一種新的多肽——人ABC轉運蛋白39和編碼這種多肽的多核苷酸制造技術

本發明專利技術公開了一種新的多肽－人ＡＢＣ轉運蛋白３９，編碼此多肽的多核苷酸和經ＤＮＡ重組技術產生這種多肽的方法。本發明專利技術還公開了此多肽用于治療多種疾病的方法，如惡性腫瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各類炎癥等。本發明專利技術還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發明專利技術還公開了編碼這種新的人ＡＢＣ轉運蛋白３９的多核苷酸的用途。（*該技術在2019年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于生物
，具體地說，本專利技術描述了一種新的多肽——人ABC轉運蛋白39，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本專利技術還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。ATP結合蛋白在生物體內廣泛存在，且具有非常重要的生理學功能，涉及細胞的增殖、信號轉導、蛋白合成及蛋白定位等重要功能。ATP結合蛋白又可分為各種超級家族，各超級家族又擁有眾多的家族成員。ATP蛋白家族的成員均含有保守的ATP結合功能域，ATP結合功能域在生物體內被作為分子開關，通過其與ADP、ATP結合與否來調節蛋白的表達與不表達。因而，ATP結合蛋白在生物體內有著極為重要的作用，其表達異常將導致組織細胞的異常增殖及蛋白的異常表達，從而引發各種與之相關的疾病，如各種惡性腫瘤及癌癥、各種發育紊亂癥、各種免疫系統疾病等。ATP結合功能域是各種ATP結合蛋白中普遍存在的結構域，一些連接ATP的蛋白都或多或少含有這一保守的mot if序列，該基序具有保守的特征性序列片段-X(4)-G-K-(其中X為任意氨基酸殘基)。這些motif中最為保守的是glycine富集區域，這一區域在β線與α螺旋之間形成一個易彎曲的環。這一彎曲環通常與核苷酸上的某一磷酸基團反應，該motif序列通常被稱為“A”共有序列或P環。該基序在生物體內通常負責與ATP結合，為蛋白發揮生物學功能提供所需的能量及穩定蛋白在生物體內的結構，協助蛋白完成其正常的生理學功能。其表達異常將直接導致一些蛋白的異常表達及功能異常，從而引發各種相關的疾病，如發育紊亂、腫瘤及癌癥的發生等。因而，該基序在蛋白發揮正常生理功能的過程中起著極為重要的作用。在真核和原核生物中，有一類ATP結合蛋白，被稱為ABC轉運蛋白(ATP-binding cassette transporter)，不同的ABC轉運蛋白組成了一個重要的蛋白家族。某些ABC轉運蛋白的ATP結合亞基的晶體結構已被發現，具體的結構請參閱相關文獻。(Nature 1998 Dec 17；396(6712)703-7)有研究表明，ABC轉運蛋白的基本作用是調控ATP的轉運和釋放，其中的動力學機制已被揭示，由此可以明確ABC轉運蛋白在細胞需要利用能量的生命過程中起到重要作用。(Methods Enzymol.1998；292664-75)(Am J Physiol 1999Jan；276(1 Pt 1)C1-8)根據研究，在系統發生過程中處于不同階段的生物體的ABC轉運蛋白在進化上是充分保守的，它對于某些小分子(如麥芽糖、海藻糖等)的轉運有著重要作用。(J Bacteriol 1998 Feb；180(3)680-9)如果ABC轉運蛋白的一些成員發生突變，會導致很多疾病的出現，如膀胱纖維癥、高胰島素血癥、Stargardt氏癥、復合藥物抵抗癥等等這一點已被證明，并且，與上述一些疾病相關的ABC轉運蛋白的編碼基因已被克隆。(HumMol Genet1998 Feb；7203-7)；(Biochem Biophys Res Commun.1997 Oct 9；239(1)261-4)經研究發現，有幾種ABC轉運蛋白(ALDP，ALDR，PMP70)在人的過氧化物酶體的膜結構中有存在并起重要作用，其中，ALDP的突變會導致X染色體連鎖的腦白質病變，而ALDR和PMP70的功能尚未明確。(Hum Mol Genet.1997Oct；6(11)1925-31)helABC基因編碼了一種ABC轉運蛋白的復合物，對于亞鐵血紅素的轉運幫助細胞色素c的生物合成有充分的調控作用。(J Mol Biol 1997 May16；268(4)724-38)AbcA是一種ABC轉運蛋白，研究結果顯示，它可以影響細胞趨化作用過程中所需要的一些分子的轉運過程。(J Bacteriol 1998 Nov；180(21)5697-703)組氨酸透性酶也是一種ABC轉運蛋白，它結合于膜上，構成一個復合物，在配體可溶性受體存在時可以水解ATP，具有ATPase酶的活性。(Proc Natl AcadSci USA 1998 Mar 31；95(7)3495-500)另外，ABC轉運蛋白中還包括了很多與醫學有重要聯系的蛋白，例如，膀胱纖維癥跨膜調節因子(CFTR)，P-糖蛋白等等。根據氨基酸同源比較的結果，本專利技術的多肽被推斷鑒定為人ABC轉運蛋白39(HABCT39)，其同源蛋白為裂殖酵母的ABC轉運蛋白，它的蛋白號是AL022299。由于如上所述人ABC轉運蛋白39蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人ABC轉運蛋白39蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人ABC轉運蛋白39蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。本專利技術的一個目的是提供分離的新的多肽——人ABC轉運蛋白39以及其片段、類似物和衍生物。本專利技術的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人ABC轉運蛋白39的多核苷酸的重組載體。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人ABC轉運蛋白39的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。本專利技術的另一個目的是提供生產人ABC轉運蛋白39的方法。本專利技術的另一個目的是提供針對本專利技術的多肽——人ABC轉運蛋白39的抗體。本專利技術的另一個目的是提供了針對本專利技術多肽——人ABC轉運蛋白39的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。本專利技術的另一個目的是提供診斷治療與人ABC轉運蛋白39異常相關的疾病的方法。本專利技術涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本專利技術還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體(a)編碼具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種(a)具有SEQ ID NO1中685-1746位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2049位的序列。本專利技術另外涉及一種含有本專利技術多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本專利技術多肽的方法。本專利技術還涉及一種能與本專利技術多肽特異性結合的抗體。本專利技術還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人ABC轉運蛋白39蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本專利技術的多肽。本專利技術還涉及用該方法獲得的化合物。本專利技術還涉及一種體外檢測與人ABC轉運蛋白39蛋白異常表達相關的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本專利技術多肽的量或生物活性。本專利技術也涉及一種藥物組合物，它含有本專利技術多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學上可接受的載體。本專利技術還涉及本專利技術的多肽和本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的多肽－人ＡＢＣ轉運蛋白３９，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：毛裕民，謝毅，曹躍瓊，江廣平，戴建涼，
申請(專利權)人：上海博容基因開發有限公司，
類型：發明
國別省市：31[中國|上海]