一種草履蟲分離純化植酸派烯的方法技術

本發明專利技術公開了一種草履蟲分離純化植酸派烯的方法，屬于植酸派烯提取技術領域。本發明專利技術植酸派烯是先取含有草履蟲的水液，對草履蟲進行培養備用，再將鋸葉棕暴曬，粉碎成粉末后通過超聲輔助提取植酸派烯粗品，與稻草制得的黃褐色稻草混合液混合得草履蟲培養液，待草履蟲適應并吸收植酸派烯培養液進行大量繁殖后，再進行分離純化所得。本發明專利技術的有益效果是：該方法提取的植酸派烯雜質低，純度高、純度達99.2%以上，無需添加任何溶劑，綠色安全，成本低；提取方法簡單，所得產品易分離純化，生產效率高。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及，屬于植酸派烯提取

技術介紹
鋸葉棕，又名鋸棕葉或鋸棕櫚，學名為“沙巴棕”，屬于棕櫚科灌木植物，是一種低矮的灌木狀棕櫚樹，通常生長在南北美洲氣候炎熱的地區，其鋸葉棕櫚成熟的干燥果實可供藥用。鋸葉棕果的提取物為療效顯著的天然前列腺肥大癥治療劑。鋸葉棕提取物具有有效抑制5a—還原酶活性，減少雙氫睪酮生成拮抗前列腺組織中的雄激素與雄激素受體結合；具有腎上腺素能拮抗作用和鈣阻斷作用，達到改善膀胱機能，解痙作用；還可抑制環氧化酶與脂氧化酶的活性，減少白三烯，前列腺素等炎癥介質的生成，從而起抗炎，抗水腫作用；而且特含天然特效殺菌因子一一植酸派烯，直接破壞病原體DNA聚合酶，摧毀耐藥菌株，絕殺病菌質粒；能激活免疫，在尿路粘膜分別產生IgA，IgG, IgC三種免疫抗體，形成三層防護膜，不僅使幾年，十幾年甚至幾十年頑疾一次性徹底治愈，而且真正防止復發！用于治療尿道、膀胱和前列腺疾病。目前方法在提取天然特效殺菌因子植酸派烯過程中分離純化困難，需添加大量溶劑分離純化而得，導致此產品雜質高、純度低，加工成本增高等弊端。因此，研究出一種純度高、易分離純化的提取植酸派烯方法，具有重要的經濟效益和社會意義。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題:針對目前方法在提取植酸派烯過程中分離純化困難，需添加大量溶劑分離純化而得，導致此產品雜質高、純度低，加工成本增高的弊端，提供了，本專利技術先通過超聲輔助提取植酸派烯粗品，制備草履蟲培養液，待草履蟲適應并吸收植酸派烯培養液進行大量繁殖，再進行分離純化得植酸派烯純品。本專利技術提取方法簡單，所得產品雜質低、純度高，無需添加任何溶劑，生產成本低。為解決上述技術問題，本專利技術采用如下所述的技術方案是: (1)在稻田灌水期間，尋找田中的舊稻茬，將燒杯置于95?100°C烘箱中滅菌處理2?3h，隨后用滅菌后的燒杯在稻茬周圍20?30cm處取500?100mL含有草履蟲的水，選取新鮮稻草根部以上2?3cm處，截取3?5cm長的稻草段，將其置于燒杯中，待采集完成后，將燒杯置于25?30°C下，光照強度為120?140 μ mo I m 2S \對其培養6?7天，備用； (2)將鋸葉棕果實置于陽光下暴曬3?5天，使其脫水曬干，選取脫水曬干的鋸葉棕果實，將其置于氣流粉碎機中進行粉碎并對其過篩，制備得60?80目的鋸葉棕果實粉末，將乙酸乙酯和鋸葉棕果實粉末按質量比10:1進行攪拌混合，待其混合均勻后，對其加熱至60?70°C，并在1200?1500r/min速度下，通過200?300W下超聲輔助提取I?2h ; (3)待超聲輔助提取完成后，在2000?3000r/min離心機中，離心分離10?15min，取上層提取液減壓濃縮至原有體積的1/5，制得鋸葉棕果實預提取液，隨后按鋸葉棕果實預提取液和丙酮體積比1:1進行反復萃取，直至無色透明后對其減壓蒸干，待晶體完全析出，則制備得植酸派烯粗品； (4)將植酸派烯粗品和去離子水按質量比1:10攪拌混合，制備得植酸派烯提取液，選取新鮮潔凈的稻草，去掉上端和底部，取稻草秸桿中間3?4cm，按質量比1:10，將稻草和去離子水攪拌混合并置于滅菌處理的三角燒瓶中，加熱煮沸至瓶中液體呈現黃褐色時停止加熱，使其自然冷卻制得稻草混合液，隨后按體積比1: 5，將上述制備的植酸派烯提取液加入黃褐色稻草混合液中，制得草履蟲培養液，并用質量分數1 %的氫氧化鈉調節pH至6.8?7.3 ； (5)將步驟(1)培養的含有草履蟲的水液吸取1?2mL，接種至草履蟲培養液的錐形瓶中，并將其放在溫度為25?30°C下，光照強度為120?140 μ mol m 2s 1處進行培養，將錐形瓶口用紗布包嚴，每隔3天左右更換一次培養液，待更換3?4次培養液后，吸取含有草履蟲的水液，接種到含有植酸派烯提取液的三口燒瓶中，設置溫度為25?30°C下，光照強度為120?140 μ mol m 2s \待培養6?7天后，對三口燒瓶中混合液進行過濾，除去濾渣后在12000?13000r/min的轉速下離心10?15min，取上層清液旋轉蒸發至結晶完全析出，即可制得一種草履蟲分離純化植酸派烯。本專利技術與其他方法相比，有益技術效果是: (1)該方法提取的植酸派烯雜質低，純度高、純度達99.2%以上，無需添加任何溶劑，綠色安全，成本低； (2 )本專利技術提取方法簡單，所得產品易分離純化，生產效率高?！揪唧w實施方式】首先在稻田灌水期間，尋找田中的舊稻茬，將燒杯置于95?100°C烘箱中滅菌處理2?3h，隨后用滅菌后的燒杯在稻茬周圍20?30cm處取500?1000mL含有草履蟲的水，選取新鮮稻草根部以上2?3cm處，截取3?5cm長的稻草段，將其置于燒杯中，待采集完成后，將燒杯置于25?30°C下，光照強度為120?140 μ mol m 2s \對其培養6?7天，備用；然后將鋸葉棕果實置于陽光下暴曬3?5天，使其脫水曬干，選取脫水曬干的鋸葉棕果實，將其置于氣流粉碎機中進行粉碎并對其過篩，制備得60?80目的鋸葉棕果實粉末，將乙酸乙酯和鋸葉棕果實粉末按質量比10:1進行攪拌混合，待其混合均勻后，對其加熱至60?70°C，并在1200?1500r/min速度下，通過200?300W下超聲輔助提取1?2h ;待超聲輔助提取完成后，在2000?3000r/min離心機中，離心分離10?15min，取上層提取液減壓濃縮至原有體積的1/5，制得鋸葉棕果實預提取液，隨后按鋸葉棕果實預提取液和丙酮體積比1:1進行反復萃取，直至無色透明后對其減壓蒸干，待晶體完全析出，則制備得植酸派烯粗品；再將植酸派烯粗品和去離子水按質量比1:10攪拌混合，制備得植酸派烯提取液，選取新鮮潔凈的稻草，去掉上端和底部，取稻草秸桿中間3?4cm，按質量比1:10，將稻草和去離子水攪拌混合并置于滅菌處理的三角燒瓶中，加熱煮沸至瓶中液體呈現黃褐色時停止加熱，使其自然冷卻制得稻草混合液，隨后按體積比1:5，將上述制備的植酸派烯提取液加入黃褐色稻草混合液中，制得草履蟲培養液，并用質量分數1 %的氫氧化鈉調節pH至6.8?7.3 ;最后將備用的培養的含有草履蟲的水液吸取1?2mL，接種至草履蟲培養液的錐形瓶中，并將其放在溫度為25?30°C下，光照強度為120?140ymol m 2s 1處進行培養，將錐形瓶口用紗布包嚴，每隔3天左右更換一次培養液，待更換3?4次培養液后，吸取含有草履蟲的水液，接種到含有植酸派烯提取液的三口燒瓶中，設置溫度為25?30°C下，光照強度為120?140 μ mo I m 2S \待培養6?7天后，對三口燒瓶中混合液進行過濾，除去濾渣后在12000?13000r/min的轉速下離心10?15min，取上層清液旋轉蒸發至結晶完全析出，即可制得一種草履蟲分離純化植酸派烯。實例I 首先在稻田灌水期間，尋找田中的舊稻茬，將燒杯置于95°C烘箱中滅菌處理2h，隨后用滅菌后的燒杯在稻茬周圍20cm處取500mL含有草履蟲的水，選取新鮮稻草根部以上2cm處，截取3cm長的稻草段，將其置于燒杯中，待采集完成后，將燒杯置于25°C下，光照強度為120 μ mol m 2S \對其培養6天，備用；然后將鋸葉棕果實置于陽光本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種草履蟲分離純化植酸派烯的方法，其特征在于具體操作步驟為：（1）在稻田灌水期間，尋找田中的舊稻茬，將燒杯置于95～100℃烘箱中滅菌處理2～3h，隨后用滅菌后的燒杯在稻茬周圍20～30cm處取500～1000mL含有草履蟲的水，選取新鮮稻草根部以上2～3cm處，截取3～5cm長的稻草段，將其置于燒杯中，待采集完成后，將燒杯置于25～30℃下，光照強度為120～140μmol?m?2s?1，對其培養6～7天，備用；（2）將鋸葉棕果實置于陽光下暴曬3～5天，使其脫水曬干，選取脫水曬干的鋸葉棕果實，將其置于氣流粉碎機中進行粉碎并對其過篩，制備得60～80目的鋸葉棕果實粉末，將乙酸乙酯和鋸葉棕果實粉末按質量比10:1進行攪拌混合，待其混合均勻后，對其加熱至60～70℃，并在1200～1500r/min速度下，通過200～300W下超聲輔助提取1～2h；（3）待超聲輔助提取完成后，在2000～3000r/min離心機中，離心分離10～15min，取上層提取液減壓濃縮至原有體積的1/5，制得鋸葉棕果實預提取液，隨后按鋸葉棕果實預提取液和丙酮體積比1:1進行反復萃取，直至無色透明后對其減壓蒸干，待晶體完全析出，則制備得植酸派烯粗品；（4）將植酸派烯粗品和去離子水按質量比1:10攪拌混合，制備得植酸派烯提取液，選取新鮮潔凈的稻草，去掉上端和底部，取稻草秸稈中間3～4cm，按質量比1:10，將稻草和去離子水攪拌混合并置于滅菌處理的三角燒瓶中，加熱煮沸至瓶中液體呈現黃褐色時停止加熱，使其自然冷卻制得稻草混合液，隨后按體積比1:5，將上述制備的植酸派烯提取液加入黃褐色稻草混合液中，制得草履蟲培養液，并用質量分數1％的氫氧化鈉調節pH至6.8～7.3；（5）將步驟（1）培養的含有草履蟲的水液吸取1～2mL，接種至草履蟲培養液的錐形瓶中，并將其放在溫度為25～30℃下，光照強度為120～140μmol?m?2s?1處進行培養，將錐形瓶口用紗布包嚴，每隔3天左右更換一次培養液，待更換3～4次培養液后，吸取含有草履蟲的水液，接種到含有植酸派烯提取液的三口燒瓶中，設置溫度為25～30℃下，光照強度為120～140μmol?m?2s?1，待培養6～7天后，對三口燒瓶中混合液進行過濾，除去濾渣后在12000～13000r/min的轉速下離心10～15min，取上層清液旋轉蒸發至結晶完全析出，即可制得一種草履蟲分離純化植酸派烯。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：仇穎超，高力群，盛艷花，
申請(專利權)人：仇穎超，
類型：發明
國別省市：江蘇;32