一種快速高效構(gòu)建S酵母優(yōu)良菌株的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種快速高效構(gòu)建Ｓ酵母優(yōu)良菌株的方法，是在確定ＥＭＳ（甲基磺酸乙酯）對(duì)Ｓ酵母（即醬油企業(yè)所用的魯氏酵母）雙倍體細(xì)胞最佳作用時(shí)間的基礎(chǔ)上，用ＥＭＳ對(duì)非傳統(tǒng)酵母菌株Ｓ酵母雙倍體進(jìn)行隨機(jī)誘變，產(chǎn)生Ｓ酵母遺傳多樣性菌株文庫(kù)，通過(guò)高效產(chǎn)孢、孢子純化、充分融合、耐鹽性篩選的多輪有性重組使文庫(kù)中菌株間發(fā)生基因組重排，從而構(gòu)建具有優(yōu)良發(fā)酵性狀的Ｓ酵母重組菌株。由此方法構(gòu)建的重組菌株的耐鹽性得到了明顯的提高，發(fā)酵周期縮短了１０天，產(chǎn)生的風(fēng)味物質(zhì)較野生型菌株明顯改善，而且還產(chǎn)生了重要的風(fēng)味物質(zhì)４－ＥＧ；該優(yōu)良菌株在高鹽稀態(tài)發(fā)酵中能產(chǎn)生醇厚、酯香的醬油風(fēng)味，具有較好的理化指標(biāo)，為醬油的工業(yè)生產(chǎn)提供了優(yōu)良的菌株。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種快速高效構(gòu)建Ｓ酵母優(yōu)良菌株的方法，其特征在于：構(gòu)建方法包括如下步驟：　（１）將Ｓ酵母菌株采用ＥＭＳ進(jìn)行誘變，以確定最佳的ＥＭＳ誘變時(shí)間；　（２）配制含有各種鹽濃度的選擇平板；　（３）對(duì)培養(yǎng)后的Ｓ酵母菌株雙倍體細(xì)胞進(jìn)行Ｅ ＭＳ誘變，處理時(shí)長(zhǎng)為在上步驟所確定的最佳作用時(shí)間，并將誘變后的細(xì)胞均勻涂布到含鹽的選擇平板上，平板上得到的所有Ｓ酵母菌株即為原始突變?nèi)后w；　（４）將原始突變?nèi)后w進(jìn)行高效產(chǎn)孢、以及孢子純化；　（５）將純化后的孢子進(jìn)行充分融合，融合 后的孢子在含鹽的選擇平板上進(jìn)行篩選，將篩選出的所有單菌落作為下一輪基因組重排的母本；　（６）重復(fù)步驟（４）、（５），最后一輪篩選出的單菌落即為Ｓ酵母優(yōu)良菌株。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：曹小紅，侯麗華，王春玲，曾斌，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：天津科技大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：12[中國(guó)|天津]