氧化酶、編碼該酶的多核苷酸、以及它們的應(yīng)用制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了：編碼SEQ?ID?NO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列的多核苷酸，具有SEQ?ID?NO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列的蛋白質(zhì)，包含使本發(fā)明專利技術(shù)蛋白質(zhì)與α?羥基羧酸化合物作用的步驟的α?氧代羧酸化合物的制備方法，以及包含使本發(fā)明專利技術(shù)蛋白質(zhì)與α?羥基羧酸化合物作用獲得對(duì)應(yīng)的α?氧代羧酸化合物的步驟（1）、以及使具有將α?氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L?α?氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)與步驟（1）中得到的α?氧代羧酸化合物作用得到對(duì)應(yīng)的L?α?氨基酸化合物的步驟的L?α?氨基酸化合物的制備方法等。

Oxidase, polynucleotides encoding the enzyme, and their use

The present invention provides amino acid sequence encoding SEQ ID either NO:1, 3 or 5 of the polynucleotide encoding amino acid sequence with either SEQ NO:1 or ID, 3 5 in the protein, the preparation method of containing alpha oxo carboxylic acid compounds of the present invention protein and alpha hydroxy carboxylic acid compound action steps, and the protein of the invention comprises the following steps with alpha hydroxy carboxylic acid compounds alpha oxo carboxylic acid compounds corresponding to the (1), and that with protein and alpha step oxocarboxylic acid amide compounds into the ability of L alpha amino acid compounds corresponding to the (1) alpha oxocarboxylic acid compounds obtained in the corresponding L alpha amino acid compounds steps L alpha amino acid compound preparation method.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】氧化酶、編碼該酶的多核苷酸、以及它們的應(yīng)用
本專利技術(shù)涉及氧化酶、編碼該氧化酶的多核苷酸、以及利用它們的α-氨基酸化合物等的制備方法。
技術(shù)介紹
以往，作為α-氨基酸化合物之一的甲硫氨酸用作動(dòng)物用飼料添加劑。在制備該化合物時(shí)，使丙烯醛和甲硫醇反應(yīng)生成3-甲硫基丙醛，再使3-甲硫基丙醛與氫氰酸、氨和二氧化碳反應(yīng)生成5-（2-甲基-巰基乙基）-乙內(nèi)酰脲（甲硫氨酸乙內(nèi)酰脲）。最后，將5-（2-甲基-巰基乙基）-乙內(nèi)酰脲通過堿水解生成堿金屬甲硫氨酸鹽，隨后通過用酸例如硫酸或碳酸中和使甲硫氨酸游離（例如，參見專利文獻(xiàn)1等）。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1:特開昭55-102557號(hào)公報(bào)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
專利技術(shù)要解決的課題上述制備方法使用氫氰酸和丙烯醛作為C1或C3構(gòu)成要素，但這些原料化合物的處理需要充分的管理和與其相適合的設(shè)備等。因此，期望開發(fā)例如甲硫氨酸等α-氨基酸化合物的新的制備方法。解決課題的手段本專利技術(shù)提供下列：第1項(xiàng)．編碼下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的多核苷酸（下文也稱為本專利技術(shù)多核苷酸(A)）：（A1）SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQIDNO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列；第2項(xiàng)．前述第1項(xiàng)記載的多核苷酸，其具有SEQIDNO:2、4、6、15、16或17中的任一所示的核苷酸序列；第3項(xiàng)．在宿主細(xì)胞內(nèi)可發(fā)揮功能的啟動(dòng)子與前述第1或2項(xiàng)記載的多核苷酸以可發(fā)揮功能的形式連接而成的多核苷酸；第4項(xiàng)．含有前述第1至3項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的多核苷酸的重組載體（下文也稱為本專利技術(shù)重組載體）；第5項(xiàng)．前述第4項(xiàng)記載的重組載體，進(jìn)一步包含編碼具有將α-氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列的多核苷酸、或該多核苷酸與在宿主細(xì)胞內(nèi)可發(fā)揮功能的啟動(dòng)子以可發(fā)揮功能的形式連接而成的多核苷酸；第6項(xiàng)．前述第5項(xiàng)記載的重組載體，其中具有將α-氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列是下述（B1）至（B3）中任一氨基酸序列：（B1）SEQIDNO:7所示的氨基酸序列、（B2）i）與SEQIDNO:7所示的氨基酸序列具有90％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-甲硫氨酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（B3）i）在SEQIDNO:7所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-甲硫氨酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列；第7項(xiàng)．將前述第1至3項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的多核苷酸或前述第4項(xiàng)記載的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞而成的轉(zhuǎn)化體；第8項(xiàng)．前述第7項(xiàng)記載的轉(zhuǎn)化體，其中宿主細(xì)胞是微生物或大腸桿菌；第9項(xiàng)．將前述第5或6項(xiàng)記載的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞而成的轉(zhuǎn)化體；第10項(xiàng)．前述第9項(xiàng)記載的轉(zhuǎn)化體，其中宿主細(xì)胞是微生物或大腸桿菌；第11項(xiàng)．擁有前述第1至3項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的多核苷酸的轉(zhuǎn)化體；第12項(xiàng)．轉(zhuǎn)化體，其擁有：i）具有編碼具有將α-氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列的核苷酸序列的多核苷酸，或該多核苷酸與在宿主細(xì)胞內(nèi)可發(fā)揮功能的啟動(dòng)子以可發(fā)揮功能的形式連接而成的多核苷酸；和ii）前述第1至3項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的多核苷酸；第13項(xiàng)．重組載體的制備方法，其包含在可在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的載體中整合前述第1至3項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的多核苷酸的步驟；第14項(xiàng)．轉(zhuǎn)化體的制備方法，其包含將前述第1至3項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的多核苷酸或前述第4至6項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞的步驟；第15項(xiàng)．具有下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的蛋白質(zhì)（下文也稱為本專利技術(shù)蛋白質(zhì)(A)）：（A1）SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQIDNO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列；第16項(xiàng)．α-氧代羧酸化合物的制備方法（下文也稱為本專利技術(shù)制備方法1），其包含使具有下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的蛋白質(zhì)與α-羥基羧酸化合物作用的步驟：（A1）SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQIDNO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列；第17項(xiàng)．前述第16項(xiàng)記載的制備方法，其中α-羥基羧酸化合物是含硫α-羥基羧酸化合物，對(duì)應(yīng)的α-氧代羧酸化合物是含硫α-氧代羧酸化合物；第18項(xiàng)．前述第17項(xiàng)記載的制備方法，其中：含硫α-羥基羧酸化合物是式（1）所示化合物：式中，R1表示氫或任選取代的碳原子數(shù)為1-8的烷基；含硫α-氧代羧酸化合物是式（2）所示化合物：式中，R1表示與前述相同的含義；第19項(xiàng)．前述第16至18項(xiàng)中任一項(xiàng)記載的制備方法，其中本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
編碼下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的多核苷酸：（A1）SEQ?ID?NO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQ?ID?NO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2?羥基?4?（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2?氧代?4?（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQ?ID?NO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2?羥基?4?（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2?氧代?4?（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQ?ID?NO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2?羥基?4?（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2?氧代?4?（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列。

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】2014.07.11 JP 2014-1430211.編碼下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的多核苷酸：（A1）SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQIDNO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列。2.權(quán)利要求1記載的多核苷酸，其具有SEQIDNO:2、4、6、15、16或17中的任一所示的核苷酸序列。3.在宿主細(xì)胞內(nèi)可發(fā)揮功能的啟動(dòng)子與權(quán)利要求1或2記載的多核苷酸以可發(fā)揮功能的形式連接而成的多核苷酸。4.含有權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)記載的多核苷酸的重組載體。5.權(quán)利要求4記載的重組載體，進(jìn)一步包含編碼具有將α-氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列的多核苷酸、或該多核苷酸與在宿主細(xì)胞內(nèi)可發(fā)揮功能的啟動(dòng)子以可發(fā)揮功能的形式連接而成的多核苷酸。6.權(quán)利要求5記載的重組載體，其中具有將α-氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列是下述（B1）至（B3）中任一氨基酸序列：（B1）SEQIDNO:7所示的氨基酸序列、（B2）i）與SEQIDNO:7所示的氨基酸序列具有90％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-甲硫氨酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（B3）i）在SEQIDNO:7所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-甲硫氨酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列。7.將權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)記載的多核苷酸或權(quán)利要求4記載的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞而成的轉(zhuǎn)化體。8.權(quán)利要求7記載的轉(zhuǎn)化體，其中宿主細(xì)胞是微生物或大腸桿菌。9.將權(quán)利要求5或6記載的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞而成的轉(zhuǎn)化體。10.權(quán)利要求9記載的轉(zhuǎn)化體，其中宿主細(xì)胞是微生物或大腸桿菌。11.擁有權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)記載的多核苷酸的轉(zhuǎn)化體。12.轉(zhuǎn)化體，其擁有：i）具有編碼具有將α-氧代羧酸化合物氨基化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列的核苷酸序列的多核苷酸，或該多核苷酸與在宿主細(xì)胞內(nèi)可發(fā)揮功能的啟動(dòng)子以可發(fā)揮功能的形式連接而成的多核苷酸；和ii）權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)記載的多核苷酸。13.重組載體的制備方法，其包含在可在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的載體中整合權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)記載的多核苷酸的步驟。14.轉(zhuǎn)化體的制備方法，其包含將權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)記載的多核苷酸或權(quán)利要求4至6中任一項(xiàng)記載的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞的步驟。15.具有下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的蛋白質(zhì)：（A1）SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQIDNO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列。16.α-氧代羧酸化合物的制備方法，其包含使具有下述（A1）至（A4）中的任一氨基酸序列的蛋白質(zhì)與α-羥基羧酸化合物作用的步驟：（A1）SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列、（A2）i）與SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列具有45％以上的序列同一性的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、（A3）i）與由SEQIDNO:2、4或6中的任一所示的核苷酸序列的互補(bǔ)序列組成的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸所編碼的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或（A4）i）在SEQIDNO:1、3或5中的任一所示的氨基酸序列中缺失、置換或添加1個(gè)或多個(gè)氨基酸的氨基酸序列，并且ii）具有將2-羥基-4-（甲硫基）丁酸衍生物氧化轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的2-氧代-4-（甲硫基）丁酸衍生物的能力的蛋白質(zhì)的氨基酸序列。17.權(quán)利要求16記載的制備方法，其中α-羥基羧酸化合物是含硫α-羥基羧酸化合物，對(duì)應(yīng)的α-氧代羧酸化合物是含硫α-氧代羧酸化合物。18.權(quán)利要求17記載的制備方法，其中：含硫α-羥基羧酸化合物是式（1）所示化合物：式中，R1表示...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：朝子弘之，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：住友化學(xué)株式會(huì)社，
類型：發(fā)明
國別省市：日本,JP