一種苦玄參苷IA的制備方法技術

本發明專利技術提供了一種苦玄參苷IA的制備方法，以苦玄參為原料，經甲醇或乙醇為溶媒提取、濃縮、大孔樹脂吸附、脫色、高速逆流色譜法純化制備苦玄參苷IA。本方法制備的苦玄參苷IA純度高于95％，且具有簡便、快速、制備量大、樣品損失少等優點，易于推廣使用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于中藥領域，涉及一種苦玄參苷I A的制備方法，特別是涉及一種利用高速逆流色譜法純化苦玄參苷IA的方法。
技術介紹
苦玄參苷I A (Picfeltarraenin IA),為三職類化合物，分子式C41H62O13,分子量762. 92318，分子結構式為 ^ W'e o_/ "V** ο丫 丫 >4 'V人丫人 ν J O OM II 'V … I- ；'J 5 '苦玄參為玄參科植物苦玄參(Picria fel-terrae Lour.)的干燥全草,又名苦草，蛇總管，產于我國廣東、廣西、云南和貴州南部，在廣西作藥用歷史已久。苦玄參性寒味苦，用于治療高熱、蛇傷及癰癤等，具有清熱解毒，涼血消腫之功效。該藥已收載于《中國藥典》2010年版。現代研究表明，苦玄參的化學成分主要為葫蘆苦素三萜成分和黃酮類化合物，藥理實驗證明，苦玄參干浸膏具有明顯的抗炎及鎮痛作用。苦玄參苷I A是苦玄參三萜部分中含量最高的成分，在干燥植物中的含量約為O. 25%，有中樞抑制作用和抗補體作用，是苦玄參的主要活性成分。目前學者對苦玄參定量分析方面報道最多的是苦玄參苷IA的含量測定，各地苦玄參藥材中苦玄參苷I A的含量差異較大，含量差異與產地、藥用部位、采收季節等均有關系。目前分離制備苦玄參苷IA的方法主要是采用大孔樹脂和硅膠柱分離，鄒節明采用HPD50樹脂精制苦玄參提取物；王力生等以TLC為檢測手段，利用DlOl大孔樹脂對苦玄參總皂苷進行吸附洗脫，把苦玄參總皂苷含量由浸膏中的8. 7%提高至27. 3%，這些方法僅提取得到總皂苷，未涉及單體化合物的分離純化。潘小嬌等發表的文獻“從苦玄參中制備苦玄參苷Ia的實驗研究”，該文獻采用水煮，醇溶，正丁醇萃取，硅膠柱分離得到苦玄參苷IAo在生產實踐中，硅膠柱層析成本高、重現性較差且生產周期長。
技術實現思路
本專利技術的目的是為了克服現有技術的不足，提供一種苦玄參苷I A的制備方法，應用高速逆流色譜分離純化苦玄參苷I A，操作簡單、生產周期短。為了實現上述目的，本專利技術的技術方案如下一種苦玄參苷I A的制備方法，具體包括提取、總皂苷制備、脫色以及分離純化四道工序，其特征在于提取工序(I)中，以苦玄參為原料，用甲醇或乙醇微波提取，減壓濃縮后獲得提取浸膏；總皂苷制備工序(2)中，提取浸膏用熱水分散，通過大孔吸附樹脂柱，用水和60-90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；脫色工序(3)中，乙醇洗脫液加活性炭，加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得粗品；分離純化工序(4)中，采用高速逆流色譜法對所得粗品進行分離純化，制備得到苦玄參苷I A。所述總皂苷制備工序(2)中，采用的大孔吸附樹脂為AB-8、HPD100、D3520、ADS-7、DA201、SA-I等樹脂中的一種或幾種混合。 所述分離純化工序(4)中，采用高速逆流色譜法分離純化苦玄參苷I A，溶劑系統選用乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-O. 05% TFA，體積比為(5-10) (8-15) (2-5) (15-30)，溶劑系統配制后靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，流動相流速控制在l_4ml/min，主機轉速控制在850-1000r/min。本專利技術的有益效果是采用大孔吸附樹脂和高速逆流色譜法分離純化，工藝簡單、生產周期短、成本低、產品含量高。下面將結合具體實施方式進一步說明本專利技術，但本專利技術要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。具體實施例方式實施例I :苦玄參葉粉碎，取3kg，加8倍量60 %乙醇微波提取2次，提取液合并后減壓濃縮得到提取浸膏，將提取浸膏用水分散后通過AB-8大孔樹脂柱，飽和吸附后，先用水洗脫至無色，再用3BV75 %乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，加入I %活性炭加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按體積比5:8:3: 15在分液漏斗中混合充分,分層后取下相作為流動相，上相為固定相,將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至900r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至2ml/min，將粗品溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮干燥流分，制得苦玄參苷I a7. 34g，含量98. 2%。實施例2:苦玄參葉粉碎，取3kg，加10倍量65%甲醇微波提取2次，提取液合并后減壓濃縮得到提取浸膏，將提取浸膏用水分散后通過HPD100大孔樹脂柱，飽和吸附后，先用水洗脫至無色,再用4BV60%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，加入2 %活性炭加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按體積比8 : 13 : 5 : 28在分液漏斗中混合充分,分層后取下相作為流動相，上相為固定相,將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至950r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至3ml/min，將粗品溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮干燥流分，制得苦玄參苷I a5. 18g，含量98. 5%。實施例3:苦玄參葉粉碎，取3kg，加8倍量75 %乙醇微波提取2次，提取液合并后減壓濃縮得到提取浸膏，將提取浸膏用水分散后通過SA-I大孔樹脂柱，飽和吸附后，先用水洗脫至無色，再用3BV80%甲醇洗脫，收集乙醇洗脫液，加入1%活性炭加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按體積比6 10 2 20在分液漏斗中混合充分,分層后取下相作為流動相,上相為固定相,將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至850r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至4ml/min，將粗品溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮干燥流分，制得苦玄參苷I a5. 21g，含量98. 0%。實施例4:苦玄參葉粉碎，取5kg，加6倍量65 %乙醇微波提取2次，提取液合并后減壓濃縮得到提取浸膏，將提取浸膏用水分散后通過DA201大孔樹脂柱，飽和吸附后，先用水洗脫至無色，再用3BV90%甲醇洗脫，收集乙醇洗脫液，加入3%活性炭加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按體積比10 10 3 25在分液漏斗中混合充分，分層后取下相作為流動相，上相為固定相，將固 定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉速調至900r/min，泵入下相作流動相，動態平衡后，流動相流速調至4ml/min，將粗品溶于下相由進樣閥進樣，HPLC檢測，根據圖譜收集目標成分，減壓濃縮干燥流分，制得苦玄參苷I A10. 56g，含量98. 6%。實施例5:苦玄參葉粉碎，取5kg，加7倍量60 %甲醇微波提取2次，提取液合并后減壓濃縮得到提取浸膏，將提取浸膏用水分散后通過ADS-7大孔樹脂柱，飽和吸附后，先用水洗脫至無色，再用4BV70%甲醇洗脫，收集乙醇洗脫液，加入O. 5%活性炭加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按體積比7: 15 : 4 : 30在分液漏斗中本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種苦玄參苷I？A的制備方法，具體包括提取、總皂苷制備、脫色以及分離純化四道工序，其特征在于提取工序(1)中，以苦玄參為原料，用甲醇或乙醇微波提取，減壓濃縮后獲得提取浸膏；總皂苷制備工序(2)中，提取浸膏用熱水分散，通過大孔吸附樹脂柱，用水和60？90％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；脫色工序(3)中，乙醇洗脫液加活性炭，加熱攪拌脫色，過濾，脫色液減壓回收乙醇，干燥得粗品；分離純化工序(4)中，采用高速逆流色譜法對所得粗品進行分離純化，制備得到苦玄參苷I？A。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：李法慶，劉東鋒，
申請(專利權)人：蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：