一種丹酚酸A純化方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種丹酚酸A純化方法，將含有丹酚酸A的洗脫液或提取液；調(diào)pH至2.5～4.5，離心，上清液經(jīng)非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，用水洗脫后，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；將得到的洗脫液用葡聚糖凝膠LH-20或ODS-C18或聚酰胺層析柱分離，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；將得到的洗脫液調(diào)pH至2.0～4.0，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取，分離有機(jī)溶劑相；將得到的溶液用硅膠層析柱分離，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；將得到的洗脫液，減壓回收洗脫劑，再加水溶解，微波真空干燥，得進(jìn)一步純化的丹酚酸A。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種丹酚酸A純化方法。
技術(shù)介紹
丹參制劑是我國心腦血管疾病的基本治療藥物，因療效確切，丹參已成為我國用量最大、銷售額最高、制劑生產(chǎn)廠最多，臨床劑型最全的中藥之一。丹參有效化學(xué)成分主要有兩大類脂溶性丹參酮類化合物和水溶性酚酸類化合物。研究表明丹酚酸類在抗肝臟損傷、抗動脈粥樣硬化及細(xì)胞凋亡以及改善記憶功能障礙等方面有著顯著的活性。其中又以丹酹酸A(SaivianolicacidA)抗氧化活性最強(qiáng)。丹酚酸A結(jié)構(gòu)如下權(quán)利要求1.一種丹酚酸A純化方法，其特征在于將含有丹酚酸A的洗脫液或提取液；采用如下步驟進(jìn)一步純化步驟一將所述洗脫液或提取液減壓濃縮至每Iml含丹酹酸Al-1Omg,調(diào)pH至2. 5 4.5，離心，上清液經(jīng)非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，所述丹酚酸A上樣量與大孔吸附樹脂比為1: (35 70)，樹脂柱徑高比為1: (4 30)，用水洗脫后，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；步驟二將步驟一得到的洗脫液濃縮至每ml含1-1Omg丹酚酸A的溶液，用葡聚糖凝膠 LH-20或0DS-C18或聚酰胺層析柱分離，所述丹酚酸A上樣量與層析柱比為1: (5 25)， 樹脂柱徑高比為1: (4 25)，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A 的洗脫液，洗脫液減壓回收并濃縮成水溶液；步驟三將步驟二得到的水溶液調(diào)pH至2. O 4. 0，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取，分離有機(jī)溶劑相；步驟四將步驟三得到的溶液減壓回收有機(jī)溶劑，制成每Iml含丹酚酸A500 IOOOOmg 的萃取液，用硅膠層析柱分離，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；步驟五將步驟四得到的洗脫液，減壓回收洗脫劑，再加水溶解，微波真空干燥，所述微波真空干燥溫度20-100°C，回差溫度1_5°C，真空度-O. 07Mpa以上，微波功率1-100KW，干燥10-200分鐘，得進(jìn)一步純化的丹酚酸A。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟一中所述大孔樹脂柱為HPD-80、 HPD-100、HPD-100B、HPD-200A、HPD-300、HPD-450、HPD-722、HPD-826、ADS-5、ADS-8、ADS-21、 DlOl 或 AB-8。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟一中所述洗脫劑分別為水及不同比例的水與乙醇,并且先用水與10 40%乙醇洗脫，除去雜質(zhì)，再用20 60%乙醇洗脫。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟二中的所述洗脫劑分別為水及不同比例的水與乙醇，并且先用水、20 60%乙醇溶液洗脫除雜，再用40 9%乙醇溶液洗脫。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟三中所述的有機(jī)溶劑為叔丁基甲基醚、 乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯或甲酸乙酯。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟四中所述洗脫劑為石油醚、正戊烷、正庚烷、乙酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、叔丁基甲基醚組成的兩相溶劑。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟一中所述丹酚酸A上樣量與大孔吸附樹脂比為I (45 55)，樹脂柱徑高比為I (8 18)。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的純化方法，其中步驟一中所述丹酚酸A上樣量與大孔吸附樹脂比為1: 50，樹脂柱徑高比為1: 10。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟二中所述丹酚酸A上樣量與層析柱比為 I (8 18)，樹脂柱徑高比為1: (6 20)。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的純化方法，其中步驟二中所述丹酚酸A上樣量與層析柱比為I 10，樹脂柱徑高比為1: 8。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其中步驟一和步驟三中使用的PH調(diào)節(jié)劑為磷酸、 鹽酸、硫酸或醋酸。全文摘要本專利技術(shù)涉及一種丹酚酸A純化方法，將含有丹酚酸A的洗脫液或提取液；調(diào)pH至2.5～4.5，離心，上清液經(jīng)非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，用水洗脫后，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；將得到的洗脫液用葡聚糖凝膠LH-20或ODS-C18或聚酰胺層析柱分離，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；將得到的洗脫液調(diào)pH至2.0～4.0，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取，分離有機(jī)溶劑相；將得到的溶液用硅膠層析柱分離，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；將得到的洗脫液，減壓回收洗脫劑，再加水溶解，微波真空干燥，得進(jìn)一步純化的丹酚酸A。文檔編號C07C67/48GK102993015SQ201210487600公開日2013年3月27日 申請日期2012年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月20日專利技術(shù)者劉地發(fā), 張功俊, 王振, 湯新乾, 劉堯奇, 廖祝元 申請人:楚健本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種丹酚酸A純化方法，其特征在于：將含有丹酚酸A的洗脫液或提取液；采用如下步驟進(jìn)一步純化：步驟一將所述洗脫液或提取液減壓濃縮至每1ml含丹酚酸A1?10mg，調(diào)pH至2.5～4.5，離心，上清液經(jīng)非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，所述丹酚酸A上樣量與大孔吸附樹脂比為1∶(35～70)，樹脂柱徑高比為1∶(4～30)，用水洗脫后，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；步驟二將步驟一得到的洗脫液濃縮至每ml含1?10mg丹酚酸A的溶液，用葡聚糖凝膠LH?20或ODS?C18或聚酰胺層析柱分離，所述丹酚酸A上樣量與層析柱比為1∶(5～25)，樹脂柱徑高比為1∶(4～25)，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液，洗脫液減壓回收并濃縮成水溶液；步驟三將步驟二得到的水溶液調(diào)pH至2.0～4.0，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取，分離有機(jī)溶劑相；步驟四將步驟三得到的溶液減壓回收有機(jī)溶劑，制成每1ml含丹酚酸A500～10000mg的萃取液，用硅膠層析柱分離，用洗脫劑洗脫，高效液相檢測丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脫液；步驟五將步驟四得到的洗脫液，減壓回收洗脫劑，再加水溶解，微波真空干燥，所述微波真空干燥溫度：20?100℃，回差溫度1?5℃，真空度?0.07Mpa以上，微波功率1?100KW，干燥10?200分鐘，得進(jìn)一步純化的丹酚酸A。...

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉地發(fā)，張功俊，王振，湯新乾，劉堯奇，廖祝元，
申請(專利權(quán))人：楚健，
類型：發(fā)明
國別省市：