西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)屬于化工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，具體采用了萃取法、大孔樹脂柱色譜及硅膠柱色譜的方法，使龍膽苦苷能夠被大量的單獨的從硅膠色譜柱上洗脫下來，提高了龍膽苦苷的提取量，最終得到的龍膽苦苷純度達到98.7～99.3％，大大提高了龍膽苦苷的純度。本發(fā)明專利技術(shù)的方法應(yīng)用范圍廣、方便快捷、成本低、操作簡單、分離量大，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于化工
，具體涉及一種西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法。
技術(shù)介紹
西藏胡黃連又名假胡黃連，為玄參科胡黃連屬多年生草本植物的干燥根莖，味苦，性寒，是重要的清虛熱藥材，具有退虛熱、消疳熱、清熱燥濕、瀉火解毒等功效，可用于骨蒸勞熱、黃疸、冷熱泄痢、小兒疳積、自汗、盜汗、痔瘺、瘡腫等癥。研究表明，西藏胡黃連中龍膽苦苷的含量較高。龍膽苦苷具有抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝、利膽等作用，可用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛、結(jié)核病潮熱、小兒疳熱、黃疸性肝炎、小便不利等癥。目前,龍膽苦苷分離提純方法主要有兩種：一種運用大孔吸附樹脂法，該方法分離量較大，但純度不夠高；另一種采用高速逆流色譜儀，該方法上樣量小，不適合大量產(chǎn)品制備使用，且儀器較昂貴，使用時受限制。
技術(shù)實現(xiàn)思路
有鑒于此，本專利技術(shù)目的在于提供一種生姜中6-姜酚的分離提取方法。該方法得到的龍膽苦苷純度高，應(yīng)用范圍廣、方便快捷、成本低、操作簡單、分離量大，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)的技術(shù)方案為：西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，具體包括以下步驟：A.取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量3.88～4.05倍量的甲醇提取；B.將步驟A所得提取液濃縮，向濃縮后的甲醇溶液中加入等體積量的純化水，放置過夜，揮去甲醇，將揮去甲醇的溶液依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取；C.將正丁醇萃取液濃縮至浸膏，揮去正丁醇后用純化水溶解浸膏；D.將步驟C得到的溶液用20～60目的樹脂柱進行色譜分離，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為10％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為30％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為50％的乙醇溶液進行洗脫，洗脫體積為色譜柱保留體積的4倍；將洗脫液濃縮至浸膏；E.將步驟D得到的浸膏溶解于甲醇中，過濾后棄去不溶物，濾液中加入1.45～1.52倍浸膏質(zhì)量的柱色譜硅膠，攪拌均勻，揮去溶劑晾干，粉碎過篩，加入到含有浸膏質(zhì)量13.9～15.7倍的柱色譜硅膠的硅膠色譜柱上；F.以乙酸乙酯：甲醇的體積比為7：3的溶液為洗脫溶劑，對柱色譜進行色譜分離，以龍膽苦苷純品做對照采用薄層色譜法跟蹤檢測，龍膽苦苷純品呈現(xiàn)單一斑點時開始收集洗脫液，洗脫液中再次出現(xiàn)其它斑點時停止收集洗脫液，將收集的洗脫液揮干溶劑，即得龍膽苦苷。進一步，步驟A所述提取為超聲波提取或回流提取。進一步，步驟A中，取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量3.88～4.05倍量的甲醇提取3次，每次2小時，溫度為50～70℃。進一步，步驟B中，所述濃縮的程度為將提取液濃縮至總提取體積的十分之一。進一步，步驟B中，依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次40～50分鐘。即先用正己烷萃取3次(每次40～50分鐘)，再用乙酸乙酯萃取3次(每次40～50分鐘)，最后用正丁醇萃取3次(每次40～50分鐘)。進一步，步驟E所述柱色譜硅膠的規(guī)格為100～300目。進一步，步驟E中粉碎過篩過程篩網(wǎng)的規(guī)格為200目。進一步，步驟F所述柱色譜分離過程中使用的色譜柱的徑高比為1：15。本專利技術(shù)的有益效果在于：本專利技術(shù)所述方法使龍膽苦苷能夠被大量的單獨的從硅膠色譜柱上洗脫下來，提高了龍膽苦苷的提取量，最終得到的龍膽苦苷純度達到98.7～99.3％，大大提高了龍膽苦苷的純度。本專利技術(shù)的方法應(yīng)用范圍廣、方便快捷、成本低、操作簡單、分離量大，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用。具體實施方式所舉實施例是為了更好地對本專利技術(shù)的內(nèi)容進行說明，但并不是本專利技術(shù)的內(nèi)容僅限于所舉實施例。所以熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述
技術(shù)實現(xiàn)思路
對實施方案進行非本質(zhì)的改進和調(diào)整，仍屬于本專利技術(shù)的保護范圍。實施例1西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，具體包括以下步驟：A.取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量4.05倍量的甲醇超聲波提取或回流提取3次，每次2小時，溫度為70℃；B.將步驟A所得提取液濃縮至總提取體積的十分之一，向濃縮后的甲醇溶液中加入等體積量的純化水，放置過夜，揮去甲醇，將揮去甲醇的溶液依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取3次，每次40分鐘(即先用正己烷萃取3次(每次40分鐘)，再用乙酸乙酯萃取3次(每次40分鐘)，最后用正丁醇萃取3次(每次40分鐘))；C.將正丁醇萃取液濃縮至浸膏，揮去正丁醇后用純化水溶解浸膏；D.將步驟C得到的溶液用20目的樹脂柱進行色譜分離，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為10％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為30％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為50％的乙醇溶液進行洗脫，洗脫體積為色譜柱保留體積的4倍；將洗脫液濃縮至浸膏；E.將步驟D得到的浸膏溶解于甲醇中，過濾后棄去不溶物，濾液中加入1.45倍浸膏質(zhì)量的100目柱色譜硅膠，攪拌均勻，揮去溶劑晾干，粉碎過200目篩，加入到含有浸膏質(zhì)量15.7倍的柱色譜硅膠的硅膠色譜柱上；F.以乙酸乙酯：甲醇的體積比為7：3的溶液為洗脫溶劑，對柱色譜進行色譜分離(色譜柱的徑高比為1：15)，以龍膽苦苷純品做對照采用薄層色譜法跟蹤檢測，龍膽苦苷純品呈現(xiàn)單一斑點時開始收集洗脫液，洗脫液中再次出現(xiàn)其它斑點時停止收集洗脫液，將收集的洗脫液揮干溶劑，即得龍膽苦苷，得到的樣品中龍膽苦苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.2％。實施例2西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，具體包括以下步驟：A.取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量3.88倍量的甲醇超聲波提取或回流提取3次，每次2小時，溫度為50℃；B.將步驟A所得提取液濃縮至總提取體積的十分之一，向濃縮后的甲醇溶液中加入等體積量的純化水，放置過夜，揮去甲醇，將揮去甲醇的溶液依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取3次，每次50分鐘(即先用正己烷萃取3次(每次50分鐘)，再用乙酸乙酯萃取3次(每次50分鐘)，最后用正丁醇萃取3次(每次50分鐘))；C.將正丁醇萃取液濃縮至浸膏，揮去正丁醇后用純化水溶解浸膏；D.將步驟C得到的溶液用60目的樹脂柱進行色譜分離，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為10％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為30％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為50％的乙醇溶液進行洗脫，洗脫體積為色譜柱保留體積的4倍；將洗脫液濃縮至浸膏；E.將步驟D得到的浸膏溶解于甲醇中，過濾后棄去不溶物，濾液中加入1.52倍浸膏質(zhì)量的300目柱色譜硅膠，攪拌均勻，揮去溶劑晾干，粉碎過200目篩，加入到含有浸膏質(zhì)量15.7倍的柱色譜硅膠的硅膠色譜柱上；F.以乙酸乙酯：甲醇的體積比為7：3的溶液為洗脫溶劑，對柱色譜進行色譜分離(色譜柱的徑高比為1：15)，以龍膽苦苷純品做對照采用薄層色譜法跟蹤檢測，龍膽苦苷純品呈現(xiàn)單一斑點時開始收集洗脫液，洗脫液中再次出現(xiàn)其它斑點時停止收集洗脫液，將收集的洗脫液揮干溶劑，即得龍膽苦苷，得到的樣品中龍膽苦苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.7％。實施例3西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，具體包括以下步驟：A.取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量3.96倍量的甲醇超聲波提取或回流提取3次，每次2小時，溫度為60℃；B.將步驟A所得提取液濃縮至總提取體積的十分之一，向濃縮后的甲醇溶液中加入等體積量的純化水，放置過夜，揮去甲醇，將揮去甲醇的溶液依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取3次，每次45分鐘(即先用正己烷萃取3次(每次45分鐘)，再用乙酸乙酯萃取3次(每次45分鐘)，最后用正丁醇萃取3次(每次45分鐘))；C.將正丁醇萃取液濃縮至浸膏，揮去正丁醇后用純化水溶解浸膏；D.將步驟C得到的溶液用50目的樹脂本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，其特征在于，包括以下步驟：A.取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量3.88～4.05倍量的甲醇提取；B.將步驟A所得提取液濃縮，向濃縮后的甲醇溶液中加入等體積量的純化水，放置過夜，揮去甲醇，將揮去甲醇的溶液依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取；C.將正丁醇萃取液濃縮至浸膏，揮去正丁醇后用純化水溶解浸膏；D.將步驟C得到的溶液用20～60目的樹脂柱進行色譜分離，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為10％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為30％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為50％的乙醇溶液進行洗脫，洗脫體積為色譜柱保留體積的4倍；將洗脫液濃縮至浸膏；E.將步驟D得到的浸膏溶解于甲醇中，過濾后棄去不溶物，濾液中加入1.45～1.52倍浸膏質(zhì)量的柱色譜硅膠，攪拌均勻，揮去溶劑晾干，粉碎過篩，加入到含有浸膏質(zhì)量13.9～15.7倍的柱色譜硅膠的硅膠色譜柱上；F.以乙酸乙酯：甲醇的體積比為7：3的溶液為洗脫溶劑，對柱色譜進行色譜分離，以龍膽苦苷純品做對照采用薄層色譜法跟蹤檢測，龍膽苦苷純品呈現(xiàn)單一斑點時開始收集洗脫液，洗脫液中再次出現(xiàn)其它斑點時停止收集洗脫液，將收集的洗脫液揮干溶劑，即得龍膽苦苷。

【技術(shù)特征摘要】
1.西藏胡黃連中龍膽苦苷的分離提取方法，其特征在于，包括以下步驟：A.取西藏胡黃連干燥根莖，用其質(zhì)量3.88～4.05倍量的甲醇提取；B.將步驟A所得提取液濃縮，向濃縮后的甲醇溶液中加入等體積量的純化水，放置過夜，揮去甲醇，將揮去甲醇的溶液依次分別用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取；C.將正丁醇萃取液濃縮至浸膏，揮去正丁醇后用純化水溶解浸膏；D.將步驟C得到的溶液用20～60目的樹脂柱進行色譜分離，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為10％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為30％的乙醇溶液、體積分?jǐn)?shù)為50％的乙醇溶液進行洗脫，洗脫體積為色譜柱保留體積的4倍；將洗脫液濃縮至浸膏；E.將步驟D得到的浸膏溶解于甲醇中，過濾后棄去不溶物，濾液中加入1.45～1.52倍浸膏質(zhì)量的柱色譜硅膠，攪拌均勻，揮去溶劑晾干，粉碎過篩，加入到含有浸膏質(zhì)量13.9～15.7倍的柱色譜硅膠的硅膠色譜柱上；F.以乙酸乙酯：甲醇的體積比為7：3的溶液為洗脫溶劑，對柱色譜進行色譜分離，以龍膽苦苷純品做對照采用薄層色譜法跟蹤檢測，龍膽苦苷純品呈現(xiàn)單一斑點時開始收集洗脫液，洗脫液中再次出現(xiàn)其它斑點時停止收集洗...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：朱仝飛，閆志慧，
申請(專利權(quán))人：重慶醫(yī)藥高等專科學(xué)校，
類型：發(fā)明
國別省市：重慶;50