本發明專利技術涉及株防治植物真菌病害的多粘類芽抱桿菌及其生產方法，屬于生物農藥技術領域。本發明專利技術采用的菌株是多粘類芽抱桿菌EBL一06菌株，分離自小麥葉面，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?No.2377。該菌株可以防治植物多種真菌病害，提高作物產量C本發明專利技術利用味精廢水來發酵多粘類芽抱桿菌，制備生防菌劑，該下藝生產的多粘類芽抱桿菌生防劑能有效防治多種植物真菌病害，并且生產成本低廉，操作簡單，還可以有效利用味精廢水，減少環境污染。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物農藥
技術介紹
根據味精生產過程中廢水所含污染物情況可分成三類一是高濃度高酸度有機廢水即離交尾液；二是其它中高濃度有機廢水；三是不需處理直接外排的冷卻降溫水。離交尾液是通過離子交換法提取谷氨酸后剩余的“廢液”，它既含有豐富的有機質，還含有N、P、K等少量無機敖及其它微量元素，這些物質都可為微生物生長提供營養。其它中高濃度有機廢水包括淀粉廢水、制糖廢水、發酵洗灌廢水、精制廢水等。淀粉廢水和制糖廢水除了含有一定的有機污染物質外，還有一些懸浮物質；發酵洗灌廢水與離交尾液所含成分基本相同，只是含量較低；精制廢水有時呈酸性，有時呈堿性，有機物污染物質含量較高，這些有機廢水也是微生物資源開發比較理想的營養來源之一。但是，這些廢水如果得不到合理利用，不僅會對環境造成嚴重污染，而且使資源白白浪費掉。文獻報導味精廢水造成較大環 境污染，如中國環境生態網上指出2005年全國味精生產廠家230余家，年排放廢水17萬噸，絕大多數未經治理直接排放迪處蘭迎巡eedu . org . cn / Article / es / envir /ptheory / water / 200511 / 6456 . html )。中國專利(公開號CN 1916155A )中公開了一種利用味精廢水制備發酵培養基及生產生物農藥灰色鏈霉菌的方法，目前，眾多味精廢水處理技術大致分為兩步，一是提取廢水中的谷氨酸菌體單細胞蛋自，通過此步分離菌體，約可除去30 %左右的COD，常用物化方法進行處理(如絮凝、離心等方法)；二是提取菌體后廢液的處理，使其達到排放標準或處理后用于工廠回用，這也是眾多味精廢水處理技術所面臨的關鍵問題，常采用生物處理方法(如厭氧發酵、生物膜法，SBR法等)。[0004 ]多粘類芽飽桿菌(Paenibacillus pol卿yxa )在自然界中分布廣泛,是一種重要的生防菌，對多種植物真菌、細菌病害均有較好的防治作用。王智文等報道了一株多粘類芽抱桿菌CP一 5316菌株對動植物真菌、細菌病原物具有廣譜抗性，利用大孔吸附樹脂對多粘類抱桿菌Cp 一 5316產生的抗真菌活性物質的吸附、解吸性能，篩選出其最佳解吸劑，該活性物質對熱、紫外線穩定，對胰蛋白酶、蛋白酶K有一定的耐受性,對氯仿部分敏感,對酸穩定,對堿敏感(王智文，袁士濤，何亮等，多粘類芽抱桿菌cp — 5316抗真菌活性物質的提取及其部分性質研究，農業環境科學學報，2007 , 26 ( 4 ) : 1464 一 1468 )。中國專利(授權公告號cN I I 69942c )中報導培養的Paenibacillus pol卿及其發酵上清液可以用來防止植物細菌性青枯病，而且還可用來防治植物苗期立枯病，碎倒病，以及黃瓜枯萎病，番茄枯萎病，茄子枯萎病，大豆根腐病，并且對植物具有十分明顯的促進生長作用。中國專利(授權公告號cN I 186441c )中公開了 Paenibacillus p川ymyxa可以作為微生物肥料菌劑中的一種成分分解稻桿，有效解決農業生產中一方面農業垃圾過多，污染水體和環境，處理困難，另一方面化肥，農藥使用過多，土壤惡化 cN I O I 5 I 9639B說明書2 / / 3頁的矛盾。中國專利(授權公告號CN 1325635C)中公開了 Paenibacillus pol卿yxa Jaas cd剛以在較低的濃度卜進入植物體內，井能在植物體內定植，繁殖和傳導；對植物同時具有促進生長，提高產量，防病抗病的作用，特別是對土傳維管束病害具有良好的防治效果。[O 005 ]多粘類芽抱桿菌生防劑的生產方法有多種，如；中國專利(公開號CN 1844360A )中公開了一種多粘類芽抱桿菌的生產方法，其培養基為豆渣。中國專利(授權公告號CN I 186441C )中使用厄肉培養基作為多粘類芽抱桿菌發酵培養基。以味精廢水為培養基生產多粘類芽抱桿菌生防劑的方法未見文獻報道。
技術實現思路
本專利技術的日的是提供一種能夠在植物葉際與根際定植，并且對多種病原菌具有拮抗作用的生防菌一多粘類芽抱桿菌EBL — 06菌株，同時提供一種利用味精廢水生產該生防菌劑的方法。本專利技術所提供的生防菌株是由我們實驗室從小麥的葉面上分離篩選出來的。將其編號為EBL — 06，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為二零零八年二月二十六日，分類命名為多粘類芽抱桿菌 (PaenibacilluspoIymyxa )。保藏編號為CGMCC No . 2377。該菌株具有下列性質I菌落形態特征該菌株在PDA培養基上生長良好，單個菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面粘稠，與培養基結合緊密，菌落中心乳黃色。2菌體形態特征菌體桿狀，革蘭氏染色顯陽性，芽抱端生，包囊膨大。3碳源利用能力可以利用碳源Q —環式糊精；肝糖；D —葡糖胺酸；衣康酸；D —半乳糖酸Y —內醋；D —半乳糖醛酸；2 —環式糊精；肝糖；D —葡糖胺酸；衣康酸；D —半乳糖酸Y —內醋；D —半乳糖醛酸；2 —輕基苯甲酸；4 一輕基苯甲酸；L 一精氨酸；L 一天門冬酞胺；L 一絲氨酸；甘氨酞一 L 一谷氨酸；D —木糖；D —甘露醇；苯乙胺。不可利用碳源丙酮酸甲酷；D —纖維二糖；P —甲基一 D —葡萄糖昔；i 一赤醉糖醇；N —乙酞一 D葡萄糖氨；D，L 一 u —磷酸甘油；u —丁酮酸；Y —經丁酸；L 一苯丙氨酸；L 一蘇氨酸；腐胺。對真菌拮抗能力菌株在PDA固體培養基上表現出對灰葡萄抱霉、黃瓜黑星病的病原菌原菌、木霉菌等的高效拮抗效果。5 [ O 021」2、液體種子制備向高壓滅菌的土顯液體培養基中，接種多粘類芽抱桿菌，十25 — 35oC，ZOOr / min培養，得到液體種子。[002幻4、液態發酵向經過預處理的廢水中接種5 % (體積)的液體種子，于25 — 35 V，通無菌空氣培養24 — 72小時。[O。2315、后處理培養好的發酵液經細菌計數后，調節至I 08 — I 口。cell / ml，包裝使用。 具體實施方式[O。24〕由本專利技術技術方案生產的多粘類芽抱桿菌生防劑能夠高效防治多種真菌類植物病害，而且無公害，生產成本低，并且有效地利用了味精廢水。以下通過具體實施例詳細說明本專利技術的實施，目的在于幫助讀者更好地理解本專利技術的精神實質，但不作為對本專利技術實施范圍的限定。[O。25 ]實施例I :多粘類芽抱桿菌生物農藥制備[0026〕種子培養基制備稱取2009 土豆，切碎，于兒自來水中煮沸30分鐘，過濾除去殘渣，加入209葡萄糖，定容至IL，即得土豆培養基。分裝入5個IL的三角瓶中，121oC火菌20min。[ O。27〕發酵培養基制備經過絮凝除去細菌蛋白的味精廢水比加入gL自來水稀釋，并用氫氧化鈉調節PH至6 . O。 [ O。25 ]液體種子制備向土豆液體培養基中接種多粘類芽抱桿菌，于30 V，搖瓶ZOOr / min，恒溫搖床振蕩培養24小時，得到液體種子。[O。29」發酵產品將上述發酵培養基裝罐到IOL的發酵罐中，121 V火菌巧min，按照5 %的接種量接種液體種子，在30 V恒溫，通無菌空氣的條件下，發酵2至3天，取樣計數后，無菌條件下分裝。[O。30 ]實施例2 :對多種病原真菌的拮抗作本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一株具有防治植物病害作用的多粘類芽抱桿菌（Paenibaclllus?polymyxa?)?，其特征在于：該多粘類芽抱桿菌保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?No?.?2377?。
【技術特征摘要】
1.一株具有防治植物病害作用的多粘類芽抱桿菌(Paenibaclllus poIymyxa ),其特征在于該多粘類芽抱桿菌保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCC No . 2377。2.權利要求I所述的多粘類芽抱桿菌，其特征在于該菌株在POA培養基上生長良好，單個菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面粘稠，與培養基結合緊密，菌落中心乳黃色，菌體桿狀，革蘭氏染色顯陽性，芽抱端生，包囊膨人；該菌株的...
【專利技術屬性】
技術研發人員：不公告發明人，
申請(專利權)人：青島群恒生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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