用于抑制PF4和RANTES相互作用的拮抗劑制造技術(shù)

用于抑制PF4和RANTES相互作用的拮抗劑，本發(fā)明專利技術(shù)涉及按照結(jié)構(gòu)式(1)的SEQ?ID?NO：1的氨基酸序列的多肽，及其在制備用于治療與單核細(xì)胞募集有關(guān)的疾病的藥物中的用途。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種多肽、其藥理學(xué)上可接受的鹽、衍生物和/或偶聯(lián)物，其在制備藥物中的用途。該多肽可制備用于與單核細(xì)胞募集有關(guān)的疾病的藥物。
技術(shù)介紹
動(dòng)脈血管的動(dòng)脈硬化構(gòu)成了心血管疾病的形態(tài)學(xué)背景。在這種情況下原始的單核細(xì)胞募集對(duì)于動(dòng)脈硬化早期病變的產(chǎn)生有著決定性的意義。單核細(xì)胞在內(nèi)皮上的固定，即所謂的單核細(xì)胞阻滯，在心血管疾病病理學(xué)的初期表現(xiàn)出如動(dòng)脈硬化、血管狹窄以及血栓等癥狀。已知的是，趨化因子如RANTES(調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌)作為信號(hào)分子與該過(guò)程相關(guān)。在現(xiàn)有技術(shù)中已知的一級(jí)以及二級(jí)預(yù)防通過(guò)使用藥物如阿司匹林和氯吡格雷可以首先起到降低血脂以及抑制血小板的聚集和活化的作用。使用這類藥物的治療方法的缺點(diǎn)是，一方面只顯示出很小的特異性，另一方面這類藥物有嚴(yán)重的副作用，如肌病和高的出血危險(xiǎn)。此外在現(xiàn)有技術(shù)中已知的是將RANTES-多肽用作拮抗劑。例如專利DE 10014516Al公開(kāi)了使用metRANTES作為拮抗劑抑制RANTES受體CCR1。使用這類拮抗劑的缺點(diǎn)是，趨化因子作為信號(hào)分子大量參與了生理學(xué)過(guò)程，以至于使用這樣的拮抗劑會(huì)對(duì)生理過(guò)程造成不可預(yù)見(jiàn)的影響以及會(huì)表現(xiàn)出大量的副作用和嚴(yán)重后果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種治療藥物，它至少能克服現(xiàn)有技術(shù)中眾多缺點(diǎn)中的一種。本專利技術(shù)的目的特別在于提供一種具有較好特異性的治療藥物。本專利技術(shù)的目的可通過(guò)一種多肽、其藥理學(xué)上可接受的鹽、衍生物和/或偶聯(lián)物來(lái)實(shí)現(xiàn)，其中該多肽具有如下結(jié)構(gòu)式⑴所示的SEQ ID NO :I的氨基酸序列C-X1-X2-Yfyts-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-Xio-Xii-Xi2-Xi3-Xi4-Xi5-C(I) (SEQ ID NO :I)其中X1選自包含賴氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、組氨酸和/或天冬酰胺的組，或氨基酸缺失;X2選自包含谷氨酸、天冬氨酸和/或谷氨酰胺的組，或氨基酸缺失；X3選自包含甘氨酸、絲氨酸和/或丙氨酸的組；X4選自包含賴氨酸、亮氨酸和/或精氨酸的組；X5選自包含絲氨酸、半胱氨酸、甘氨酸和/或蘇氨酸的組；X6選自包含絲氨酸、甘氨酸和/或蘇氨酸的組；X7選自包含天冬酰胺和/或谷氨酰胺的組；X8選自包含脯氨酸、酪氨酸和/或甘氨酸的組；X9選自包含甘氨酸、丙氨酸和/或絲氨酸的組；X10選自包含異亮氨酸、纈氨酸和/或天冬酰胺的 組；X11選自包含纈氨酸、異亮氨酸和/或天冬酰胺的組；X12選自包含苯丙氨酸、酪氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸和/或甲硫氨酸的組；X13選自包含異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸和/或苯丙氨酸的組；X14選自包含蘇氨酸、甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸和/或酪氨酸的組；X15選自包含精氨酸、賴氨酸、谷氨酰胺、組氨酸和/或天冬酰胺的組，或氨基酸缺失。有利的是，本專利技術(shù)多肽作為拮抗劑適合于抑制血小板因子4和RANTES的相互作用。“用于抑制血小板因子4和RANTES相互作用的拮抗劑”的概念可以通過(guò)本專利技術(shù)多肽、蛋白質(zhì)或其他的化合物來(lái)理解，其作為拮抗劑可以對(duì)血小板因子4和趨化因子RANTES的相互作用起到抑制作用。令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本專利技術(shù)多肽對(duì)與血小板因子4(PF4)和趨化因子RANTES的相互作用相關(guān)的單核細(xì)胞募集有特殊的效果。在這里最特別的優(yōu)點(diǎn)是，本專利技術(shù)多肽對(duì)趨化因子的眾多功能不產(chǎn)生或者只產(chǎn)生很小的影響。本專利技術(shù)多肽的優(yōu)點(diǎn)尤其在于，它可以有選擇性地阻斷單核細(xì)胞的募集，例如在內(nèi)皮上。在本專利技術(shù)中“單核細(xì)胞募集”的概念的意思是單核細(xì)胞在內(nèi)皮上的移入和移出、單核細(xì)胞的固定以及擴(kuò)散例如在內(nèi)皮的分裂。同樣，單核細(xì)胞的固定同樣以單核細(xì)胞的粘附或者以單核細(xì)胞阻滯表現(xiàn)出來(lái)，在生理學(xué)的情況下單核細(xì)胞的固定會(huì)造成剪切流動(dòng)，例如在毛細(xì)血管、微血管或動(dòng)脈血管中。本專利技術(shù)多肽很大的優(yōu)點(diǎn)是，具有高特異性，并且對(duì)眾多的、與趨化因子RANTES和PF4相關(guān)的新陳代謝過(guò)程，例如免疫或凝血系統(tǒng)沒(méi)有或者僅僅只有很小的副作用。特別是通過(guò)使用本專利技術(shù)多肽的藥物療法可以避免在常規(guī)的心血管疾病的藥物治療中出現(xiàn)的出血危險(xiǎn)。本專利技術(shù)中“C”代表通常使用的半胱氨酸的氨基酸字母代碼，相應(yīng)的“Y”代表酪氨酸，“F”代表苯丙氨酸，“T”代表蘇氨酸，“S”代表絲氨酸。本專利技術(shù)多肽在氨基端和羧基端都有一個(gè)半胱氨酸殘基，其可以形成多肽的環(huán)化。本專利技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)特別在于，環(huán)化的多肽具有更好的穩(wěn)定性。本專利技術(shù)多肽起效時(shí)間較長(zhǎng)，因此所使用的量也較少。本專利技術(shù)中“多肽”的含義是使用合成的或非合成的肽類化合物，如純的或修飾的天然蛋白質(zhì)片段、天然形式的或重組的肽或蛋白質(zhì)。同時(shí)本專利技術(shù)中“多肽”的含義包括相應(yīng)多肽的藥理學(xué)可接受的鹽、藥理學(xué)可接受的衍生物和/或偶聯(lián)物。優(yōu)選的藥理學(xué)可接受的衍生物例如酯類、酰胺、N-酰基-和/或O-酰基衍生物、羧基化的多肽、乙酰化的多肽、磷酸化的多肽和/或糖基化的多肽。優(yōu)選的偶聯(lián)物例如糖-或聚乙二醇-偶聯(lián)物、生物素化的、放射性的或有熒光標(biāo)記的多肽。本專利技術(shù)多肽的長(zhǎng)度最多不超過(guò)25個(gè)氨基酸是有利的。優(yōu)選的本專利技術(shù)多肽的氨基酸的數(shù)目為15-25個(gè)氨基酸，特別優(yōu)選為15-22個(gè)。在實(shí)驗(yàn)中可以確定的是，多肽的長(zhǎng)度會(huì)對(duì)其效果產(chǎn)生影響。尤其令人驚奇的是，具有這樣長(zhǎng)度的氨基酸序列對(duì)單核細(xì)胞阻滯有抑制作用。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本專利技術(shù)多肽的氨基酸數(shù)目為18-23個(gè)，進(jìn)一步優(yōu)選為18-22個(gè)，在非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，本專利技術(shù)多肽的氨基酸數(shù)目為19-22個(gè)，在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，氨基酸的數(shù)目為20-21個(gè)。本專利技術(shù)多肽尤其優(yōu)選為22個(gè)氨基酸。本專利技術(shù)多肽中“氨基酸數(shù)目”的含義當(dāng)然意味著多肽的氨基酸序列長(zhǎng)度。在本專利技術(shù)多肽優(yōu)選的實(shí)施方案中X1S賴氨酸，或者在氨基酸序列的X1位置上為氨基酸缺失，特別優(yōu)選的是X1為賴氨酸。此外在本專利技術(shù)多肽優(yōu)選的實(shí)施方案中谷氨酸適合于X2，或者在該位置上為氨基酸缺失。特別優(yōu)選的是X2為谷氨酸。令人驚奇的是在乂1和/或 X2位置上有氨基酸缺失的多肽能夠發(fā)揮拮抗作用。X1和X2位置適合設(shè)置為氨基酸缺失。X3優(yōu)選為小的、中性的和柔性的氨基酸。在本專利技術(shù)多肽優(yōu)選的實(shí)施方案中X3選自包含甘氨酸和/或絲氨酸的組，特別優(yōu)選為甘氨酸。可以確定的是，該氨基酸對(duì)多肽的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性有積極的作用。這樣的穩(wěn)定性提高的特別的優(yōu)點(diǎn)在于，其可以使得多肽穩(wěn)定性提高，以至于多肽和趨化因子PF4的相互作用時(shí)間可以延長(zhǎng)。因此提高了的多肽的穩(wěn)定性可以增強(qiáng)多肽的拮抗性。在本專利技術(shù)多肽優(yōu)選的實(shí)施方案中X4為賴氨酸。X5優(yōu)選自包含絲氨酸、甘氨酸和/或蘇氨酸的組。在本專利技術(shù)多肽優(yōu)選的實(shí)施方案中X5為絲氨酸。這種多肽的實(shí)施方案可以以有利的方式來(lái)改善多肽的溶解性。多肽溶解性的提高特別可以提高多肽在水中的可適用性。這就有可能簡(jiǎn)化多肽的給藥，即通常基于水的給藥方式。此外通過(guò)多肽溶解性的提高可以改善多肽在體內(nèi)含水系統(tǒng)中的分散性，特別是在血液中的分散性。X6優(yōu)選為絲氨酸。在多肽的進(jìn)一步優(yōu)選實(shí)施方案中，X7為天冬酰胺。X8為優(yōu)選自包含脯氨酸和/或酪氨酸的組的氨基酸。X8特別優(yōu)選為脯氨酸。在本專利技術(shù)多肽特別優(yōu)選的實(shí)施方案中X9為甘氨酸。可以確定的是，在氨基酸序列的這個(gè)位置上的甘氨酸可以使得多肽的連接穩(wěn)定性非常驚人。X10和X13各自獨(dú)立地優(yōu)選自包含纈氨酸和/或異亮氨酸的組。在本專利技術(shù)多肽優(yōu)選的實(shí)施方案中X1。為異亮氨酸。在本專利技術(shù)多肽進(jìn)本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種多肽或其藥理學(xué)上可接受的鹽，其包含如下述結(jié)構(gòu)式(3)所示的SEQ？ID？NO：3的氨基酸序列：CKEYFYTSGKSSNPGIVFITRC(3)(SEQ？ID？NO：3)

【技術(shù)特征摘要】
...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：C·韋伯，P·馮·洪德?tīng)査购郎?/a>，R·克嫩，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：卡羅勒斯治療公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：