本發(fā)明專利技術公開了一種重組融合蛋白VIP-TAT及其應用。本發(fā)明專利技術重組融合蛋白VIP-TAT的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示，編碼該蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。本發(fā)明專利技術重組融合蛋白VIP-TAT具有VIP所不具備的生物學活性，包括：高效激活細胞內/細胞核定位的VIP受體，抑制結腸癌細胞HT29的增殖，可通過呼吸道吸收進入腦部，顯著提高機體SOD水平及顯著抗東莨菪堿誘導學習記憶損傷。這些活性使得VIP-TAT在預防與治療結腸癌、抗腦部氧化損傷、抗學習記憶損傷以及預防和治療老年癡呆方面具備VIP所不具備的應用前景。而且VIP-TAT可通過呼吸道吸入用藥，改善了其用藥途徑，擴大其應用范圍，極大地提高了VIP-TAT在腦部、肺部中的應用價值。
【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及生物工程領域，具體地說，涉及一種重組融合蛋白VIP-TAT及其應用。
技術介紹
血管活性腸肽(vasoactiveintestinal peptide, VIP)是 1970年發(fā)現(xiàn)的具有顯著擴張血管功能的神經(jīng)肽，屬于是促胰液素/胰高血糖素/胰泌素家族。VIP及其受體不僅分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)，在外周組織和器官，如心、肺、血管、胃腸道、胰腺、淚腺、泌尿生殖道等，也廣泛分布。而且VIP及其受體還在免疫系統(tǒng)，如胸腺、淋巴，和免疫細胞中表達，具有免疫調節(jié)的功能。已有的研究發(fā)現(xiàn)VIP具有調節(jié)循環(huán)系統(tǒng)(調節(jié)血壓、增強心肌收縮力和擴張血管)、調節(jié)消化系統(tǒng)(促進消化上皮分泌和調節(jié)胃腸道蠕動)，免疫調節(jié)(抗T細胞凋亡、調節(jié)免疫相關細胞因子的釋放)及抗炎的作用。VIP 受體可分為 3 類VPAC1，VPAC2 和 PACl。VPACl 和 VPAC2 都是 VIP 和 PACAP共同分享的受體，而PACl則是和VIP結合較弱的受體，其與VIP的結合力是其與PACAP結合力的1/1000。已有研究表明，VPAC受體不僅分布在細胞膜上，而且在癌細胞，如乳腺癌細胞和結腸癌細胞的細胞內/細胞核和核膜上也有功能性的分布。而且已有發(fā)現(xiàn)表明VIP的各個受體可以通過內化內轉移到細胞核上，然后介導不同于細胞膜上受體所介導的生物學功能。也就是說，激活細胞內/細胞膜上的VIP受體可產(chǎn)生與激活細胞膜表面受體不同的生物學功能。本專利技術首次將VIP與一穿膜肽TAT融合構建能夠高效激活細胞內/細胞核膜上的VIP受體的新型多肽VIP-TAT，從而實現(xiàn)了其活性的突破——VIP-TAT具有天然VIP所不具備的生物學活性。TAT 是一種蛋白轉導域(Protein transduction domain,PTD),最初發(fā)現(xiàn)于HIV病毒TAT蛋白中的具有穿膜功能的核心區(qū)；由11個氨基酸YGRKKRRQRRR組成，含有8個堿性氨基酸，生理條件下帶較高的正電荷，并形成穩(wěn)定的a螺旋結構。TAT具有強大的運載潛能，能將外源性蛋白質、DNA、RNA 、化學藥物等轉運至細胞內，甚至可以穿越血腦屏障。此過程不受化合物/復合物分子類型和大小的限制，并且對宿主細胞沒有顯著毒副作用。本研究首次構建了將VIP和TAT融合的新型融合蛋白VIP-TAT，并且發(fā)現(xiàn)其具備現(xiàn)有VIP所沒有的新型生物學活性，包括1)重組融合蛋白VIP-TAT可高效激活核轉位的VIP受體；2)重組融合蛋白VIP-TAT抑制結腸癌細胞增殖；3)重組融合蛋白VIP-TAT可通過呼吸道高效吸收進入腦部；4)重組融合蛋白VIP-TAT顯著提高血液及腦部超氧化物歧化酶(Super Oxygen Dehydrogenises, SOD)含量；5)融合蛋白VIP-TAT抗東莨菪堿誘導的學習記憶損傷的作用。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術的目的在于提供一種重組融合蛋白VIP-TAT及其應用。一種重組融合蛋白VIP-TAT，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。編碼重組融合蛋白VIP-TAT的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示。所述重組融合蛋白VIP-TAT在制備激活細胞內/細胞核定位的VIP受體藥物中的應用。所述重組融合蛋白VIP-TAT在制備抑制結腸癌細胞增殖藥物中的應用。所述重組融合蛋白VIP-TAT在制備提高血液或腦部SOD含量藥物中的應用。VIP-TAT可作為抗腦部氧化損傷和抗腦部衰老的藥用。所述重組融合蛋白VIP-TAT在制備抗東莨菪堿誘導學習記憶損傷藥物中的應用。VIP-TAT可作為抗老年癡呆的藥物。所述重組融合蛋白VIP-TAT可通過呼吸道高效吸收進入機體血液和腦部的生物活性，VIP-TAT可通過鼻粘膜吸收，簡化用藥途徑。本專利技術首次實現(xiàn)重組的VIP和TAT融合的新型融合蛋白VIP-TAT的制備及生物學功能的研究。首次發(fā)現(xiàn)VIP-TAT具有和VIP顯著不同的生物活性。VIP-TAT具有的與VIP的區(qū)別如下本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術保護點】
一種重組融合蛋白VIP?TAT，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
【技術特征摘要】
1.一種重組融合蛋白VIP-TAT，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.編碼權利要求1所述重組融合蛋白VIP-TAT的基因，其特征在于所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。3.權利要求1所述重組融合蛋白VIP-TAT在制備激活細胞內/細胞核定位的VIP受...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：余榕捷，張華華，
申請(專利權)人：余榕捷，
類型：發(fā)明
國別省市：
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