魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物的制備方法和應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物的制備方法和應(yīng)用，利用高溫醋酸水解法從魷魚加工的副產(chǎn)品魷魚皮中制備魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物，本方法反應(yīng)條件穩(wěn)定，易于控制，無污染物排放，符合清潔化生產(chǎn)。動物實(shí)驗(yàn)表明，魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物可顯著提高耐缺氧存活時間；增加體內(nèi)乳酸脫氫酶活性；減少體內(nèi)血乳酸和血尿素氮的含量。結(jié)果顯示，采用本發(fā)明專利技術(shù)制備的魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物均有顯著提高耐缺氧活性，可用于制備耐缺氧藥物及功能食品，對開發(fā)利用中國的海洋藥用生物資源具有重要意義。

Preparation and application of squid collagen polypeptide and its iron complex

Method and application of the invention discloses a preparation of collagen polypeptide and its iron complex squid, squid and preparation of collagen polypeptide iron complex system using high temperature hydrolysis byproduct of acetic acid from the squid squid skin in the processing, the reaction condition is stable, easy to control, no emissions, with clean production. Animal experiments show that squid collagen polypeptide and its iron complex can significantly improve the survival time of hypoxia resistance, increase the activity of lactic dehydrogenase in vivo, and reduce the blood lactate and blood urea nitrogen content in vivo. The results showed that the prepared collagen polypeptide and its iron complex squid could significantly enhance the anti hypoxia activity, can be used for the preparation of anti hypoxia drug and functional food, is of great significance to the development and utilization of marine biological resources of medicinal China.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物的制備方法和應(yīng)用
本專利技術(shù)屬于涉及醫(yī)藥
，更具體地講，涉及魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物的制備方法和應(yīng)用。
技術(shù)介紹
魷魚(Loligochinensis)為軟體動物門槍烏賊屬海洋生物。廣泛分布于我國的南海和東南亞海域。其營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)含量高，可加工為多種美味食品。魷魚加工過程中，除去外皮，魷魚皮往往作為廢棄物。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，魚類加工過程中廢棄物占總量的30％左右，其中含有豐富的蛋白質(zhì)資源，以膠原蛋白為主，其水解產(chǎn)物含有多種活性肽。活性肽有抗腫瘤、抗?jié)儭⒔笛獕骸⒋龠M(jìn)骨形成、促進(jìn)皮膚代謝和增強(qiáng)免疫等生理和藥理活性。在醫(yī)藥、保健及美容化妝方面具有良好的應(yīng)用前景。對魚類下腳料膠原蛋白的研究在國內(nèi)開展不多，往往作為廢棄物處理，造成生物資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。我國膠原產(chǎn)品通常從屠宰動物的廢料中制取，水產(chǎn)動物中的膠原蛋白肽的利用一直是空白。利用現(xiàn)代生物技術(shù)提取膠原蛋白多肽，提高生物活性，進(jìn)一步開發(fā)醫(yī)藥、保健及美容化妝品的原料，國內(nèi)外目前未見有過報(bào)道。將海產(chǎn)魚類下腳料提取膠原蛋白并制備新的活性膠原多肽，進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，既能滿足各行業(yè)對膠原蛋白多肽的需求，又能提升水產(chǎn)品的附加值并使廢棄物再利用，保護(hù)環(huán)境，對水產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供廣闊的前景。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的第一個目的在于提供魷魚膠原多肽的制備方法。本專利技術(shù)的第二個目的在于提供魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物的制備方法。本專利技術(shù)的第三個目的在于提供魷魚膠原多肽好和魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物。本專利技術(shù)的第四個目的在于提供魷魚膠原多肽及其鐵絡(luò)合物的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)第一個目的，本專利技術(shù)公開以下技術(shù)方案：魷魚膠原多肽的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：(1)取新鮮魷魚皮絞碎置高壓反應(yīng)鍋內(nèi)，加入質(zhì)量百分比為2-10％的醋酸水溶液，邊加邊攪拌，攪拌均勻后蒸汽加熱，溫度控制在110-130℃，水解1-3小時后立即停止加熱，讓其自然降溫至105℃以下；(2)緩慢開啟放氣閥，打開加料口加入活性炭，90～100℃保溫20-60分鐘，然后離心，離心液濃縮至1/3—1/5重量得到濃縮液1；(3)步驟(2)獲得的濃縮液1冷卻到室溫后，加入3-5倍重量的乙醇，邊加邊攪拌，讓其沉淀過夜，沉淀液離心，濾液再壓濾，濾液回收乙醇并濃縮至1/9—1/11重量得到濃縮液2，將濃縮液2噴霧干燥，得橙黃色疏松固體即為魷魚膠原多肽(SP-1)。經(jīng)質(zhì)譜分析，含有20余種肽類成分。作為一個優(yōu)選方案，步驟(1)水解1小時。為實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)第二個目的，本專利技術(shù)公開以下技術(shù)方案：魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：(1)將上述魷魚膠原多肽溶于蒸餾水中，磁力攪拌下緩慢地加入重量百分比2.8％硫酸亞鐵水溶液，室溫反應(yīng)3h-4h；(2)反應(yīng)液過濾后，向?yàn)V液中加入3-5倍重量的乙醇進(jìn)行沉淀，2h后抽濾，無水乙醇洗滌，濾渣于室溫真空干燥除乙醇，干燥物復(fù)用蒸餾水溶解，冷凍干燥，得棕黃色鱗片疏松物即為魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物(SP-F)。得率為47.2％。為實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)第三個目的，本專利技術(shù)公開以下技術(shù)方案：利用上述魷魚膠原多肽的制備方法制備獲得的魷魚膠原多肽，以及，利用上述魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物的制備方法制備獲得的魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物。為實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)第四個目的，本專利技術(shù)公開以下技術(shù)方案：的魷魚膠原多肽在制備耐缺氧藥物或耐缺氧食品中的應(yīng)用，以及，魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物在制備耐缺氧藥物或耐缺氧食品中的應(yīng)用。本專利技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于：本方法較之傳統(tǒng)的硫酸和鹽酸水解法，具有反應(yīng)條件穩(wěn)定，易于控制，無污染物排放，符合清潔化生產(chǎn)。本專利技術(shù)從魷魚下腳料魚皮等海產(chǎn)魚類下腳料中提取膠原蛋白并制備新的活性膠原多肽，進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，既能滿足各行業(yè)對膠原蛋白多肽的需求，又能提升水產(chǎn)品的附加值并使廢棄物再利用，保護(hù)環(huán)境，對水產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供廣闊的前景。動物實(shí)驗(yàn)表明，魷魚膠原多肽(SP-1)及其鐵絡(luò)合物(SP-F)可顯著提高耐缺氧存活時間；增加體內(nèi)乳酸脫氫酶活性；減少體內(nèi)血乳酸和血尿素氮的含量。本專利技術(shù)制備的SP-1和SP-F可顯著提高耐缺氧活性，可用于制備耐缺氧藥物及功能食品，對開發(fā)利用中國的海洋藥用生物資源具有重要意義。附圖說明圖1為耐缺氧存活時間。圖2為乳酸脫氫酶活性。圖3為血乳酸含量。圖4為血尿素氮檢測。圖5質(zhì)譜測定結(jié)果。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本專利技術(shù)。下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本專利技術(shù)而不用于限制本專利技術(shù)的范圍。實(shí)施例1.魷魚皮膠原多肽的制備新鮮魷魚皮200Kg，用絞肉機(jī)絞碎。絞碎的魷魚皮置高壓反應(yīng)鍋內(nèi)。加入1200L的3％醋酸水(即水1160L，冰醋酸36Kg或72瓶500ml的冰醋酸混合而成)，邊加邊攪拌，直到加完為止。醋酸水加完并攪拌均勻后，開始加熱，溫度控制在121℃，水解1小時后，立即停止加熱，讓其自然降溫至～105℃，然后緩慢開啟放氣閥，打開加料口，加入2.5Kg活性炭，90～100℃保溫20分鐘。然后離心，離心液濃縮至300L左右。濃縮液冷卻到室溫后，加入3倍量(V/V)95％乙醇，邊加邊攪，讓其沉淀過夜。沉淀液離心，濾液再壓濾。濾液回收乙醇并濃縮至200L左右，濃縮液再噴霧干燥，得橙黃色疏松固體(魷魚膠原多肽)4.5公斤。質(zhì)譜測定結(jié)果：采用直接進(jìn)樣法，膠原總多肽經(jīng)質(zhì)譜負(fù)離子譜和正離子譜測定，膠原總多肽在分子量170-1334.5的范圍內(nèi)，含有20余種寡肽類成分。質(zhì)譜分析見圖5。實(shí)施例2.魷魚皮膠原多肽的制備新鮮魷魚皮100Kg，用絞肉機(jī)絞碎。絞碎的魷魚皮置高壓反應(yīng)鍋內(nèi)。加入600L的8％醋酸水(即水580L，冰醋酸18Kg混合而成)，邊加邊攪拌，直到加完為止。醋酸水加完并攪拌均勻后，開始加熱，溫度控制在110℃，水解1小時后，立即停止加熱，讓其自然降溫至～105℃，然后緩慢開啟放氣閥，打開加料口，加入1Kg活性炭，90～100℃保溫20分鐘。然后離心，離心液濃縮至150L左右。濃縮液冷卻到室溫后，加入3倍量(V/V)95％乙醇，邊加邊攪，讓其沉淀過夜。沉淀液離心，濾液再壓濾。濾液回收乙醇并濃縮至200L左右，濃縮液再噴霧干燥，得橙黃色疏松固體(魷魚膠原多肽)2.3公斤。實(shí)施例3.魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物的制備將魷魚皮水解肽30.00g溶于120mL的蒸餾水中，加入2.8％硫酸亞鐵溶于30mL。在磁力攪拌下，將硫酸亞鐵溶液緩慢地加入魷魚皮水解肽溶液中，室溫反應(yīng)3h。反應(yīng)液用脫脂棉過濾后，向?yàn)V液中加入3倍量的95％乙醇，進(jìn)行沉淀。抽濾，無水乙醇洗滌兩次，濾渣于室溫真空干燥(除乙醇)。復(fù)用420mL蒸餾水溶解，冷凍干燥，得魷魚皮水解肽亞鐵鹽(棕黃色鱗片疏松物)。得率為47.8％。實(shí)施例4.魷魚膠原多肽鐵絡(luò)合物的制備將魷魚皮水解肽100.00g溶于400mL的蒸餾水中，加入2.8％硫酸亞鐵100mL。在磁力攪拌下，將硫酸亞鐵溶液緩慢地加入魷魚皮水解肽溶液中，室溫反應(yīng)3h。反應(yīng)液用脫脂棉過濾后，向?yàn)V液中加入3倍量的95％乙醇，進(jìn)行沉淀。抽濾，無水乙醇洗滌兩次，濾渣于室溫真空干燥(除乙醇)。復(fù)用1400mL蒸餾水溶解，冷凍干燥，得魷魚皮水解肽亞鐵鹽(棕黃色鱗片疏松物)。得率為48.1％。實(shí)施例5.魷魚多肽本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
魷魚膠原多肽的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：(1)取新鮮魷魚皮絞碎置高壓反應(yīng)鍋內(nèi)，加入質(zhì)量百分比為2?10％的醋酸水溶液，邊加邊攪拌，攪拌均勻后蒸汽加熱，溫度控制在110?130℃，水解1?3小時后立即停止加熱，讓其自然降溫至105℃以下；(2)緩慢開啟放氣閥，打開加料口加入活性炭，90～100℃保溫20?60分鐘，然后離心，離心液濃縮至1/3—1/5重量得到濃縮液1；(3)步驟(2)獲得的濃縮液1冷卻到室溫后，加入3?5倍重量的乙醇，邊加邊攪拌，讓其沉淀過夜，沉淀液離心，濾液再壓濾，濾液回收乙醇并濃縮至1/9—1/11重量得到濃縮液2，將濃縮液2噴霧干燥，得橙黃色疏松固體即為魷魚膠原多肽。

【技術(shù)特征摘要】
1.魷魚膠原多肽的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：(1)取新鮮魷魚皮絞碎置高壓反應(yīng)鍋內(nèi)，加入質(zhì)量百分比為2-10％的醋酸水溶液，邊加邊攪拌，攪拌均勻后蒸汽加熱，溫度控制在110-130℃，水解1-3小時后立即停止加熱，讓其自然降溫至105℃以下；(2)緩慢開啟放氣閥，打開加料口加入活性炭，90～100℃保溫20-60分鐘，然后離心，離心液濃縮至1/3—1/5重量得到濃縮液1；(3)步驟(2)獲得的濃縮液1冷卻到室溫后，加入3-5倍重量的乙醇，邊加邊攪拌，讓其沉淀過夜，沉淀液離心，濾液再壓濾，濾液回收乙醇并濃縮至1/9—1/11重量得到濃縮液2，將濃縮液2噴霧干燥，得橙黃色疏松固體即為魷魚膠原多肽。2.根據(jù)權(quán)利和要求1所述的魷魚膠原多肽的制備方法，其特征在于，步驟(1)水...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：易楊華，
申請(專利權(quán))人：上海華惠海洋生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：上海,31