊編號為CGMCC N0.9031。2.如權利要求1所述多環芳烴降解菌(Dietziasp.) 1-25R09ZX...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:邵宗澤王萬鵬張榮秋
    申請(專利權)人:國家海洋局第三海洋研究所中國大洋礦產資源研究開發協會
    類型:發明
    國別省市:福建;35

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