抗整聯(lián)蛋白β1抗體組合物及其使用方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供人可變鏈框架區(qū)和包含所述框架區(qū)的人源化抗體，所述抗體對(duì)整聯(lián)蛋白β1具有特異性。本發(fā)明專利技術(shù)也提供用于利用所述抗體例如來(lái)治療如癌癥的疾病的方法。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來(lái)華專利技術(shù)】抗整聯(lián)蛋白β1抗體組合物及其使用方法相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)根據(jù)35USC§119(e)要求2012年12月26日提交的美國(guó)申請(qǐng)序列號(hào)61/746,023的權(quán)益。先前申請(qǐng)的公開內(nèi)容被視為本申請(qǐng)的公開內(nèi)容的一部分，并且以引用的方式整體并入本申請(qǐng)的公開內(nèi)容。序列表的并入隨附序列表中的材料據(jù)此以引用的方式并入本申請(qǐng)。名為ONCO1100_1WO_Sequence_Listing的隨附序列表文本文件于2013年12月23日創(chuàng)建，并且是81KB。所述文件可在使用WindowsOS的計(jì)算機(jī)上利用MicrosoftWord進(jìn)行評(píng)估。專利技術(shù)背景專利
本專利技術(shù)大體上涉及免疫學(xué)領(lǐng)域，并且更具體來(lái)說(shuō)涉及抗整聯(lián)蛋白抗體及其使用方法。背景信息在發(fā)達(dá)世界，癌癥是死亡的主要病因之一，僅在美國(guó)導(dǎo)致每年超過(guò)500,000例死亡。在美國(guó)，每年有超過(guò)100萬(wàn)人被診斷有癌癥，并且總之據(jù)估計(jì)超過(guò)三分之一人在他們的壽命期間將顯現(xiàn)某種形式的癌癥。盡管存在超過(guò)200種不同類型的癌癥，但它們之中包括乳癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌和前列腺癌的四種占所有新病例的超過(guò)一半。乳癌是女性中最常見的癌癥，其中估計(jì)12％的女性在她們的壽命期間處于顯現(xiàn)所述疾病的風(fēng)險(xiǎn)下。盡管死亡率已由于較早檢測(cè)和改進(jìn)的治療而降低，但乳癌仍然是中年女性的主要死亡病因。此外，轉(zhuǎn)移性乳癌仍然是一種不可治愈疾病。在呈現(xiàn)時(shí)，大多數(shù)患有轉(zhuǎn)移性乳癌的患者僅有一個(gè)或兩個(gè)器官系統(tǒng)受影響，但隨著疾病進(jìn)展，多個(gè)部位通常變得受牽連。轉(zhuǎn)移性牽連的最常見部位是胸壁的皮膚和軟組織中以及腋窩和鎖骨上區(qū)域中的局部區(qū)域性復(fù)發(fā)。遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的最常見部位是骨(30-40％的遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移)，繼之以肺和肝。盡管僅約1-5％的患有新診斷乳癌的女性在診斷時(shí)具有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移，但約50％的患有局部疾病的患者最終在5年內(nèi)伴有轉(zhuǎn)移而復(fù)發(fā)。目前，自顯現(xiàn)遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移開始的中值存活期是約3年。當(dāng)前診斷和分期乳癌的方法包括腫瘤-結(jié)節(jié)-轉(zhuǎn)移(TNM)系統(tǒng)，其依賴于腫瘤尺寸、腫瘤在淋巴結(jié)中的存在以及遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的存在，如AmericanJointCommitteeonCancer:AJCCCancerStagingManual.Philadelphia,Pa.:Lippincott-RavenPublishers,第5版,1997,第171-180頁(yè)以及Harris,JR:"Stagingofbreastcarcinoma",Harris,J.R.,Hellman,S.,Henderson,I.C,KinneD.W.(編):BreastDiseases.Philadelphia,Lippincott,1991中所述。這些參數(shù)用于提供預(yù)后，并且選擇適當(dāng)療法。也可評(píng)估腫瘤的形態(tài)學(xué)外觀，但因?yàn)榫哂蓄愃平M織病理學(xué)外觀的腫瘤可展現(xiàn)顯著臨床可變性，所以這個(gè)方法具有嚴(yán)重局限性。最后，針對(duì)細(xì)胞表面標(biāo)記的測(cè)定可用于將某些腫瘤類型分成子類。舉例來(lái)說(shuō)，在乳癌的預(yù)后和治療中考慮的一個(gè)因素是雌激素受體(ER)的存在，因?yàn)镋R陽(yáng)性乳癌通常比ER陰性腫瘤更易于對(duì)如他莫昔芬(tamoxifen)或芳香酶抑制劑的激素療法應(yīng)答。盡管適用，但這些分析僅部分預(yù)測(cè)乳房腫瘤的臨床特性，并且在乳癌中存在當(dāng)前診斷工具未能檢測(cè)，并且當(dāng)前療法未能治療的許多表型多樣性。在發(fā)達(dá)世界，前列腺癌是男性中最常見的癌癥，在美國(guó)占所有新癌癥病例的估計(jì)33％，并且是第二最常見的死亡病因。自從引入前列腺特異性抗原(PSA)血液測(cè)試，早期檢測(cè)前列腺癌已顯著改進(jìn)存活率，并且在診斷時(shí)患有局部和區(qū)域性時(shí)期前列腺癌的患者的5年存活率接近100％。但超過(guò)50％的患者將最終顯現(xiàn)局部晚期或轉(zhuǎn)移性疾病。當(dāng)前根治性前列腺切除術(shù)和放射療法提供對(duì)大多數(shù)局部化前列腺腫瘤的治愈性治療。然而，針對(duì)晚期病例的治療選項(xiàng)極其有限。對(duì)于轉(zhuǎn)移性疾病，用單獨(dú)或與抗雄激素劑組合的黃體生成激素釋放激素(LHRH)激動(dòng)劑進(jìn)行雄激素剝奪(androgenablation)是標(biāo)準(zhǔn)治療。然而，盡管最大阻斷雄激素，但所述疾病幾乎始終進(jìn)展，其中大多數(shù)顯現(xiàn)雄激素非依賴性疾病。目前，不存在一致接受的針對(duì)激素難治性前列腺癌的治療，并且通常使用化學(xué)治療方案。肺癌是全世界最常見的癌癥，在美國(guó)是第三最通常診斷的癌癥，并且到目前為止是最常見的癌癥死亡病因。抽煙據(jù)信導(dǎo)致所有肺癌的估計(jì)87％，從而使得它成為最致命的可預(yù)防疾病。肺癌被分成占所有肺癌的超過(guò)90％的兩種主要類型：小細(xì)胞肺癌(SCLC)和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)。SCLC占病例的15-20％，并且特征在于它來(lái)源于大中心氣道中，并且組織學(xué)組成是具有少許細(xì)胞質(zhì)的小細(xì)胞的薄片。SCLC比NSCLC更具侵襲性，快速生長(zhǎng)，并且在早期且常常轉(zhuǎn)移。NSCLC占所有病例的80-85％，并且基于組織學(xué)被進(jìn)一步分成三種主要亞型：腺癌、鱗狀細(xì)胞癌(表皮樣癌)和大細(xì)胞未分化癌。肺癌通常在它的病程中的晚期呈現(xiàn)，并且因此在診斷之后具有僅6-12個(gè)月的中值存活期以及僅5-10％的總體5年存活率。盡管手術(shù)提供最佳治愈機(jī)會(huì)，但僅小部分肺癌患者符合條件，其中大多數(shù)依賴于化學(xué)療法和放射療法。盡管試圖操縱這些療法的時(shí)間選擇和劑量強(qiáng)度，但存活率歷經(jīng)過(guò)去15年已少許增加。結(jié)腸直腸癌是全世界第三最常見的癌癥和第四最常見的癌癥死亡病因。所有結(jié)腸直腸癌的約5-10％是遺傳性的，其中一種主要形式是家族性腺瘤多發(fā)性息肉(FAP)，這是一種常染色體顯性疾病，其中約80％的受影響個(gè)體在腺瘤結(jié)腸多發(fā)性息肉(APC)基因中含有生殖系突變。結(jié)腸直腸癌具有通過(guò)圓周性生長(zhǎng)以及在其它地方通過(guò)淋巴性、血原性、經(jīng)腹膜性和神經(jīng)周性散布進(jìn)行局部侵襲的傾向。淋巴外牽連的最常見部位是肝，其中肺是最常受影響的腹部外器官。血原性散布的其它部位包括骨、腎、腎上腺和腦。當(dāng)前對(duì)結(jié)腸直腸癌的分期系統(tǒng)是基于腫瘤通過(guò)腸壁的滲透程度以及存在或不存在結(jié)節(jié)牽連。這個(gè)分期系統(tǒng)由三種主要杜克氏分類法(Duke'sclassification)來(lái)規(guī)定：杜克氏A疾病限于結(jié)腸或直腸的粘膜下層；杜克氏B疾病具有通過(guò)固有肌層進(jìn)行侵襲，并且可滲透結(jié)腸壁或直腸壁的腫瘤；并且杜克氏C疾病包括任何程度的腸壁侵襲，伴有區(qū)域性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。盡管手術(shù)切除高度有效針對(duì)早期結(jié)腸直腸癌，提供杜克氏A患者的治愈率95％，但在杜克氏B患者中，治愈率降低至75％，并且在杜克氏C疾病中存在陽(yáng)性淋巴結(jié)預(yù)測(cè)在5年內(nèi)有60％的復(fù)發(fā)可能性。用手術(shù)后化學(xué)療法過(guò)程治療杜克氏C患者使復(fù)發(fā)率降低至40％-50％，并且現(xiàn)在是針對(duì)這些患者的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)。頭頸部的上皮癌產(chǎn)生于頭頸部區(qū)域中的粘膜表面，并且在來(lái)源方面通常是鱗狀細(xì)胞。這個(gè)種類包括鼻旁竇、口腔以及鼻咽、口咽、下咽和喉的腫瘤。在美國(guó)，頭頸部癌的年度新病例數(shù)是每年約40,000，占成人惡性腫瘤的約5％。在一些其它國(guó)家，頭頸部癌更常見，并且全世界發(fā)病可能超過(guò)每年50萬(wàn)例。在北美和歐洲，腫瘤通常產(chǎn)生于口腔、口咽或喉，而在地中海國(guó)家和遠(yuǎn)東，鼻咽癌更常見。盡管適用，但傳統(tǒng)療法(放射療法、化學(xué)療法和激素療法)模式已因出現(xiàn)治療抗性癌細(xì)胞而受限制。明確的是，需要用以鑒定用于治療頭頸部癌以及一般來(lái)說(shuō)癌癥的靶標(biāo)的新方法。胰腺癌是一種源于產(chǎn)生在形成胰腺的組織中的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的惡性贅瘤。占這些腫瘤的95％的最常見類型的胰腺癌是產(chǎn)生在胰腺的外分泌組成部分內(nèi)的腺癌(根據(jù)光顯微術(shù)展現(xiàn)腺性構(gòu)造的本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種特異性結(jié)合整聯(lián)蛋白β1的人源化抗體，其包含重鏈可變(VH)區(qū)和輕鏈可變(VL)區(qū)，其中所述VH區(qū)與具有如SEQ?ID?NO:2所示氨基酸序列的VH區(qū)具有小于約97％、96％或95％同一性，并且其中所述VL區(qū)與具有如SEQ?ID?NO:4所示氨基酸序列的VL區(qū)具有小于約97％、96％或95％同一性。

【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來(lái)華專利技術(shù)】2012.12.26 US 61/746,0231.一種特異性結(jié)合整聯(lián)蛋白β1的人源化抗體，其包含重鏈可變(VH)區(qū)和輕鏈可變(VL)區(qū)，其中所述VH區(qū)與具有如SEQIDNO:2所示氨基酸序列的VH區(qū)具有小于約97％、96％或95％同一性，其中所述VL區(qū)與具有如SEQIDNO:4所示氨基酸序列的VL區(qū)具有小于約97％、96％或95％同一性，其中所述VH區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)具有如SEQIDNO:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25所示的氨基酸序列，并且其中所述VL區(qū)的所述CDR具有如SEQIDNO:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28所示的氨基酸序列。2.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VH區(qū)與具有所述如SEQIDNO:2所示氨基酸序列的所述VH區(qū)具有小于90％、85％、80％或75％同一性。3.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VL區(qū)與具有所述如SEQIDNO:4所示氨基酸序列的所述VL區(qū)具有小于90％、85％、80％或75％同一性。4.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VH區(qū)與具有選自由以下組成的組的氨基酸序列的VH區(qū)具有超過(guò)75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性：SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:14、SEQIDNO:29-43、SEQIDNO:91-99和SEQIDNO:100。5.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VL區(qū)與具有選自由以下組成的組的氨基酸序列的VL區(qū)具有超過(guò)75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性：SEQIDNO:16、SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:44-57、SEQIDNO:107-115和SEQIDNO:116。6.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VH區(qū)框架與具有選自由以下組成的組的氨基酸序列的VH區(qū)框架具有超過(guò)75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性：SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:14、SEQIDNO:29-43、SEQIDNO:91-99和SEQIDNO:100，其中所述VH區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)具有如SEQIDNO:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25所示氨基酸序列。7.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VL區(qū)框架與具有選自由SEQIDNO:16、SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:44-57、SEQIDNO:107-115和SEQIDNO:116組成的組的氨基酸序列的VL區(qū)框架具有超過(guò)75％、80％、85％、90％、95％或99％同一性，其中所述VL區(qū)的CDR具有如SEQIDNO:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28所示氨基酸序列。8.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VH區(qū)具有選自由SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:14、SEQIDNO:29-43、SEQIDNO:91-99和SEQIDNO:100組成的組的氨基酸序列，并且所述VL區(qū)具有選自由以下組成的組的氨基酸序列：SEQIDNO:16、SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:44-57和SEQIDNO:107-116。9.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述VH區(qū)和所述VL區(qū)的CDR來(lái)自供體抗體。10.如權(quán)利要求9所述的抗體，其中所述供體是OS2966。11.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體包含F(xiàn)c區(qū)。12.如權(quán)利要求11所述的抗體，其中所述Fc區(qū)是IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其變體。13.如權(quán)利要求12所述的抗體，其中所述Fc區(qū)是人IgG1或IgG4。14.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體包含輕鏈恒定區(qū)。15.如權(quán)利要求14所述的抗體，其中所述輕鏈恒定區(qū)具有同種型κ。16.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體是scFv或Fab。17.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體是人源化抗體。18.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體是嵌合抗體。19.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體是單克隆抗體。20.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體與OS2966競(jìng)爭(zhēng)與整聯(lián)蛋白β1的特異性結(jié)合。21.如權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體以至少10-2M、10-3M、10-4M、10-5M、10-6M、10-7M、10-8M、10-9M或10-10M的平衡解離常...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：W·S·卡博內(nèi)爾，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：安科協(xié)同公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：美國(guó);US