穩(wěn)定化的藥物肽組合物制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及穩(wěn)定化的藥物肽組合物。具體地說，本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種增加用于腸胃外給藥的包含胰高血糖素樣肽的藥物組合物的保存期限的方法，所述藥物組合物中由已在高于中性pH的pH下處理的肽產(chǎn)物制備而來。（*該技術(shù)在2024年保護過期，可自由使用*）

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
穩(wěn)定化的藥物肽組合物本申請是申請?zhí)枮?00480017924.7、申請日為2004年6月3日、專利技術(shù)名稱為“穩(wěn)定化的藥物肽組合物”的專利申請的分案申請。
本專利技術(shù)涉及藥物組合物領(lǐng)域。更具體而言，本專利技術(shù)涉及穩(wěn)定的藥物組合物的制備方法，該組合物由在高于中性pH的pH下處理的大量肽產(chǎn)物制備。
技術(shù)介紹
治療肽廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)實踐。要求這種治療肽的藥物組合物的保存期為數(shù)年，以適于常規(guī)應(yīng)用。但是，肽組合物天生是不穩(wěn)定的，因為它們對化學(xué)和物理降解敏感?；瘜W(xué)降解涉及共價鍵的變化，例如氧化、水解、外消旋化或交聯(lián)。物理降解包括相對于肽的天然結(jié)構(gòu)，即二級和三級結(jié)構(gòu)的構(gòu)象變化，例如聚集、沉淀或吸附至表面。胰高血糖素已在醫(yī)學(xué)實踐中應(yīng)用于糖尿病數(shù)十年，且許多胰高血糖素樣肽正被研制用于多種治療適應(yīng)癥。前高血糖素原基因編碼胰高血糖素以及胰高血糖素樣肽1(GLP-1)和胰高血糖素樣肽2(GLP-2)。GLP-1類似物和衍生物以及同源性晰蜴肽（lizardpeptide）、exendin-4正被研制用于治療II型糖尿病的高血糖癥。GLP-2潛在地可用于治療胃腸疾病。但是，所有這些包含29-39個氨基酸的肽具有高度同源性，且它們共同具有許多特性，特別是它們聚集和形成不溶性原纖維的傾向。這種性質(zhì)似乎包括從主要的α-螺旋構(gòu)象向β-折疊的轉(zhuǎn)變(BlundellT.L.(1983)。胰高血糖素的構(gòu)象。在:LefébvreP.J.(Ed)GlucagonI.SpringerVerlag,pp37-55,SenderoffR.I.等人,J.Pharm.Sci.87(1998)183-189，WO01/55213)。胰高血糖素樣肽的聚集主要在攪拌或振蕩肽溶液時、在溶液和氣相(空氣)之間的界面以及在與疏水表面如接觸時看到。因此，經(jīng)常必須將多種賦形劑添加到胰高血糖素樣肽的藥物組合物中，以改善它們的穩(wěn)定性。這些肽的液體腸胃外制劑的保存期限必須為至少一年，優(yōu)選更長?？梢悦刻煸谑覝叵罗D(zhuǎn)運并振蕩的產(chǎn)物的使用期間優(yōu)選應(yīng)該為數(shù)周。因此，需要穩(wěn)定性得到改善的胰高血糖素樣肽的藥物組合物。
技術(shù)實現(xiàn)思路
我們已意外地發(fā)現(xiàn)，已在高于8.0的pH下處理的大量肽產(chǎn)物可以增加由這些大量肽產(chǎn)物制備的藥物組合物的穩(wěn)定性。定義以下是用于說明書的術(shù)語的詳細定義。本文所用的術(shù)語“有效量”意指與不進行治療相比足以有效地治療患者的劑量。本文關(guān)于藥物組合物所用的術(shù)語“重構(gòu)的（reconstituted）”意指已通過將水或適宜的水溶液添加到包含活性藥物成分的固體材料中而形成的組合物水溶液。在不能生產(chǎn)具有可接受的保存期限的液體組合物時，會使用用于重構(gòu)的藥物組合物。重構(gòu)的藥物組合物的實例是在將水或適宜的水溶液加到凍干的組合物時產(chǎn)生的溶液。該溶液通常用于腸胃外給藥，因此可以使用注射用水或任何其它適宜的溶劑以重構(gòu)該固體材料。本文所用的術(shù)語“治療疾病”意指控制或護理已患疾病、癥狀或病癥的患者。治療的目的是抗擊疾病、癥狀或病癥。治療包括施用活性化合物以消除或控制該疾病、癥狀或病癥和緩解與該疾病、癥狀或病癥有關(guān)的癥狀或并發(fā)癥。本文所用的術(shù)語“胰高血糖素樣肽”指由前高血糖素原基因、exendins及其類似物和衍生物衍生的同源肽。由前高血糖素原基因衍生的肽為胰高血糖素、胰高血糖素樣肽1(GLP-1)、胰高血糖素樣肽2(GLP-2)和oxynthomodulin(OXM)。在Gila畸形中發(fā)現(xiàn)的exendins與GLP-1同源，也發(fā)揮促胰島素作用。Exendins的實例為exendin-4和exendin-3。胰高血糖素樣肽具有以下序列：本文關(guān)于肽所用的術(shù)語“類似物”意指被修飾的肽，其中該肽的一個或多個氨基酸殘基已被其它氨基酸殘基取代，和/或其中該肽上缺失一個或多個氨基酸殘基，和/或其中該肽上缺失一個或多個氨基酸殘基，和/或其中已將一個或多個氨基酸殘基添加到該肽上。這種氨基酸殘基的添加或缺失可以在肽的N-末端和/或在肽的C-末端發(fā)生。通常用兩種不同和簡單的系統(tǒng)描述類似物：例如Arg34-GLP-1(7-37)或K34R-GLP-1(7-37)指這樣的GLP-1類似物，其中1-6位的氨基酸殘基缺失，且在34位的天然存在的賴氨酸已被精氨酸取代(根據(jù)IUPAC-IUB命名法使用的氨基酸的標(biāo)準(zhǔn)單字母縮寫)。本文關(guān)于母體肽所用的術(shù)語“衍生物”意指化學(xué)修飾的母體蛋白或其類似物（其中在該母體蛋白或其類似物上不存在至少一個取代基），即已被共價修飾的母體蛋白。典型的修飾是酰胺、糖類、烷基、酰基、酯、聚乙二醇化(pegylation)等。GLP-1(7-37)衍生物的實例為Arg34，Lys26(Nε-(γ-Glu(Nα-十六烷?；?))-GLP-1(7-37)。本文所用的術(shù)語“GLP-1肽”意指GLP-1(7-37)、GLP-1類似物、GLP-1衍生物或GLP-1類似物的衍生物。本文所用的術(shù)語“GLP-2肽”意指GLP-2(1-33)、GLP-2類似物、GLP-2衍生物或GLP-2類似物的衍生物。本文所用的術(shù)語“exendin-4肽”意指exendin-4(1-39)、exendin-4類似物、exendin-4衍生物或exendin-4類似物的衍生物。本文所用的術(shù)語“穩(wěn)定的exendin-4化合物”意指化學(xué)修飾的exendin-4(1-39)，即通過以下方法測定在人身上表現(xiàn)出至少10小時的體內(nèi)血漿消除半衰期的類似物或衍生物。exendin-4化合物在人體內(nèi)的血漿消除半衰期的測定方法是：將該化合物溶于等滲緩沖液，pH7.4，PBS或任何其它適宜的緩沖液。外周注射該劑量，優(yōu)選在腹部或上部大腿進行。以頻繁的時間間隔取血樣用于測定活性化合物，并持續(xù)充足的時間，以覆蓋末期消除部分(例如服藥前、服藥后1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、24(第2天)、36(第2天)、48(第3天)、60(第3天)、72(第4天)和84(第4天)小時)。如Wilken等人,Diabetologia43(51):A143,2000所述測定活性化合物的濃度。使用非隔室方法，利用可商購得到的軟件WinNonlinVersion2.1(Pharsight,Cary,NC,USA)由各個單獨的受試者的濃度-時間數(shù)據(jù)計算導(dǎo)出藥代動力學(xué)參數(shù)。通過對濃度-時間曲線的末期log-線性部分進行l(wèi)og-線性回歸分析來估算末期消除速率常數(shù)，并用于計算消除半衰期。本文所用的術(shù)語“DPP-IV保護的exendin-4化合物”意指已被化學(xué)修飾以使該化合物耐受血漿肽酶-二肽基氨肽酶-4(DPP-IV)的exendin-4化合物。本文所用的術(shù)語“免疫調(diào)節(jié)的exendin-4化合物”意指作為與exendin-4(1-39)相比在人體內(nèi)的免疫反應(yīng)減小的exendin-4（1-39）的類似物或衍生物的exendin-4化合物。評價免疫反應(yīng)的方法是測定在治療患者4周后與該exendin-4化合物有反應(yīng)性的抗體的濃度。本文所用的術(shù)語“大量產(chǎn)物”或“大量肽產(chǎn)物”意指將用于制備藥物組合物的純化肽產(chǎn)物。因此，大量肽一般以來自最后的純化、干燥或調(diào)制步驟的產(chǎn)物形式得到。該大量產(chǎn)物可以是結(jié)晶、沉淀、溶液或懸浮液。該大量產(chǎn)物在本技術(shù)中還已知為藥物。本文所用的術(shù)語“等電點”意指大分子如肽的總凈電荷為零時的pH本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種用于增加包含胰高血糖素樣肽、藥學(xué)上可接受的緩沖劑和藥學(xué)上可接受的防腐劑的藥物組合物的保存期限的方法，其特征在于由已在pH?8.1～9.6范圍內(nèi)處理過的大量肽產(chǎn)物制備該藥物組合物。

【技術(shù)特征摘要】
2003.06.03 DK PA200300819;2004.01.19 DK PA20040001.一種用于增加藥物組合物的保存期限的方法，所述藥物組合物是溶液，并且包含GLP-1肽Arg34,Lys26(Nε-(γ-Glu(Nα-十六烷?；?))-GLP-1(7-37)、藥學(xué)上可接受的緩沖劑和藥學(xué)上可接受的防腐劑，其特征在于由已在9.0～11.5范圍內(nèi)的pH下處理過的大量肽產(chǎn)物制備該藥物組合物，并且其中所述藥物組合物的pH為從7.0至低于處理所述大量肽產(chǎn)物的溶液時的pH至少0.8pH單位，其中所述大量肽產(chǎn)物是通過在所述9.0～11.5范圍內(nèi)的pH下凍干所述GLP-1肽的溶液進行制備的。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述處理在9～10.0范圍內(nèi)的pH下進行。3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述大量肽產(chǎn)物已在所指定的pH范圍內(nèi)、在5℃至25℃的溫度下處理10分鐘至12小時。4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中所述處理在9～10.0范圍內(nèi)的pH下進行。5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述大量肽產(chǎn)物已在所指定的pH范圍內(nèi)、在5℃至25℃的溫度下處理1分鐘至30分鐘。6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中所述處理在9～10.0范圍內(nèi)的pH下進行。7.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項的方法，其中在制備所述藥物組合物期間在所述pH下處理所述大量肽產(chǎn)物。8.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項的方法，其中在與所述藥學(xué)上可接受的緩沖劑混合之前在所述pH下處理所述大量肽產(chǎn)物。9.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項的方法，其中所述藥物組合物的pH比處理所述大量肽的溶液時的pH低至少1.5pH單位。10.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項的方法，其中所述藥物組合物適于腸胃外給藥。11.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：C·尤爾莫滕森，D·K·恩格倫德，
申請(專利權(quán))人：諾沃挪第克公司，
類型：發(fā)明
國別省市：