抗FGFR2抗體制造技術

披露了結合并且抑制人類FGFR2的生物活性的單克隆抗體。這些抗體可以用以治療細胞增殖性疾病和紊亂，包括某些形式的與FGFR2的激活或者過表達相關的癌癥。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術的領域涉及分子生物學、免疫學以及腫瘤學。更具體地，該領域是結合人類FGFR2的抗體。背景成纖維細胞生長因子受體2 (FGFR2),也稱為 BEK、BFR_1、CD332、CEK3、CFD1、ECT1、FLJ98662、JWS、KGFR (還稱為 FGFR2 (IIIb) )、K-SAM、TK14、以及 TK25，是四種高度保守的受 體酪氨酸激酶(FGFRl、FGFR2、FGFR3以及FGFR4)之一，通過結合FGF介導成纖維細胞生長因子(FGF)信號。該FGF受體的特征是具有兩個或者三個胞外免疫球蛋白樣結構域(IgDl、IgD2以及IgD3)、一個單跨膜結構域以及一個胞質酪氨酸激酶結構域。FGF配體結合誘導FGF受體二聚作用和酪氨酸自磷酸化作用，導致細胞增殖、分化并遷移(Turner (特納)等人，(2010), Natuee Reviews Cancee (癌癥自然評論)，10:116-129 ；Beenken (賓肯)等人，(2009)，Natuee Reviews Deug Discweky (自然評論藥物發現)，8:235-254 ;Gomez (戈麥斯)-Roman (羅曼)等人，(2005), Clin. Cancee Res.(臨床癌癥研究)，11:459-65 ;Chang (常)等人，(2005)，Blood(血液)，106:353-6 ;Eswarakumar (埃斯瓦拉庫馬)等人，(2005), Cytokine GeowthFactoe Rev.(細胞因子和生長因子評論)，16:139-49 )。在IgD3結構域中的可變剪接產生FGFRl、FGFR2以及FGFR3的IIIb亦或IIIc同型物。該FGFR4基因僅表達為IIIc同型物。FGF受體的不同的同型物顯示出組織特異性表達，并且它們響應于18哺乳動物FGF的不同的譜(Beenken (賓肯)等人，如以上)。在硫酸乙酰肝素肝素蛋白聚糖的存在下，結合FGF到FGFR上誘導在特異性的胞內酪氨酸殘基上的FGFR的自磷酸化作用。這致使適配子分子，例如FGFR底物2 a (FRS2 α )的磷酸化作用，該磷酸化作用募集其他的蛋白，從而激活不同的信號級聯放大，包括該絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路以及該磷酸肌醇-3-激酶(PI3K) /Akt通路(Beenken (賓肯)等人，如以上；Eswarakumar (埃斯瓦拉庫馬)等人,如以上；Turner (特納)等人,如以上)。已經提出，失調的信號可以直接驅動癌癥細胞的增殖，促進癌癥干細胞的生存，并支持腫瘤血管生成(Turner (特納)等人，如以上)。FGFR2信號在癌癥中似乎發揮著作用。在FGFR2基因上的錯義突變發生在不同的癌癥中，包括子宮內膜癌(Pollock(波洛克)等人，2007, Oncogene (癌基因)，26:7158-7162 ；Dutt (杜特)等人，2008，Pkqc. Natl. Acad. Sci. USA (美國科學院院刊)，105:8713-8717)；、卵巢癌、乳癌、肺癌(Greenman (格林曼)等人，2007，Nature(自然)，446:153-158 ；Ding (丁)等人，2008，Natuke (自然)，455:1069-1075 ；Davies (戴維斯)等人，2005，Cancee Res.(癌癥研究)，65:7591-7595)以及胃癌(Jang (蔣)等人，2001，CanceeRes.(癌癥研究)，61:3541-3543)。這些激活突變中的一些在骨骼機能紊亂的患者中也有報道(Dutt (杜特)等人，如以上)。兩項獨立的全基因組關聯研究已經將在該FGFR2基因中的特異性單核苷酸多態性(SNPs)與乳癌的易感性的增加結合起來(Easton(伊斯頓)等人，2007，Natuee(自然)，447:1087-1093 ;Hunter (亨特)等人，2007，Nat. Genet.(自然遺傳學)，39:870-874)。這些癌癥相關的SNPs顯示出了提升的FGFR2基因表達(Meyer (邁耶)等人，2008，Plos Biol.(科學公共圖書館-生物)，6乂108)。位于人類染色體10q26上的FGFR2基因，在乳癌的一個亞群中被擴增(Adnane (阿達尼)等人，1991，Onkkene (癌基因)，6:659-663 ；Turner (特納)等人，2010，Oncogene (癌基因)，29:2013-2023)以及胃癌(Hara (哈拉)等人，1998，Lab. Invest.(實驗室研究)，78:1143-1153 ;Mor (摩爾)等人，1993，Cancee Genet. Cytogenet.(癌癥遺傳學和細胞遺傳學)，65:111-114)。天然發生的抗體是包含四個多肽鏈的多亞基蛋白(圖I)。多肽鏈的其中兩條稱作免疫球蛋白重鏈(H鏈)，并且多肽鏈的其中兩條稱作免疫球蛋白輕鏈(L鏈)。這些免疫球蛋白重和輕鏈是通過一個鏈間二硫鍵而被連接的。這些免疫球蛋白重鏈是通過鏈間二硫鍵而被連接的。輕鏈由一個可變區(圖I中的')以及一個恒定區(圖I中的CJ構成。重鏈由一個可變區(圖I中的Vh)以及至少三個恒定區(圖I中的CHp CH2以及CH3)構成。這些可變區決定該抗體的特異性。天然發生的抗體已經被用作用于工程抗體的起始材料，例如嵌合抗體與人源化抗體。··每一可變區包含三個高可變區，這些高可變區已知為互補決定區(⑶R)，兩側有四個已知為骨架區(FR)的相對保守區域。這三個⑶R (稱作⑶凡、OTR2以及OTR3)構成抗體結合特異性。鼠因為小鼠與人類FGFR2之間的高度同源性，所以已經難于產生特異性針對人類FGFR2的抑制性抗體。具體地，鼠小鼠與人類FGFR2的配體結合結構域共享約98%的序列一致性(Wei (魏)等人，2006，HYBKIDQMA(雜交瘤)，25:115-124)。因此，對于可以用作治療劑的改進de FGFR2抗體存在需要。專利技術概述本專利技術基于一個特異性結合人類FGFR2的抗體家族的發現。這些抗體包含基于特異性結合FGFR2的抗體的多個⑶R的FGFR2結合位點。當用作治療劑時，這些抗體是經工程化的(例如，人源化的)以降低或消除給藥于人類患者時的免疫反應。本專利技術的這些抗體阻止或抑制人類FGFR2的激活(S卩，中和)。本專利技術的這些抗體可以用以體外地或體內地抑制腫瘤細胞的增殖。當給藥于人類癌癥患者(或動物模型)時，這些抗體抑制或降低人類患者(或動物模型)中的腫瘤生長。本專利技術的這些和其他方面以及優勢通過以下的圖、詳細描述以及權利要求來進行說明。如在此使用的，“包括”是指沒有限制，并且引用的實例是非限制性的。附圖說明參考以下附圖可以更完全地理解本專利技術。圖I (現有技術)是一個典型抗體的示意性圖示。圖2 是一個圖表，總結了通過 FGF2( · )、FGF7(7)、FGF9( □)以及 FGFlO (x)，來自用來測量表達FGFR2-IIIb的FDCP-I細胞的增殖刺激的實驗的結果。圖3 是一個圖表，總結了通過 FGF2( · )、FGF7(7)、FGF9( □)以及 FGF10(x)，來自用來測量表達FGFR2本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：翁志剛，W·M·小威斯頓，A·拜，K·米特澤，S·威勒，陳挺，J·約里斯，
申請(專利權)人：AVEO制藥公司，
類型：
國別省市：