本發明專利技術公開了一種約氏乳桿菌及其制劑和用途，還公開了本發明專利技術菌株的優化培養基及菌株凍干制劑的制備方法。本發明專利技術的約氏乳桿菌ZLJ010的微生物保藏編號為CGMCC?No.5762。本發明專利技術菌株遺傳基礎明確，具有生長好、產酸、耐酸、耐熱和抑菌能力強的特性。本發明專利技術菌株凍干制劑作為母豬的飼料添加劑，可以改善母豬的腸道健康，降低糞便中有害菌數量，提高機體的免疫力，提高母豬的生產性能。
【技術實現步驟摘要】
一種約氏乳桿菌及其制劑與應用
本專利技術屬微生物領域，特別涉及一種約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)ZLJOlO菌株及其制劑在畜禽微生物飼料添加劑中的應用。
技術介紹
在養豬生產中，母豬占有很重要的地位，母豬的健康狀況和繁殖性能直接影響豬場的生產水平和經濟效益。有資料分析，每頭母豬年提供仔豬的數量越多，仔豬分攤的母豬生產成本就越低，年提供16頭仔豬的生產成本，要比提供22頭仔豬的多52%。因此，通過技術創新，提高母豬的繁殖性能具有重要意義。若有針對性地研發出高效益生菌制劑，調控好母豬腸道菌群平衡，促進飼料營養的吸收和新陳代謝，減少糞便中有害菌的排出量，就有可能提高胎兒及哺乳仔豬的成活率和增重速度，從而提高母豬的窩產仔數、窩斷奶頭數及斷 奶窩重等繁殖指標。但目前國內外關于益生菌的研究與應用多集中在仔豬上，很少見在母豬上的研究與報道。而實際生產中，母豬承擔著復雜而繁重的繁殖仔豬任務，再加之當前的集約化飼養方式限制了母豬的自由活動，很容易引起母豬腸道菌群失調、免疫力下降、體況變差、出現便秘和厭食等情況，嚴重者還影響母豬下一個繁殖周期的生產；另外，新生仔豬通過母豬產道、采食母乳、環境接觸等在腸道內定植多種菌群，如果母豬腸道菌群失調，會有大量的有害菌隨糞便排出，這就增加了仔豬接觸有害菌的幾率，進而影響哺乳仔豬的身體健康和增重速度。約氏乳桿菌(Lactobacillusjohnsonii )是乳酸桿菌屬(Lactobacillus)中的種群之一，是安全級(generally regarded as safe, GRAS)的有益菌。張鳳華等從小雞腸道中分離出一株約氏乳桿菌(HN/0711)，但沒有報道其特性；孫曉雯等從豬糞中分離到一株約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii SunOOl),發現該菌在ρΗ2· 5的模擬胃液中處理3h，存活率僅為68. 8% ;苗玉和等從仔豬腸道中分離到一株約氏乳桿菌(LY7株)，發現該菌在37°C、pH 5. 7、接種量2%、培養18h后的活菌數達到4. 7X108CFU/mL ;申請號為201110416416. 8，專利技術名稱為約氏乳桿菌及其菌劑、應用和預混料中公開了以約氏乳桿菌、嗜酸乳桿菌、短小芽孢桿菌制成的混合菌劑在仔豬飼養中的應用。顯然這些研究還是初步的，如何制備出能夠在母豬養殖生產中效果好且使用方便的益生菌制劑，尚需要進一步研究。
技術實現思路
本專利技術針對母豬飼喂，提供了一種可培養、生長好，且具有較強的產酸、耐酸、耐熱及具有抑菌作用的約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)ZLJO10,同時對其培養基、凍干制劑和生產工藝進行優化。本專利技術提供了一種約氏乳桿菌ZLJ010菌株，其微生物保藏編號為=CGMCCNo.5762。所述約氏乳桿菌ZLJ010具有以下特性①在35°C下培養16h后，進入生長穩定期；②在35 °C下培養30h后，pH達到3. 85 ;③在人工胃液及人工腸液中處理2 4h，活菌數在109CFU/mL以上；④在65°C下處理30 60s，存活率在70. 9%以上。約氏乳桿菌ZLJ010在制備抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌藥物或試劑中的用途。 約氏乳桿菌ZLJ010的培養基蔗糖20g、大豆蛋白胨20g、牛肉膏20g、酵母浸粉7. 5g、無水乙酸鈉5g、檸檬酸氫二銨 2g,K2HPO4 *3H20 2g、MgS04 ·7Η20 O. 58g、MnS04 .H2O O. 19g、吐溫 _801mL、蒸餾水 IOOOmL0一種約氏乳桿菌凍干制劑，包括約氏乳桿菌ZLJ010和凍干保護劑。所述約氏乳桿菌凍干制劑的優化方案為脫脂乳15. 70g、海藻糖7. 68g、L-半胱氨酸I. 60g、乳糖4g、L-賴氨酸O. 5g、谷氨酸鈉lg、糊精5g、甘油lmL、蒸懼水100mL。約氏乳桿菌凍干制劑的制備方法，包括如下工藝步驟①菌種活化將于_70°C下保存的約氏乳桿菌ZLJ010以1%的接種量接種于液體培養基中，在35°C下培養18h后，為一級種子液；一級種子液再以1%的接種量接種于液體培養基中，于35°C下培養18h，為二級種子液，待用；②擴大培養將約氏乳桿菌ZLJ010的二級種子液以1%的接種量接種，在35°C下培養22h ；③離心離心分離步驟②中擴大培養制得的發酵液，得到菌泥；④乳化將保護劑和菌泥混合均勻，采用高剪切分散乳化機乳化20min，制成菌懸液；⑤真空冷凍干燥乳化后的菌懸液先預凍2h，然后在冷凝溫度為_50°C、真空度9Pa的條件下真空冷凍干燥20h，得凍干粉；⑥凍干制劑定時收取凍干粉，粉碎、分裝，鋁箔袋真空貯藏。約氏乳桿菌ZLJ010在制備動物飼料添加物、動物用醫療組合物中的應用。本專利技術提供的約氏乳桿菌ZLJ010具有以下特性①可培養、生長好在35°C下培養16h后，進入生長穩定期；培養30h后，pH達到3. 85 ；②耐酸在人工胃液及人工腸液中處理2 4h，活菌數在109CFU/mL以上；③耐熱在65°C下處理30 60s，存活率在70. 9%以上；④抑菌作用對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌具有抑制作用。本專利技術提供的約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii),保藏名稱為約氏乳桿菌ZLJ010，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，地址北京市朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所，郵政編碼100101，保藏編號為CGMCC No. 5762 ;保藏日期為2012年02月16日，菌種名稱為:約氏乳桿菌Lactobacillusjohnsonii,生物保藏存活信息存活。本專利技術優化了約氏乳桿菌ZLJ010的培養基配方蔗糖20g、大豆蛋白胨20g、牛肉膏20g、酵母浸粉7. 5g、無水乙酸鈉5g、檸檬酸氫二銨2g、K2HPO4 · 3H202g、MgS04 · 7H20O. 58g、MnSO4 · H2O 0. 19g、吐溫_801mL、蒸餾水1000mL。利用該培養基配方，可使該菌的培養效率大幅提高，活菌數不低于2. OX 109CFU/mL，是普通培養基效果的3 4倍。本專利技術還篩選出了約氏乳桿菌ZLJ010的最優凍干保護劑配方脫脂乳15. 70g、海藻糖7. 68g、L-半胱氨酸I. 60g、乳糖4g、L-賴氨酸O. 5g、谷氨酸鈉lg、糊精5g、甘油lmL、蒸餾水100mL。利用該保護劑配方，可使該菌的凍干存活率達到87%以上，凍干粉活菌數達到6. OX 109CFU/g以上，是普通凍干保護劑效果的5 8倍。減少了約氏乳桿菌的凍干損失，提高了凍干粉的活菌數，降低了菌劑的單位生產成本。在母豬懷孕90d至母豬哺乳25d斷奶這個特殊的生理階段，在日糧(粉料)中添加約氏乳桿菌ZLJ010凍干制劑，使日糧中的活菌數達到6. OX 109CFU/kg，母豬的窩產活仔數提高了 7. 71% (0.81頭)，窩斷奶仔豬數提高了 9. 33% (0. 88頭)，活仔率提高了 3個百分點，仔豬25d斷奶個體重提高了 0. 14kg，母豬的便秘率下降，母豬糞便中的有害細菌數量大幅度下降，其中大腸桿菌數量下降了 54. 67%，金黃色葡萄球菌數量下降了 35. 9本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種約氏乳桿菌Lactobacillus？johnsonii？ZLJ010菌株，其微生物保藏編號為：CGMCCNo.5762。
【技術特征摘要】
1.一種約氏乳桿菌Lactobacillus johnsonii ZLJOlO菌株,其微生物保藏編號為CGMCCNo. 5762。2.如權利要求I所述的一種約氏乳桿菌，其特征在于所述約氏乳桿菌ZLJ010 ①在35°C下培養16h后，進入生長穩定期； ②在35°C下培養30h后，pH達到3.85 ； ③在人工腸液及人工胃液中處理2 4h，活菌數在109CFU/mL以上； ④在65°C下處理30 60s，存活率在70.9%以上。3.如權利要求I所述的一種約氏乳桿菌，在制備抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌藥物或試劑中的用途。4.一種如權利要求I 2任一所述的約氏乳桿菌的培養基,其特征在于 蔗糖20g、大豆蛋白胨20g、牛肉膏20g、酵母浸粉7. 5g、無水乙酸鈉5g、檸檬酸氫二銨2g、K2HPO4 · 3H20 2g、MgSO4 · 7H20 0. 58g、MnSO4 · H2O 0. 19g、吐溫-80 lmL、蒸餾水 IOOOmL05.一種約氏乳桿菌凍干制劑，包括約氏乳桿菌ZLJ010和凍干保護劑。6.如權利要求5所述的約氏乳桿菌凍干制劑，其特征在于所...
【專利技術屬性】
技術研發人員：季海峰，王四新，劉輝，張董燕，王晶，王雅民，
申請(專利權)人：北京市農林科學院，
類型：發明
國別省市：
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