一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒制造技術

本實用新型專利技術公開一種萊克多巴胺檢測的酶聯免疫試劑盒。該試劑盒的盒體設置有夾層，盒體內包括1塊96孔酶標板，1個泡沫墊，1個自封袋，3張蓋板膜，1份說明書，1份質檢報告和13瓶試劑組成。夾層用于放入蓋板膜，說明書，質檢報告；96孔酶標板的微孔預包被有萊克多巴胺偶聯抗原，密封于鋁箔袋內。泡沫墊上的試劑包括6瓶不同濃度的萊克多巴胺標準品，1瓶萊克多巴胺抗體溶液，1瓶20×濃縮提取劑，1瓶酶標二抗溶液，1瓶底物溶液A、1瓶底物溶液B，1瓶10×濃縮洗滌液，1瓶終止液。該試劑盒采用間接競爭ELISA一步法，操作方便，靈敏度高、定量準確、穩定性好、可用于尿液和組織中殘留萊克多巴胺的定性和定量檢測。（*該技術在2022年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本技術涉及一種試劑盒，尤其涉及一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒。
技術介紹
萊克多巴胺是一種β_興奮劑，具有加強體內代謝的作用，也可以加速脂肪分解和蛋白質合成。但當人體累計攝入量超過一定值，或食入萊克多巴胺高殘留量的食物時，會產生毒副作用。因此，歐洲以及中國都禁止萊克多巴胺用于家畜飼養中。目前萊克多巴胺的檢測方法有儀器確證法，膠體金卡快速檢測法等。采用儀器法檢測，其儀器設備價格昂貴，成本高，且檢測所需時間較長，檢測人員需要長期培訓，不利于基層推廣。而膠體金卡檢測法雖然檢測簡便，但其靈敏度低，結果不易保存，且定性檢測假陽性率高，只適用于現場初篩，不適合大量樣本的篩查。
技術實現思路
本技術的目的在于針對上述問題，提供一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，以解決原有檢測萊克多巴胺所使用的設備價格昂貴，且檢測過程繁瑣，不適合大量樣本的篩查的問題。本技術的目的是通過以下技術方案來實現一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，包括盒體，所述盒體內設置有夾層，且盒體中還設置有I塊酶標板、3張封板膜和13瓶試劑，所述酶標板預包被有萊克多巴胺偶聯抗原，13瓶試劑分別為6瓶萊克多巴胺標準品、I瓶萊克多巴胺抗體溶液、I瓶20 X濃縮提取劑、I瓶IOX濃縮洗滌液、I瓶酶標二抗溶液、I瓶底物溶液A、1瓶底物溶液BU瓶終止液。進一步的，所述酶標板為96孔酶標板，其由聚苯乙烯制成，置于鋁箔袋中，酶標板由支撐架與設置在支撐架上的可拆卸式的12條微孔條構成，每條微孔條上均有8個微孔，所述微孔中預包被有萊克多巴胺偶聯抗原。進一步的，6瓶萊克多巴胺標準品濃度分別為O μ g/L、0. I μ g/L、0. 3 μ g/L、0.9 μ g/L,2. 7 μ g/L、8. I μ g/L,每瓶為I. OmL ； I瓶萊克多巴胺抗體溶液7mL ; I瓶10 X濃縮洗滌液，30mL ;1瓶20X濃縮提取劑，50mL ；1瓶酶標二抗溶液，7mL ；1瓶底物溶液A，7mL ；1瓶底物溶液B，7mL ; I瓶終止液，7mL。進一步的，所述盒體內設置有用于裝載試劑瓶的泡沫墊，所述泡沫墊上開有孔，試劑瓶設置于孔內。進一步的，所述泡沫墊上開有預留孔。 進一步的，所述盒體為硬紙盒體，其夾層內設置有自封袋，所述自封袋內設置有I份說明書、I份質檢報告及3張封板膜，所述封板膜為塑料硬膜，其大小與酶標板橫切面的大小一致。本技術的有益效果為，所述萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒大大縮短了檢測時間，靈敏度高，特異性好，操作簡單，能定性或定量檢測尿樣、組織中的萊克多巴胺，具有高通量，費用低，結果可記錄等特點。附圖說明圖I為本技術盒體的結構示意圖；圖2為本技術泡沫墊的俯視圖；圖3為本技術酶標板的俯視圖。圖中I、盒體；2、泡沫墊；3、夾層；4、孔；5、預留孔；6、支撐架；7、微孔；8、微孔條。具體實施方式以下結合附圖并通過具體實施方式來進一步說明本技術的技術方案。于本實施例中，一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，包括盒體1，所述盒體I內設置有夾層3，且盒體I中還設置有I塊酶標板、3張封板膜和13瓶試劑，所述酶標板預包被有萊克多巴胺偶聯抗原，13瓶試劑分別為6瓶萊克多巴胺標準品、I瓶萊克多巴胺抗體溶液、I瓶20 X濃縮提取劑、I瓶10 X濃縮洗滌液、I瓶酶標二抗溶液、I瓶底物溶液A、I瓶底物溶液B、I瓶終止液。進一步的，6瓶萊克多巴胺標準品濃度分別為O μ g/L、0. I μ g/L、0. 3 μ g/L、0.9 μ g/L,2. 7 μ g/L、8. I μ g/L,每瓶為I. OmL ； I瓶萊克多巴胺抗體溶液7mL ; I瓶10 X濃縮洗滌液，30mL ;1瓶20X濃縮提取劑，50mL ；1瓶酶標二抗溶液，7mL ；1瓶底物溶液A，7mL ；1瓶底物溶液B，7mL ; I瓶終止液，7mL。如圖I所示，所述盒體I為硬紙盒體，泡沫墊2置于試劑盒盒體的底部，夾層3位于盒體I蓋子下方，將裝有說明書、質檢報告、封板膜的自封袋插入夾層3中，使得紙質材料的說明書、質檢報告不易受潮并使整個試劑盒更緊湊，所述封板膜為塑料硬膜，其大小與酶標板橫切面的大小一致，試劑瓶分別插入泡沫墊2相應的孔4中，使得試劑瓶擺放有序，且泡沫墊2還具有抗震作用。如圖2所示，泡沫墊2上有三種不同尺寸的孔4，孔4數量共十三個，用于安放試劑瓶，泡沫墊2上還設置有三種不同尺寸的預留孔5，預留孔5的數量為6個，由于預留孔5中的泡沫是可拆卸的，所以，當預留孔5不要使用時，預留孔5中的泡沫保留著，這樣也不影響試劑盒美觀。如圖3所示，酶標板為96孔酶標板，其由聚苯乙烯制成，置于鋁箔袋中，酶標板由支撐架6與設置在支撐架6上的可拆卸式的12條微孔條8構成，每個微孔條8有8個微孔7，本技術涉及到的微孔7中預包被了萊克多巴胺偶聯抗原。采用本技術檢測萊克多巴胺殘留量的操作步驟為I、配制IX洗滌液將IOX濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按I : 9充分混勻；2、編號將萊克多巴胺標準品和待測樣品對應微孔按序編號，建議每個萊克多巴胺標準品和待測樣品均做重復孔。3、加樣加入標準品溶液或樣品提取液20 μ L，再于每個微孔加入酶標二抗溶液50 μ L，最后在每個微孔加入萊克多巴胺抗體溶液50 μ L04、溫育輕輕振蕩混勻，用封板膜封板后置于20 25°C溫度下，避光靜置30分鐘。5、洗滌小心揭開封板膜，將微孔內液體甩干，每個微孔加入IX洗滌液250yL洗滌酶標板，輕輕振蕩，用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭戳破，重復3次。6、顯色將底物溶液A和底物溶液B以I : I混合，每個微孔加入底物混合液100 μ L，輕輕振蕩混勻，在20 25°C溫度下避光靜置15分鐘。7、測定每個微孔加入終止液50 μ L，輕輕振蕩混勻，5分鐘內測定450nm處吸光度值。樣本前處理I、動物尿液樣品的處理稀釋倍數為I倍取澄清尿液，20 μ L進行檢測，如果尿液混濁，建議實驗前先進行3000g以上的離心5分鐘或者過濾。2、組織樣品的處理稀釋倍數為5倍提取工作液的配制將20X濃縮提取劑和蒸餾水或去離子水按I : 19充分混勻，取IOOmL稀釋好的提取液加入4. OgNaCl混合均勻至完全溶解。稱取2. 0g±0. 05g均質樣品至50mL聚苯乙烯離心管中，加入8mL提取工作液，用振蕩器充分震蕩10分鐘；在20 25°C溫度下，3000g以上離心10分鐘，取20 μ L上層用于分析。結果判定I、計算百分吸光值所獲得的標準品溶液或待測樣品的吸光值除以O號標準品溶液的吸光值再乘以100%，即為百分吸光值。 2、繪制標準曲線，計算樣品中萊克多巴胺的濃度以萊克多巴胺標準溶液濃度為X軸，對應的百分吸光度值為Y軸，在半對數坐標紙上繪制標準曲線。相對應每一個樣品的濃度可以從標準曲線上讀出。也可以用回歸方程法，計算出待測液體中萊克多巴胺的濃度。萊克多巴胺實際含量(μ g/L) = CXD式中C :待測液體中萊克多巴胺的讀出濃度(μ g/L)D :樣品稀釋倍數為獲得樣品中萊克多巴胺的實際含量，從標準曲線上的讀出濃度值應當乘以相應的稀釋倍數。注意事項I、萊克多巴胺標準品中含有高濃度的萊克多巴胺，請小心使用本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，包括盒體，其特征在于：所述盒體內設置有夾層，且盒體中還設置有1塊酶標板、3張封板膜和13瓶試劑，所述酶標板預包被有萊克多巴胺偶聯抗原，13瓶試劑分別為6瓶萊克多巴胺標準品、1瓶萊克多巴胺抗體溶液、1瓶20×濃縮提取劑、1瓶10×濃縮洗滌液、1瓶酶標二抗溶液、1瓶底物溶液A、1瓶底物溶液B、1瓶終止液。

【技術特征摘要】
1.一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，包括盒體，其特征在于所述盒體內設置有夾層，且盒體中還設置有I塊酶標板、3張封板膜和13瓶試劑，所述酶標板預包被有萊克多巴胺偶聯抗原，13瓶試劑分別為6瓶萊克多巴胺標準品、I瓶萊克多巴胺抗體溶液、I瓶20 X濃縮提取劑、I瓶10 X濃縮洗滌液、I瓶酶標二抗溶液、I瓶底物溶液A、I瓶底物溶液B、I瓶終止液。2.根據權利要求I所述的一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，其特征在于所述酶標板為96孔酶標板，其由聚苯乙烯制成，置于鋁箔袋中，酶標板由支撐架與設置在支撐架上的可拆卸式的12條微孔條構成，每條微孔條上均有8個微孔，所述微孔中預包被有萊克多巴胺偶聯抗原。3.根據權利要求I所述的一種用于萊克多巴胺殘留檢測的酶聯免疫試劑盒，其特征在于6瓶萊克多巴胺標準品濃度分別為O μ g/L、0. I μ g/L、0. 3 μ g/L、0...

【專利技術屬性】
技術研發人員：徐波，孫少民，金晶，游冬，史愛武，倫麗麗，
申請(專利權)人：無錫中德伯爾生物技術有限公司，
類型：實用新型
國別省市：