本發明專利技術公開了一種白藜蘆醇納米脂質體及其制備方法。該方法，包括如下步驟：將白藜蘆醇、膜材、抗氧化劑和有機溶劑混合溶解，成膜同時除去所述有機溶劑，再加入緩沖液進行水合，得到白藜蘆醇脂質體的粗懸液，將所得粗懸液進行高壓微射流處理，得到所述白藜蘆醇納米脂質體。本發明專利技術采用高壓微射流法經過溶解、脂質形成、充分水合、微射流分散等步驟制得白藜蘆醇納米脂質體。該白藜蘆醇納米脂質體均勻一致，粒徑小，包封率高，穩定性良好。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于功能性保健食品
，涉及一種。
技術介紹
白藜蘆醇又稱芪三酚，是植物為抵抗外界刺激如紫外線、真菌、病毒感染或機械損傷而產生的一種植物抗毒素，具有抗癌、抑菌、抗炎癥、保護心血管、調節雌激素、保護神經和肝臟、抗輻射、鎮咳平喘、降低血壓、改善微循環、治療艾滋病和休克等多種生理功能，被美國《抗衰老圣典》列為“100種最熱門有效的抗衰老物質”之一。但由于白藜蘆醇化學性質不穩定，見光遇熱易分解，且水溶性差，因此存在口服吸收性差、生物利用率低、難以持久作用等缺點，導致其應用受到一定程度的限制。納米脂質體作為一種新型藥物載體，是以卵磷脂、膽固醇等為膜材對目的物質進行包封，制成的一種具有類似生物膜結構的雙分子層囊泡，具有穩定性好、靶向性強、可延緩釋放、無免疫毒性等特點，成為近年來現代醫學和食品功能化學共同關注的焦點。因此，將納米脂質體用于白藜蘆醇的包封與載運，有利于提高其生物利用率與緩釋作用，促進其滲皮吸收性，從而進一步擴大其在食品、藥品、化妝品等行業的應用范圍。目前，納米脂質體的制備方法主要有薄膜分散法、逆向蒸發法、乙醇注入法、超聲法、高壓均質法等，但都存在有機試劑殘留、磷脂成分易氧化、生產成本高、周期長，制備過程難以控制等缺點，放大為工業化生產存在難度
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種。本專利技術提供的制備白藜蘆醇納米脂質體的方法，包括如下步驟將白藜蘆醇、膜材、抗氧化劑和有機溶劑混合溶解，成膜同時除去所述有機溶劑，再加入緩沖液進行水合，得到白藜蘆醇脂質體的粗懸液，將所得粗懸液進行高壓微射流處理，得到所述白藜蘆醇納米脂質體。上述方法中，所述混合溶解的方法為超聲；所述成膜同時除去所述有機溶劑的方法為減壓旋轉蒸發。構成所述膜材的物質選自大豆卵磷脂、腦磷脂、神經鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、膽固醇、牛膽酸鈉、谷留醇和膽固醇乙酰酯中的至少一種，優選大豆卵磷脂和膽固醇中的至少一種；所述抗氧化劑選自維生素Ε、丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯和二丁基羥基甲苯中的至少一種,優選維生素E ；所述有機溶劑選自無水乙醇、甲醇、氯仿、乙醚和石油醚中的至少一種，優選乙醇。所述白藜蘆醇、膜材、抗氧化劑、有機溶劑和緩沖液的用量比為O. 05 lg:1 2g 0. 04 O. 5g :200 500mL :15(T350mL,優選 O.1g :1.1g :0.1g 500mL 250mL,具體為0.05-0.1g 1. 1-1. 5g 0. 04-0.1g :200_500mL :150_250mL 或 0.1-1g :1. 0-1.1g :0. 1-0. 5g 5OOmL :250_350mL 或 0.05-1. Og :1.0-1. 5g :0.04-0. 5g :200_500mL :150_350mL 或 0.05g 1.5g 0. 04g 200mL 150mL 或 Ig :1. Og :0. 5g 500mL 350mL ；所述緩沖液為pH值為7. 4的磷酸鹽緩沖液，濃度為O. 002、. 02mol/L,優選O. 01mol/L，具體為 O. 002-0. 01mol/L。所述超聲步驟中，超聲頻率為28 IOOHz，，優選45Hz，具體為45-100HZ或28-45HZ，功率12(T300W，優選240W，具體為120-240W或240-300W ;時間為3 5min，具體為3_4min或4-5min，溫度為 40 6(TC，優選 45°C，具體為 40_45°C或 45_60°C ；所述減壓旋轉蒸發步驟中，溫度為4(T60°C，優選45°C，具體為40_45°C或45-60 °C，真空度為-O. 09 -O.1MPa,具體為-O. 09 或-O. 01 或-O. 08 或-O. 08 至-O. 01或-O. 09 至-O. 01 或-O. 09 至-O. 08MPa ；所述水合步驟中，溫度為4(T60°C，優選45°C，具體為40_45°C或45_60°C，時間為20 45min,優選 30min,具體為 20_30min 或 30_45min ；所述高壓微射流處理步驟中，處理壓力為1000(T30000PSI，優選18000PSI，具體為10000-18000PSI或18000-30000PSI，循環次數為I 6次，優選3次，具體為1-3次或3-6次；為了將減壓旋轉蒸發所得類脂膜洗至水合介質中，以利于洗膜完全，避免有部分類脂膜粘附在茄形瓶壁上，難以洗下來，上述制備白藜蘆醇納米脂質體的方法，還可包括在所述溶解步驟之后，所述水合步驟之前，向所述緩沖液中加入玻璃珠。利用上述方法制備得到的白藜蘆醇納米脂質體，也屬于本專利技術提供的保護范圍。所述脂質體的粒徑為24. 53 219. 2nm，Zeta電位為-24. 6 _65mV，包封率為34. 40% 89. 30%,具體為 75. 27%、88. 27%、88. 68%、75. 27%-88. 68%、75. 27%-88. 27% 或 88. 27%-88. 68% ；pH值為7.33 7.47，且對人肝癌細胞冊 6-2、人胃癌細胞463的抑制率分別為31. 589Γ76. 85%、11. 49% 58. 37%。本專利技術優選條件下提供的白藜蘆醇納米脂質體特征為外觀呈均勻乳白色懸浮液，電鏡下呈圓形或橢圓形微球體，顆粒間分散、獨立，粒徑為(76. 09±1. 38) nm, Zeta電位(-53. 90±2. 26) mV，包封率為 88. 27%，pH 值(7. 35±O. 035)，且對人肝癌細胞 HEPG-2、人胃癌細胞AGS的抑制率分別為76. 85%和58. 37%。另外，上述本專利技術提供的白藜蘆醇納米脂質體在制備抑制腫瘤細胞產品中的應用，也屬于本專利技術的保護范圍。其中，所述腫瘤細胞具體為肝癌細胞或胃癌細胞；所述肝癌細胞具體為人肝癌細胞HEPG-2 ;所述胃癌細胞具體為人胃癌細胞AGS。本專利技術采用高壓微射流法經過溶解、脂質形成、充分水合、微射流分散等步驟制得白藜蘆醇納米脂質體，具有如下有益效果1、制備方法操作簡便、易于控制、清潔安全、無有毒有機溶劑殘留，且可連續化生產。2、制得的納米脂質體形態均一、粒徑小、包封率高、穩定性好，實現了白藜蘆醇的載運與緩釋，改變其溶解性，提高其生物利用率。 3、本專利技術提供的脂質體中含有抗氧化劑，避免了藥物由體內外氧化而造成的毒副作用，降低不良反應。附圖說明圖1為白藜蘆醇納米脂質體的透射電鏡圖。圖2為白藜蘆醇納米脂質體的粒徑分布圖。圖3為白藜蘆醇納米脂質體的Zeta電位圖。圖4為高效液相色譜(HPLC)測定白藜蘆醇的譜具體實施例方式下面結合具體實施例對本專利技術作進一步闡述，但本專利技術并不限于以下實施例。所述方法如無特別說明均為常規方法。所述原材料如無特別說明均能從公開商業途徑而得。實施例1、白藜蘆醇納米脂質體制備準確稱取O.1g白藜蘆醇、Ig大豆卵磷脂、O.1g膽固醇和O.1g抗氧化劑VE，加入500mL無水乙醇，于45HZ、240W條件下45°C水浴超聲3min至充分溶解，45°C水浴條件下減壓(真空度-O. 09MPa)旋轉蒸發除去乙醇，直至茄形瓶壁上形成一層均勻的脂質薄膜。加入250mL0. 01mol/L磷酸鹽緩沖液(pH=7. 4)和本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種制備白藜蘆醇納米脂質體的方法，包括如下步驟：將白藜蘆醇、膜材、抗氧化劑和有機溶劑混合溶解，成膜同時除去所述有機溶劑，再加入緩沖液進行水合，得到白藜蘆醇脂質體的粗懸液，將所得粗懸液進行高壓微射流處理，得到所述白藜蘆醇納米脂質體。
【技術特征摘要】
1.一種制備白藜蘆醇納米脂質體的方法，包括如下步驟將白藜蘆醇、膜材、抗氧化劑和有機溶劑混合溶解，成膜同時除去所述有機溶劑，再加入緩沖液進行水合，得到白藜蘆醇脂質體的粗懸液，將所得粗懸液進行高壓微射流處理，得到所述白藜蘆醇納米脂質體。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述混合溶解的方法為超聲；所述成膜同時除去所述有機溶劑的方法為減壓旋轉蒸發。3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于構成所述膜材的物質選自大豆卵磷脂、腦磷脂、神經鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、膽固醇、牛膽酸鈉、β -谷留醇和膽固醇乙酰酯中的至少一種，優選大豆卵磷脂和膽固醇中的至少一種；所述抗氧化劑選自維生素Ε、丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯和二丁基羥基甲苯中的至少一種，優選維生素E ;所述有機溶劑選自無水乙醇、甲醇、氯仿、乙醚和石油醚中的至少一種，優選乙醇。4.根據權利要求1-3任一所述的方法，其特征在于所述白藜蘆醇、膜材、抗氧化劑有機溶劑和緩沖液的用量比為O. 05 Ig T2g 0. 04 O. 5g :200 500mL :15(T350mL,優選O.1g :1.1g :0.1g 500mL 250mL ；所述緩沖液為pH值為7· 4的磷酸鹽緩沖液，濃度為O. 002、· 02mol/L,優選O. Olmol/L05.根據權利要求1-4任一所述的方法，其特征在于所述超聲步驟中，超聲頻率為28 IOOHz，，優選45Hz，功率120 300W，優選240W ;時間為3 5min，溫度為40 6(...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王強，劉紅芝，劉麗，陳瓊玲，胡暉，
申請(專利權)人：中國農業科學院農產品加工研究所，
類型：發明
國別省市：
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