一種液相色譜外標(biāo)法測定1,3-二羥基丙酮含量的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種液相色譜外標(biāo)法測定1,3-二羥基丙酮（DHA）含量的方法，其特征在于，采用標(biāo)準(zhǔn)1,3-二羥基丙酮作為外標(biāo)物，乙腈-水溶液為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，在乙腈-水溶液中，乙腈與水的體積比為10:90，且水用氨水調(diào)節(jié)pH至10.5。本發(fā)明專利技術(shù)的所述方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：1、選擇了通用、方便的色譜條件；2、選擇了與反應(yīng)物、生成物性質(zhì)相近且非常穩(wěn)定的流動(dòng)相；3、測量結(jié)果準(zhǔn)確、快捷、方便，且分析成本低。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
,3-二羥基丙酮含量的方法
本專利技術(shù)涉及，3- 二羥基丙酮(DHA)含量的方法。具體涉及一種使用液相色譜外標(biāo)法測定以甲醛為原料在離子液為催化劑、有機(jī)堿為助催化劑、在140°C，均相反應(yīng)30分鐘的條件下制備1，3-二羥基丙酮，并測定合成混合液中1，3-二羥基丙酮含量的方法。
技術(shù)介紹
1，3-二輕基丙酮(1，3-Dihydroxyacetone)簡稱DHA,是多輕基酮糖,是最簡單的酮糖，外觀是帶有甜味的白色粉末狀結(jié)晶，易溶于水、乙醇、乙醚和丙酮等有機(jī)溶劑，熔點(diǎn)為75-80°C，水溶性 >250g/L(20°C )，在 pH 為 6.0 時(shí)穩(wěn)定。I, 3- 二羥基丙酮是一種重要的化工原料、醫(yī)藥中間體和功能添加劑。其用途主要是一種天然存在具有生物可降解性的酮糖，可食用且對(duì)人體和環(huán)境無毒害；是一種具有多功能的添加劑，可用于化妝品、醫(yī)藥和食品行業(yè)等。同時(shí)其能廣泛參與諸如聚合、縮合等反應(yīng)，是一種重要的醫(yī)藥、農(nóng)藥合成中間體。目前，I,3- 二羥基丙酮生產(chǎn)方法主要有化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵法。北京旭陽化工技術(shù)研究院有限公司獨(dú)立研發(fā)了由甲醛為原料在離子液為催化劑、有機(jī)堿為助催化劑、在140°C，均相反應(yīng)30分鐘的條件下制備1，3-二羥基丙酮，它是一種綠色環(huán)保新型的合成工藝路線。甲醛、離子液、有機(jī)堿的摩爾比=30:1:0.02。在以甲醛為原料，離子液為催化劑、有機(jī)堿為助催化劑制備1，3- 二羥基丙酮研發(fā)與生產(chǎn)過程中，反應(yīng)液中1，3-二羥基丙酮的準(zhǔn)確快速定量分析非常重要，這關(guān)系到甲醛轉(zhuǎn)化率的高低和離子液催化劑選擇性的確定。但是目前還沒有普遍認(rèn)可的較為準(zhǔn)確快速的分析方法，嚴(yán)重制約了 1，3-二羥基丙酮合成工藝的優(yōu)化。DHA主要分析方法比較DHA的分析方法主要有薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等方法。薄層色譜分析法所用試劑昂貴且準(zhǔn)確定量困難。張智宏、孫小娟在《二羥基丙酮的氣相色譜分析》(《分析測試學(xué)報(bào)》，1999，18 (3) 56-63)中采取氣相色譜來定量測定DHA。但由于DHA的揮發(fā)性不高，需要先將其衍生化為易揮發(fā)且穩(wěn)定性較高的衍生物才可間接測定DHA含量，但此方法預(yù)處理復(fù)雜，且衍生化過程中水分的影響較大，需要加入大量的衍生化試劑。中國藥科大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院陳菁、陳建華等在中國生化藥物雜志(ChineseJournal of Biochemical Pharmaceutics2007 年第 28 卷第 3 期)提出建立二輕基丙酮(DHA)發(fā)酵過程中產(chǎn)物和殘余甘油底物的高效液相色譜檢測方法。方法流動(dòng)相為乙腈-水(90:10),色譜柱為 Lichrospher5_NH2 (4.6mm*250mm),用紫外檢測器在 271nm 處檢測 DHA,用示差折光檢測器檢測甘油。江南大學(xué)饒志明、徐美娟中國生物工程雜志(China Biotechnology,2008，28(1):61-64)建立了測定I, 3- 二羥基丙酮(DHA)的高效液相色譜(HPLC)方法。以Allt ima C18 (250*4.6mm)為分離柱，5% 甲醇水溶液(0.05%H3P0JMPH至 3.0)，流速為 Iml/min,用紫外檢測器在200nm處檢測DHA。但是上述兩種HPLC分析方法一是測定以甘油為原料采用微生物發(fā)發(fā)酵液中DHA含量，正常情況下，發(fā)酵液顯示弱酸性。北京旭陽化工技術(shù)研究院有限公司獨(dú)立研發(fā)以甲醛在離子液為催化劑制備1，3-二羥基丙酮合成工藝，反應(yīng)液顯示堿性(PH=9.5-11.0)。且色譜柱在高比例水為流動(dòng)相長時(shí)間分析運(yùn)行條件下，很容易造成柱固定相疏水坍塌，即DHA保留明顯降低或完全不保留的現(xiàn)象(DHA的保留時(shí)間發(fā)生嚴(yán)重漂移)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的專利技術(shù)人針對(duì)研發(fā)的獨(dú)特合成工藝，經(jīng)過潛心研究發(fā)現(xiàn):采用合適的流動(dòng)相乙腈-水(10: 90)水用氨水調(diào)節(jié)pH=10.5 ;DAD二極管陣列檢測器，ZORBAX Extend_C18。能夠準(zhǔn)確、快捷、可靠地測定由甲醛在離子液為催化劑制備1，3- 二羥基丙酮含量。由此完成了本專利技術(shù)。本專利技術(shù)的目的為提供，3-二羥基丙酮含量的方法，其特征在于，采用標(biāo)準(zhǔn)1，3- 二羥基丙酮作為外標(biāo)物，乙腈-水溶液為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，在乙腈-水溶液中，乙腈與水的體積比為10:90，且水用氨水調(diào)節(jié)pH至10.5。在本申請(qǐng)的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述方法包括如下步驟，該方法包括如下步驟:(I)采用標(biāo)準(zhǔn)1，3-二羥基丙酮作為外標(biāo)物，乙腈-水溶液為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，在乙腈-水溶液中，乙腈與水的體積比為10:90，且水用氨水調(diào)節(jié)pH至10.5 ;(2)用液相色譜儀分別測定標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測樣品中的1，3- 二羥基丙酮的峰面積，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程:C=AX式中，C為1，3- 二羥基丙酮的含量(g/L)X為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率A為1，3- 二羥基丙酮的峰面積；(3)由線性回歸方程計(jì)算樣品中各組分含量Ci (g/L)Ci=4E-07A式中，A為1，3- 二羥基丙酮的峰面積。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液中各組分的濃度沒有特殊限制，可以根據(jù)實(shí)際反應(yīng)過程中反應(yīng)物和生成物變化的相對(duì)情況進(jìn)行調(diào)整，以便準(zhǔn)確的測量。試劑1，3- 二羥基丙酮為分析純，稱量質(zhì)量精確至0.0002go用液相色譜儀分別測定標(biāo)準(zhǔn)溶液中的外標(biāo)物的峰面積，并由含量與峰面積關(guān)系計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程。在根據(jù)本專利技術(shù)的測量方法的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，液相色譜的最優(yōu)檢測條件為:液相色譜儀:Agilentl260；色譜柱:ZORBAXExtend_C18 (4.6mmX 250mm);檢測器:DAD 二極管陣列檢測器，使用波長200nm ；柱箱溫度:25°C ;流動(dòng)相:乙腈-水溶液，其中乙腈與水的體積比為10:90，水用氨水調(diào)節(jié)pH=10.5 ；-進(jìn)樣量 0.5u L ；流速:流動(dòng)相梯度變化見如下表-1表-1:流動(dòng)相梯度變化表權(quán)利要求1.，3- 二羥基丙酮含量的方法，其特征在于，采用標(biāo)準(zhǔn)1，3-二羥基丙酮作為外標(biāo)物，乙腈-水溶液為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，在乙腈-水溶液中，乙腈與水的體積比為10:90,且水用氨水調(diào)節(jié)pH至10.5。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，該方法包括如下步驟: (1)采用標(biāo)準(zhǔn)1，3-二羥基丙酮作為外標(biāo)物，乙腈-水溶液為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，在乙腈-水溶液中，乙腈與水的體積比為10:90，且水用氨水調(diào)節(jié)pH至10.5 ; (2)用液相色譜儀分別測定標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測樣品中的1，3-二羥基丙酮的峰面積，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程: C=AX 式中，C為1，3- 二羥基丙酮的含量 X為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率 A為1，3- 二羥基丙酮的峰面積； (3)由線性回歸方程計(jì)算樣品中各組分含量Ci Ci=4E-07A 式中，A為1，3-二羥基丙酮的峰面積。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述液相色譜的檢測條件為:液相色譜儀:Agilentl260 ；色譜柱:ZORBAX Extend-C18，4.6mmX 250mm ; 檢測器:DAD 二極管陣列檢測器，使用波長200nm ； 柱箱溫度:25°C ; 流動(dòng)相:乙腈-水溶液，其中乙腈與水的體積比為10:90，水用氨水調(diào)節(jié)pH=10.5 ; 進(jìn)樣量0.5iiL; 流速:流動(dòng)相梯度變化見如下表4.根據(jù)權(quán)利要求1本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種液相色譜外標(biāo)法測定1,3?二羥基丙酮含量的方法，其特征在于，采用標(biāo)準(zhǔn)1,3?二羥基丙酮作為外標(biāo)物，乙腈?水溶液為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，在乙腈?水溶液中，乙腈與水的體積比為10:90，且水用氨水調(diào)節(jié)pH至10.5。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張英偉，陳希生，馮新坡，趙玉偉，翟從旺，孫長江，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京旭陽化工技術(shù)研究院有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：