本發明專利技術涉及神經氈蛋白片段與神經氈蛋白抗體復合物的晶體結構。本發明專利技術提供了單獨的或與抗神經氈蛋白抗體復合的神經氈蛋白1(Nrp1)和神經氈蛋白2(Nrp2)片段的晶體結構，及其使用方法。本發明專利技術進一步提供了抗Nrp抗體及其治療應用的方法。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術提供了單獨的或與抗神經氈蛋白抗體復合的神經氈蛋白I(Nrpl)和神經氈蛋白2(Nrp2)片段的晶體結構及其用途。本專利技術進一步提供了結合Nrpl和/或Nrp2的抗體及其使用方法。專利技術背景 血管系統的發育是許多生理性和病理性過程的基本要求。活躍生長中的組織諸如胚胎和腫瘤要求充足的血液供應。它們通過生成促血管發生因子來滿足這一需要，所述促血管發生因子經由一般稱為血管發生(angiogenesis)的過程促進新血管形成和維持。血管形成是復雜但有序的生物學事件，涉及所有或許多以下步驟:a)自已有的內皮細胞(EC)增殖出EC或自祖細胞分化出EC ;b)EC遷移并接合以形成索樣結構；c)血管索然后發生管發生(tubulogenesis)以形成具有中央內腔的血管；d)已有的索或血管伸出芽以形成次生血管；e)初級血管叢發生進一步重塑(remodeling)和整形(reshaping);及f)內皮周細胞(per1-endothelial cell)被募集來包圍內皮管，為血管提供維持和調節功能，此類細胞包括用于小毛細血管的周細胞、用于大血管的平滑肌細胞、和心臟中的心肌細胞。Hanahan, D.Science277:48-50 (1997) ；Hogan, B.L.和 Kolodzie j, P.A.Nature ReviewsGenetics.3:513-23 (2002) ；Lubarsky, B.和 Krasnow, M.A.Cell.112:19-28(2003)。現在完全確立了血管發生涉及多種病癥的發病機理。這些包括實體瘤和轉移、動脈粥樣硬化、晶狀體后纖維組織增生、血管瘤、慢性炎癥、眼內新血管疾病諸如增殖性視網膜病變例如糖尿病性視網膜病、年齡相關黃斑變性(AMD)、新生血管性青光眼、移植角膜組織和其它組織的免疫排斥、類風濕性關節炎、和銀屑病。Folkman等，J.Biol.Chem., 267:10931-10934(1992) ；Klagsbrun 等，Annu.Rev.Physiol.53:217-239(1991)；GarnerA.，〃Vasculardiseases〃，在 Garner A 和 Klintworth GK 編的《Pathobiology ofOcular Disease.ADynamic Approach》第 2 版(Marcel Dekker, NY, 1994)中，ppl625_1710。在腫瘤生長的情況中，血管發生對于自增生至瘤形成的轉換，及為腫瘤的生長和轉移提供營養似乎是至關重要的。Folkman等，Nature339:58(1989)。新血管形成(neovascularization)讓腫瘤細胞獲得了與正常細胞相比的生長優勢和增殖自治。腫瘤通常開始于單個異常細胞，由于與可利用毛細管床的距離，該細胞只能增殖至幾立方毫米的尺寸，而且它能在較長的一段時間里保持“休眠”狀態而不進一步生長和傳播。有些腫瘤細胞然后轉向血管發生表型以激活內皮細胞，所述內皮細胞增殖并成熟成新的毛細血管。這些新形成的血管不僅讓原發性腫瘤繼續生長，而且讓轉移性腫瘤細胞傳播并再建群(recolonization)。因而，在腫瘤切片中的微血管密度與乳腺癌及數種其它腫瘤的患者存活之間觀察到T相關性。Weidner等,N.Engl.J.Med324:1-6 (1991) ；Horak等，Lancet340:1120-1124(1992) ；Macchiarini 等，Lancet340:145-146 (1992)。尚未完全了解控制血管發生轉換的精確機制，但是認為腫瘤塊的新血管形成源自眾多血管發生刺激物與抑制物的凈平衡(Folkman, Nat Medl (I):27-31 (1995))。血管發育的過程受到緊密調節。迄今為止，多種分子，多為由周圍細胞生成的分泌性因子，已顯示出調節EC分化、增殖、遷移和接合成索樣結構。例如，血管內皮生長因子(VEGF)已鑒定為涉及刺激血管發生和誘導血管通透性的關鍵因子。Ferrara等，Endocr.Rev.18:4-25(1997)。甚至單個VEGF等位基因的遺失導致胚胎致死的發現指向此因子在血管系統的發育和分化中所發揮的不可代替的作用。此外，VEGF已顯示為與腫瘤和眼內病癥有關的新血管形成的關鍵介導物。Ferrara等，Endocr.Rev.見上文。VEGF mRNA在多數所檢查的人腫瘤 中過表達。Berkman 等，J.Clin.1nvest.91:153-159 (1993) ； Brown等，HumanPathol.26:86-91(1995) ;Brown 等，Cancer Res.53:4727-4735(1993) ；Mattern等，Brit.J.Cancer73:931-934(1996) ；Dvorak 等，Am.J.Pathol.146:1029-1039(1995)。同樣，眼部液體中VEGF的濃度水平與糖尿病性和其它缺血相關視網膜病患者中的活潑血管增殖的存在高度相關。Aiello等，N.Engl.J.Med.331:1480-1487 (1994)。此夕卜，研究證明了 VEGF在AMD患者脈絡膜新血管膜中的定位。Lopez等，Invest.0phthalmol.Vis.Sc1.37:855-868(1996)。抗VEGF中和性抗體在裸鼠中遏制多種人腫瘤細胞系的生長(Kim等,Nature362:841-844(1993) ；ffarren 等,J.Clin.1nvest.95:1789-1797 (1995)；BorgStrdm 等,Cancer Res.56: 4032-4039 ( 1996) ； Me I ny k 等,CancerRes.56:921-924(1996))，而且在缺血性視網膜病癥模型中還抑制眼內血管發生。Adamis等，Arch.0phthalmol.114:66-71 (1996)。因此，抗VEGF單克隆抗體或其它VEGF作用抑制劑是有希望用于治療腫瘤和多種眼內新血管病癥的候選物。此類抗體記載于例如1998年I月14日公開的EP817, 648和1998年10月15日公開的W098/45331和W098/45332。抗VEGF抗體之一，貝伐單抗(bevacizumab)已獲FDA批準與化療方案聯合用于治療轉移性結腸直腸癌(CRC)和非小細胞肺癌(NSCLC)。而且，貝伐單抗正在許多進行中的治療各種癌癥適應證的臨床試驗中進行研究。在神經系統的發育過程中，神經元伸出纜樣軸突，所述軸突遷移長距離以到達它們的祀點。見綜述 Carmeliet and Tessier-Lavigne (2005)Nature436:193-200。生長中的軸突的領先尖端是高度能動的感覺結構，稱為生長錐。通過絲足伸展(filopodialextension)的伸展和收縮的動態循環，生長錐不斷感覺和評估其空間環境中的眾多提示，并精確選擇正確航跡來向其最終靶點延伸。在過去的十年里，在了解軸突導向機制方面取得了可觀的進展。見綜述Dickson (2002) Science298:1959-64。導向提示來自四種:引誘物和驅除物；可以作用于近程(本文檔來自技高網...
【技術保護點】
Nrp2ala2b1b2片段與抑制腦信號蛋白結合Nrp2的抗泛NrpA抗體的Fab片段之間形成的復合物的晶體，其中所述晶體衍射x射線輻射以生成代表所述復合物三維結構的衍射圖樣，該衍射圖樣大致具有晶胞常數及空間群C2。FDA00003029768300011.jpg,FDA00003029768300014.jpg,FDA00003029768300013.jpg
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：布倫特A阿普爾頓，克里斯琴威斯曼，吳雁，
申請(專利權)人：健泰科生物技術公司，
類型：發明
國別省市：
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