微小核苷酸hsa-miR-1909及其應用，序列如SEQIDNo.1所示。本發明專利技術提供的微小核苷酸hsa-miR-1909可做為核酸類透明質酸酶活性抑制劑。這種含有效成分微小核苷酸hsa-miR-1909的透明質酸抑制劑，可人工合成，純度高、得率高、成本低。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微小核苷酸
，尤其涉及一類抑制透明質酸酶活性的miRNA :hsa-miR-1909 及其應用。
技術介紹
微小RNA (microRNAs ；miRNA,又稱小分子RNA)是真核生物中廣泛存在的一種長約16到26個核苷酸的RNA分子，可調節其他基因的表達。miRNA從一些DNA轉錄而來，但無法進一步轉譯成蛋白質的RNA (屬于非編碼RNA)。這些RNA是從初級轉錄本(primarytranscript),也就是pr1-miRNA,轉變成為稱為pre_miRNA的莖環結構,最后成為具有功能的成熟miRNA。pr1-miRNA長度大約為300 1000個堿基，pr1-miRNA經過一次加工后，成為pre-miRNA即microRNA前體,長度大約為70 90個喊基；pre_miRNA再經過Dicer酶酶切后，成為長約16 26nt的成熟miRNA。其特點有(I)位于基因組非編碼區；(2)進化上高度保守；(3)可在轉錄后水平對基因表達進行調節；(4)參與多種生命過程，調控多達30%的蛋白的表達。成熟miRNA通過RNA誘導的沉默復合體(RISC)與靶信使核糖核酸(mRNA)特異結合，從而抑制轉錄后基因表達，在調控基因表達、細胞周期、生物體發育時序等方面起重要作用。尤其微小RNA從5’端起第2-8位的核苷酸在相同微小RNA家族中高度保守，被稱為種子序列(seed sequence),其在轉錄后水平抑制祀信使核糖核酸(mRNA)翻譯過程中起至關重要作用。透明質酸(Hyaluronan、hyaluronic acid,又稱糖醒酸、玻尿酸、琉璃糖碳基酸)，其基本結構是由雙糖單位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺組成的高級多醣類。與其它粘多糖不同，它不含硫。透明質酸為組織基質中具有限制水分及其它細胞外物質擴散作用的成分，它的透明質分子能攜帶500倍以上的水分，為目前所公認的最佳保濕成分，目前廣泛的應用在保養品和化妝品中。作為一種多功能基質，透明質酸廣泛分布于人體各部位，其中皮膚也含有大量的透明質酸。人類皮膚成熟和老化過程也隨著透明質酸的含量和新陳代謝而變化，它可以改善皮膚營養代謝，使皮膚柔嫩、光滑、去皺、增加彈性、防止衰老，在保濕的同時又是良好的透皮吸收促進劑。而透明質酸酶(Hyaluronidase, HYAL)作為一種能水解透明質酸的酶，在生物體皮膚、口腔和關節中的透明質酸酶會隨著機體的衰老或處于病態而分泌增加，隨之引起透明質酸的減少，出現皮膚粗糙干燥、彈性下降、皺褶增加等衰老癥狀，所以通過抑制作為透明質酸水解酶的表達，可有助于維持機體內透明質酸酶的含量。另外，透明質酸酶也是I型過敏反應(如蕁麻疹、特意反應性皮炎等)和腫瘤細胞增殖遷移的參與者，因此，抑制透明質酸酶的活性，既能使透明質酸不被分解以維持其正常生理功能，又能達到抗炎抗過敏的功效。目前，已經報道的透明質酸酶抑制劑按其化學組成可分為蛋白質類、多糖類、生物堿和萜類等，而且大批量制備所需成本較高。迄今，沒有核酸類制劑對于透明質酸酶活性的抑制作用的報道，最接近的現有技術方案為從植物中提取分離純化I，2，3，4，6-五-O-沒食子?；?β -D-葡萄糖(PGG)對透明質酸酶活性的抑制劑，但是其分離純化過程繁瑣，得率低。
技術實現思路
解決的技術問題本專利技術提供一種微小核苷酸hsa-miR-1909及其做為核酸類透明質酸酶活性抑制劑的應用。這種含有效成分微小核苷酸hsa-miR-1909的透明質酸抑制齊U，可人工合成，純度高、得率高、成本低。技術方案微小核苷酸hsa-miR-1909，序列如SEQ ID No.1所示。序列如SEQ ID No.1所示的微小核苷酸hsa-miR-1909在抑制透明質酸酶活性的應用。序列如SEQ ID No.1所示的微小核苷酸hsa-miR-1909在制備抑制透明質酸酶活性藥物上的應用。有益效果 1)本專利技術是人工合成人體中特異性的微小核苷酸，簡單易行； 2)本專利技術水解溶液為DEPC水，可低溫保存，無其他有機溶劑殘留，安全無污染；` 3)本專利技術提供了微小核苷酸hsa-miR-1909作為透明質酸酶抑制劑的應用。附圖說明圖1為用生物信息學軟件RNAhybrid計算得出的上述hsa-miR-1909與所述透明質酸酶(HYALl)的mRNA3’ -非編碼區(3’ -UTR)相互作用從而產生轉錄后抑制作用機制關系; 圖2為載體圖譜pMIR-REP0RT miRNA表達報告基因載體； 圖3為過表達hsa-miR-1909與過表達ncRNA對熒光素酶活性的抑制效果 圖4為hsa-miR-1909抑制HYALl的蛋白印記(western blotting)結果圖。具體實施例方式本專利技術是一種透明質酸酶抑制劑，該透明質酸酶抑制劑中含有微小核苷酸hsa-miR-1909。此處，所述“hsa-miR-1909”是指下面的22個堿基的核酸序列CGCAGGGGCCGG⑶GCUCACCG。以下，通過實施例進一步詳細說明本專利技術，但本專利技術并不限于這些實施例。實施例1 : 對所述hsa-miR-1909進行物種間序列保守性對比發現人源hsa-miR-1909序列與猩猩ppy-miR-1909,人源hsa-miR-6722_3p,水稻osa_miR5836高度相似,序列比對結果如表1.表I本文檔來自技高網...
【技術保護點】
微小核苷酸hsa?miR?1909，其特征在于序列如SEQ?ID?No.1所示。
【技術特征摘要】
1.微小核苷酸hsa-miR-1909，其特征在于序列如SEQID No.1所示。2.序列如SEQID No.1所示的微小核苷酸hsa-miR-...
【專利技術屬性】
技術研發人員：李冬海，楊浩，張辰宇，
申請(專利權)人：南京大學，
類型：發明
國別省市：
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