• 
    <ul id="o6k0g"></ul>
    <ul id="o6k0g"></ul>
    當前位置: 首頁 > 專利查詢>湖南大學專利>正文

    一株高效降解木質素的水稻內生菌制造技術

    技術編號:8449141 閱讀:263 留言:0更新日期:2013-03-21 02:45
    本發明專利技術公開了一株用于高效降解木質素的水稻內生菌Pantoea?sp.Sd-1,保藏號為CGMCC?No.6698。本發明專利技術水稻內生菌是一株能夠在以堿木質素為唯一碳源的培養基上生長的菌株。該菌株在補充了1%葡萄糖和0.5%蛋白胨的含有3g/L堿木質素的液體培養基中,在培養4天后木質素褪色率與降解率分別達到52.38%和69.06%。在補充了1%葡萄糖和0.5%蛋白胨的含有10g/L水稻秸稈的液體培養基中,秸稈降解率最高可達54.51%。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及從水稻中分離獲得的一株具有高效降解木質素能力的水稻內生細菌。
    技術介紹
    資源利用以及環境問題是全球關注的兩大重要主題。木質纖維素材料,如糧食作物和經濟作物生產中的副產物農作物秸桿,是一種可供開發和綜合利用的寶貴資源。由于結構復雜,分子量大,不含易水解的單元,木質素是公認的最難以化學和生物降解的天然高聚物之一。木質纖維素材料中,木質素與纖維素以共價鍵形式緊密接合,將纖維素分子包埋于其中,形成堅固的天然屏障阻礙分解纖維素,而將纖維素材料降解成單糖是進一步發酵生產燃料乙醇的基礎。因此,木質素的降解是能否有效利用木質纖維素,降低生物能源生產成本的關鍵。造紙廢水是目前最主要的環境污染源之一,其主要成份是未降解的木質素類化合物及其衍生物,這些難以降解的物質對受納水體造成嚴重污染,破壞水體生態系統,直接威脅人類健康。簡而言之,木質素降解困難的技術瓶頸,制約了資源再利用,同時也帶來了環境污染問題。目前,降解木質素主要采用理化處理和生物降解。理化處理能源成本較高,且易造成二次污染。篩選并利用微生物降解木質素不僅可以緩解環境污染,生產生物能源,還可以通過控制性的解聚,變廢為寶,生成有利用價值的芳香族化合物,實現資源再利用。在微生物資源中,植物內生菌作為一類與植物互利共生的微生物,分布廣泛,生長環境獨特,作為植物木質素生物降解的新資源開發,具有很強的目的性和選擇性,但目前高效降解木質素的植物內生細菌的研究基本還是空白。
    技術實現思路
    本專利技術所要解決的技術問題是提供一種高效降解木質素的水稻內生菌,該水稻內生菌具有強的木質素褪色率和降解率,并能有效降解水稻秸桿,在資源再利用及環境治理等方面具有很大的潛力。本專利技術提供的技術方案是一株高效降解木質素的水稻內生細菌,其是sp. Sd-I,保藏號為CGMCC No. 6698,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。本專利技術所述水稻內生細菌已于2012年10月22日為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC所保藏(保藏地址是北京市朝陽區北辰西路I號院3號),其保藏號為CGMCC. 6698,分類命名為泛菌sp.,經檢測存活。 本專利技術水稻內生細菌來源于水稻種子,結合菌落菌體形態特征和基于細菌16S rDNA基因序列的系統發育分析,鑒定為菌,命名為Sd_l。目前為止,國內外尚未有關于屬的菌株應用于木質素降解及水稻秸桿處理,本專利技術為木質素降解研究提供了一種新的微生物資源。 本專利技術水稻內生細菌Sd-I菌株的分離、純化和篩選過程為將秈稻(谷梅4號)種子表面消毒干凈后置于內生菌分離培養基TWYE上,27°C培養待內生菌長出再結合劃線分離法在相應的固體PDA平板上進行分離,直至獲得各種微生物的純培養。將分離得到的菌株純培養接種到以木質素為唯一碳源的固體平板篩選培養基上,放入生化培養箱中恒溫靜置培養,每天觀察,篩選生長效果最好的菌株,即為高效降解木質素的菌株,再劃線分離得到最終的純培養菌株。所述TWYE培養基組成為酵母提取物O. 25g, KH2PO4 O. 5g,瓊脂18g,去離子水定容至1L,調節PH值范圍7. 2±0. 2。PDA培養基組成為土豆200g,煮沸30min后過濾,濾液中加入IOg葡萄糖,瓊脂15g,去離子水定容至1L,自然PH。木質素為唯一碳源的培養基組成為堿木質素 3g, (NH4)2SO4 2g,K2HPO4 lg,MgSO4 O. 2g,CaCl2 0. lg,FeSO4 0. 05,MnSO40.02g,KH2PO4 lg,瓊脂15g,去離子水定容至1L,pH為7· 0 7· 4。本專利技術具有以下有益效果本專利技術彌補了常規微生物對木質素降解率低,降解時間過長等不足。本專利技術所述菌株Paflioea sp. Sd-I在30°C, 170r/min的條件下培養4天后,在補充了 1%葡萄糖和O. 5%蛋白胨的情況下,可以使含有3g/L木質素的液體培養基的褪色率達到52. 38%,木質素的降解率達到69. 06%。該菌株可以有效降解水稻秸桿中的木質素,本專利技術提供實例表明降解率可達到54. 51%。附圖說明圖I :本專利技術菌株的菌落形態圖;圖2 :本專利技術菌株的菌體在木質素液體培養基中的生長情況;圖3 :本專利技術菌株對木質素的褪色及降解情況;具體實施方式下面通過具體實施方式的詳細描述來進一步闡明本專利技術,但并不是對本專利技術的限制,僅僅作示例說明。實施例I :菌株的生物學鑒定1.菌株形態特征(1)菌落形態特征將單克隆菌落劃線接種至PDA固體培養基中,將平板倒置于恒溫培養箱,30°C培養I 3天,觀察其菌落形態,菌落呈淺黃色,表面光滑、邊緣圓滑,見附圖I。(2)菌體形態特征對菌株進行革蘭氏染色,利用光學顯微鏡觀測,顯示該菌株為短桿狀,革蘭氏陰性菌;2.菌株16SrDNA分析采用細菌基因組DNA提取試劑盒,抽提菌株基因組DNA,以菌株基因組DNA為模板,采用細菌16S rDNA通用引物(27F,1492R),擴增菌株的16S rDNA片段,將得到的細菌16S rDNA 序列與NCBI中的核酸數據庫進行Blast同源性比對(www.ncbi.nlm.nih. gov/Blast), 與數據庫中已知細菌Aflioea屬的16S rDNA序列的相似性達到了 99%,將該菌株鑒定為 Pantoea 屬。3.菌株相關生理生化實驗分別對菌株純培養物進行甲基紅實驗、精氨酸水解實驗、脲酶實驗、糖酵解、V-P實驗等一系列相關生理生化實驗,得出該菌株可以利用蔗糖、乳糖產酸,但不產氣。氧化酶陰性,不產生H2S,不水解脲素及精氨酸,可還原硝酸鹽,具有纖維素降解、不能利用檸檬酸鹽等。通過對比與Pantoea屬的生理生化結果基本一致,詳細結果見表I。表I. Pantoea sp. Sd-I相關生理生化實驗結果本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    一株高效降解木質素的水稻內生細菌,所述水稻內生細菌為Pantoea?sp.?Sd?1,保藏號為CGMCC?No.6698。

    【技術特征摘要】
    1.一株高效降解木質素的水稻內生細菌,所述水稻內生細菌為sp. Sd-Ι,保藏號為 CGMCC No. 6698。2.如權利要求I所述的水稻內生細菌用于降解木質素的應用。3.如權利要求2所述的應用,其特征在于將所述水稻內生細菌按I.4 X IO9CFU的接種量接種到含有3g/L堿木質素并補充1%葡萄糖與O. 5%蛋白胨作為起始...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:朱詠華廖紅東熊現秋劉選明楊曉璐馬江山施小偉林建中
    申請(專利權)人:湖南大學
    類型:發明
    國別省市:

    網友詢問留言 已有0條評論
    • 還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。

    1
    主站蜘蛛池模板: 亚洲av永久无码一区二区三区| 无码AV一区二区三区无码| 无码 免费 国产在线观看91| 国产av无码专区亚洲av果冻传媒| 亚洲av中文无码乱人伦在线咪咕| 亚洲爆乳精品无码一区二区| 无码国内精品久久人妻麻豆按摩 | 国产精品无码一本二本三本色| 亚洲国产精品无码久久青草| 99无码人妻一区二区三区免费| 野花在线无码视频在线播放 | 亚洲精品无码久久千人斩| 无码人妻精品一区二区蜜桃 | 免费无码又爽又刺激高潮 | 精品久久久无码21p发布| 中文字幕精品无码亚洲字| 亚洲av无码一区二区三区天堂| 国产亚洲AV无码AV男人的天堂| 最新亚洲人成无码网www电影| 精品久久久久久无码专区不卡| 小13箩利洗澡无码视频网站 | 亚洲啪AV永久无码精品放毛片| 亚洲中文字幕久久精品无码喷水| 激情无码亚洲一区二区三区| 亚洲精品无码日韩国产不卡av| 精品无码国产自产在线观看水浒传| 亚洲AV无码专区国产乱码电影| 国产a v无码专区亚洲av| 无码日韩精品一区二区人妻| 无翼乌工口肉肉无遮挡无码18| 精品久久久久久中文字幕无码 | 亚洲国产精品无码久久SM| 亚洲AV无码乱码在线观看牲色| 无码毛片一区二区三区中文字幕 | 亚洲av无码专区在线| 无码毛片视频一区二区本码| 久久青草亚洲AV无码麻豆 | 亚洲AV无码成人网站在线观看| 中文字幕久久久人妻无码| 亚洲综合无码无在线观看| 亚洲Av永久无码精品黑人|