本發(fā)明專利技術(shù)涉及食品領(lǐng)域，特別是涉及食用油提取產(chǎn)生廢棄物的利用，更為具體的說是涉及水溶性大豆多糖的制備方法。針對目前傳統(tǒng)技術(shù)當(dāng)中原料成本高、提取率低、工藝復(fù)雜等問題提供了一種水溶性大豆多糖的制備方法，所述水溶性大豆多糖是以豆皮、豆粕為原料，將水不溶性多糖經(jīng)酶法改性后，分離、純化得到，利用本發(fā)明專利技術(shù)公開的制備方法，水溶性大豆多糖的提取率高、純度高。本發(fā)明專利技術(shù)制備方法設(shè)計合理，可以充分利用資源，適應(yīng)于工業(yè)化生產(chǎn)。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及食品領(lǐng)域，特別是涉及食用油提取產(chǎn)生廢棄物的利用，更為具體的說是涉及水溶性大豆多糖的制備方法。
技術(shù)介紹
水溶性大豆多糖具備水溶性和成膜性，有望在制備腸溶膠囊中部分取代褐藻膠。關(guān)于水溶性大豆多糖的提取，國內(nèi)外已有很多報道。有的研究了在中性PH值條件下從熱水中提取，如Takahashi等人從大豆子葉中用中性熱水提取大豆多糖，得率為38% ;有的在堿性條件用熱水提取，如Kawamura等人研究結(jié)果表明，在熱水中加入草酸銨和0.5%Na0H溶液，提取的大豆·多糖得率為32%。有的還添加了絡(luò)合劑，在酸性條件下提取。但是采用上述方法得到的大豆多糖多為水不溶性，必須要用氯乙酸對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行化學(xué)改性從而獲得可溶性多糖。同時，由于其研發(fā)的基礎(chǔ)多是大豆子葉或其他部位。因此，傳統(tǒng)的提取方法具有提取率不高，工藝復(fù)雜，成本較高等難于工業(yè)化生產(chǎn)的問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)針對目前傳統(tǒng)技術(shù)當(dāng)中原料成本高、提取率低、工藝復(fù)雜等問題提供了，所述水溶性大豆多糖是以豆皮、豆柏為原料，將水不溶性多糖經(jīng)酶法改性后，分離、純化得到，具體包括以下步驟: 取脫脂大豆(豆柏)粉碎，加入10 30倍的純水，調(diào)節(jié)pH至11，在4(T60°C的溫度條件下浸取2 3次，每次浸取f 2小時，合并浸取液，離心、過濾，取濾渣；向濾渣中加入20倍重量的堿性蛋白酶提取液，其中堿性蛋白酶的含量不低于3g/L，調(diào)節(jié)pH至擴(kuò)11，在4(T55°C的條件下浸提廣2小時，過濾，取浸提液；向浸提液中加入3倍體積量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的次氯酸鈉溶液，調(diào)節(jié)混合溶液PH至l(TlI，在室溫下攪拌至溶液顏色不再加深，離心，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，室溫下浙干，得到水溶性大豆多糖粗品； 將水溶性大豆多糖粗品充分溶解于水中，采用sevag法除去蛋白，離心，得到上清的水溶性大豆多糖液；向上清的水溶性大豆多糖液中加入3飛倍體積的95%乙醇，靜置，至不再有沉淀析出；離心、過濾，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，真空干燥得水溶性大豆多糖，所述真空干燥的溫度為60°C。所述制備步驟中還獨立地優(yōu)選以下任意一種或者多種優(yōu)選條件: (1)取脫脂大豆(豆柏)粉碎，過篩，所述篩子為20目以上； (2)向粉碎后的脫脂大豆(豆柏)中加入20倍的純水；(3)脫脂大豆(豆柏)的浸取溫度優(yōu)選為50°C;浸取時間優(yōu)選1.5小時； (4)堿性蛋白酶提取液的浸取溫度優(yōu)選為50°C，浸提時間優(yōu)選為1.5小時； (5)浸提液與10%的次氯酸鈉溶液的混合溶液攪拌時間至少為40分鐘。所述sevag法為向水溶性大豆多糖粗品的水溶液中加入1/5體積量的氯仿和1/15體積量的正丁醇，振蕩20 30分鐘。所述離心的優(yōu)選轉(zhuǎn)速為3000 4000r/min。本專利技術(shù)所公開的技術(shù)方案，可以利用制備食用油后的廢棄部位豆皮、豆柏等，通過酶解改性、提取、純化、干燥直接得到水溶性的大豆多糖，并且經(jīng)過苯酚-硫酸比色法檢測，利用本專利技術(shù)公開的制備方法，水溶性大豆多糖的提取率高、純度高。本專利技術(shù)制備方法設(shè)計合理，可以充分利用資源，適應(yīng)于工業(yè)化生產(chǎn)。具體實施例方式下面結(jié)合實施例進(jìn)一步闡明本專利技術(shù)，應(yīng)理解下述具體實施方式僅用于說明本專利技術(shù)而不用于限制本專利技術(shù)的保護(hù)范圍。本專利技術(shù)中除非特別聲明，所用試劑、容器以及設(shè)備等均為普通市售產(chǎn)品，所用檢測方法為行業(yè)內(nèi)通用檢測方法。本專利技術(shù)中用于多糖粘度測量的儀器為烏氏粘度計。本專利技術(shù)中采用苯酚 -硫酸比色法，并以葡聚糖為標(biāo)準(zhǔn)品，通過葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測定原料中以及制備終廣品中大 中多糖的含量計算大 中的多糖含量； 葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制: 精密吸取葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8、1.0 mL(相當(dāng)于葡聚糖0,0.0403、0.0806,0.1210,0.1613,0.2016 mg)，分別置于25 mL比色管中，定容至2.0 mL，加入苯酚溶液2.0 mL，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻，小心加入濃硫酸10 mL，于旋轉(zhuǎn)混勻器小心混勻，置沸水浴中煮沸15 min，冷卻后用分光光度計在485 nm波長處以試劑空白溶液為參比，I cm比色皿測定吸光度。以葡聚糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程Y=I0.715X — 0.1445，相關(guān)系數(shù) R2=0.9989。實施例1 取脫脂大豆(豆柏)50g，粉碎，過20目篩，加入500ml的純水，調(diào)節(jié)pH至11，在4(T60°C的溫度條件下浸取2 3次，每次浸取f 2小時，合并浸取液，3000r/min離心、過濾，取濾渣；向濾渣中加入20倍重量的堿性蛋白酶提取液，其中堿性蛋白酶的含量不低于3g/L，調(diào)節(jié)pH至9，在50°C的條件下浸提2.5小時，過濾，取浸提液；向浸提液中加入3倍體積量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的次氯酸鈉溶液，調(diào)節(jié)混合溶液pH至l(Tll，在室溫下攪拌至溶液顏色不再加深，4000r/min離心,棄去上清液,收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗漆,室溫下浙干,得到水溶性大豆多糖粗品8.69g ;將水溶性大豆多糖粗品充分溶解于水中，加入1/5體積量的氯仿和1/15體積量的正丁醇，振蕩2(Γ30分鐘，蛋白質(zhì)與氯仿-正丁醇生成絮狀凝聚物，4000r/min離心，得到上清的水溶性大豆多糖液；向上清的水溶性大豆多糖液中加入3飛倍體積的95%乙醇，靜置，至不再有沉淀析出；4000r/min離心、過濾，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，60°C下真空干燥得水溶性大豆多糖6.96g。根據(jù)本專利技術(shù)中公開的方法分別測定產(chǎn)品中的大豆多糖的含量，在本實施例公開的條件下，大豆柏中水溶性大豆多糖的提取率為13.92%，多糖純度為80.12%。所得的大豆多糖經(jīng)檢測，粗蛋白含量:5.2% (以干基計算)、粗脂肪含量:0.37% 、粗灰分含量:4.3%、粘度:72mPa.s，均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。實施例2 取脫脂大豆(豆柏)50g，粉碎，過20目篩，加入500ml的純水，調(diào)節(jié)pH至11，在40-60°C的溫度條件下浸取2 3次，每次浸取1- 2小時，合并浸取液，3000r/min離心、過濾，取濾渣；向濾渣中加入15倍重量的堿性蛋白酶提取液，其中堿性蛋白酶的含量不低于3g/L，調(diào)節(jié)pH至11，在60°C的條件下浸提2.5小時，過濾，取浸提液；向浸提液中加入3倍體積量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的次氯酸鈉溶液，調(diào)節(jié)混合溶液pH至l0-ll，在室溫下攪拌至溶液顏色不再加深，4000r/min離心,棄去上清液,收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗漆,室溫下浙干，得到水溶性大豆多糖粗品7.79g ;將水溶性大豆多糖粗品充分溶解于水中，加入1/5體積量的氯仿和1/15體積量的正丁醇，振蕩20-30分鐘，蛋白質(zhì)與氯仿-正丁醇生成絮狀凝聚物，4000r/min離心，得到上清的水溶性大豆多糖液；向上清的水溶性大豆多糖液中加入3飛倍體積的95%乙醇，靜置，至不再有沉淀析出；4000r/min離心、過濾，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，60°C下真空干燥得水溶性大豆多糖5.46g。根據(jù)本專利技術(shù)中公開的方法分別測定產(chǎn)品中的大豆多糖的含量，在本實施例公開的條件下，大豆柏中水溶性大豆多糖的提取率為10.92%，多糖純度為70.12%。所得的大豆本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種水溶性大豆多糖的制備方法，其特征在于所述水溶性大豆多糖是以豆皮、豆粕為原料，將水不溶性多糖經(jīng)酶法改性后，分離、純化得到，具體包括以下步驟：取脫脂大豆（豆粕）粉碎，加入10~30倍的純水，調(diào)節(jié)pH至11，在40~60℃的溫度條件下浸取2~3次，每次浸取1~2小時，合并浸取液，離心、過濾，取濾渣；向濾渣中加入15~25倍重量的堿性蛋白酶提取液，其中堿性蛋白酶的含量不低于3g/L，調(diào)節(jié)pH至9~11，在40~55℃的條件下浸提1~2小時，過濾，取浸提液；向浸提液中加入3倍體積量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的次氯酸鈉溶液，調(diào)節(jié)混合溶液pH至10~11，在室溫下攪拌至溶液顏色不再加深，離心，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，室溫下瀝干，得到水溶性大豆多糖粗品；將水溶性大豆多糖粗品充分溶解于水中，采用sevag法除去蛋白，離心，得到上清的水溶性大豆多糖液；向上清的水溶性大豆多糖液中加入3~5倍體積的95%乙醇，靜置，至不再有沉淀析出；離心、過濾，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，真空干燥得水溶性大豆多糖，所述真空干燥的溫度為60℃。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種水溶性大豆多糖的制備方法，其特征在于所述水溶性大豆多糖是以豆皮、豆柏為原料，將水不溶性多糖經(jīng)酶法改性后，分離、純化得到，具體包括以下步驟: 取脫脂大豆(豆柏)粉碎，加入10^30倍的純水，調(diào)節(jié)pH至11，在4(T60°C的溫度條件下浸取2 3次，每次浸取f 2小時，合并浸取液，離心、過濾，取濾渣；向濾渣中加入15 25倍重量的堿性蛋白酶提取液，其中堿性蛋白酶的含量不低于3g/L，調(diào)節(jié)pH至擴(kuò)11，在4(T55°C的條件下浸提廣2小時，過濾，取浸提液；向浸提液中加入3倍體積量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的次氯酸鈉溶液，調(diào)節(jié)混合溶液PH至l(Tll，在室溫下攪拌至溶液顏色不再加深，離心，棄去上清液，收集沉淀；沉淀用95%的乙醇和丙酮洗滌，室溫下浙干，得到水溶性大豆多糖粗品； 將水溶性大豆多糖粗品充分溶解于水中，采用sevag法除去蛋白，離心，得到上清的水溶性大豆多糖液；向上清的水溶性大豆多糖液中加入3飛倍體積的95%乙醇，靜置，至不再有沉淀析出；離心、過濾，棄去上清液，收集沉淀；...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王立峰，陳靜宜，謝慧慧，鞠興榮，高瑀瓏，
申請(專利權(quán))人：南京財經(jīng)大學(xué)，王立峰，
類型：發(fā)明
國別省市：
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