本發(fā)明專利技術(shù)提供一種克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉及其制備方法與應(yīng)用。所述動物尿液干粉包括獨(dú)立包裝的陰性和陽性尿液干粉。所述制備包括：采集新鮮尿液，離心處理，收集上清液；真空室溫干燥得到陰性尿液干粉；采集新鮮尿液，離心處理，收集上清液；加入克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品，混勻；真空室溫干燥，得到陽性尿液干粉。所述動物尿液干粉可用作克倫特羅酶聯(lián)免疫試紙卡和試劑盒使用中的質(zhì)控樣品。本發(fā)明專利技術(shù)提供的動物尿液干粉能夠在常溫下密封長期保存，在向干粉中加入適量純水后，干粉溶解形成的溶液與利用新鮮動物尿液配制的克倫特羅酶聯(lián)免疫試紙卡和試劑盒質(zhì)控樣品在應(yīng)用上無差異，可以替代新鮮動物尿液配制而成的克倫特羅檢測質(zhì)控樣品。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉及其制備方法與應(yīng) 用
本專利技術(shù)屬于食品安全檢測領(lǐng)域，具體涉及一種克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉 及其制備方法與應(yīng)用。
技術(shù)介紹
克倫特羅是最主要的一種瘦肉精類物質(zhì)，在國內(nèi)外已經(jīng)發(fā)生多起食用動物源性 食品導(dǎo)致克倫特羅中毒的事件，我國政府明令禁止在動物生產(chǎn)中使用克倫特羅。但是，由于 克倫特羅具有提高動物生長速度和瘦肉率的作用，仍有少數(shù)不法分子鋌而走險(xiǎn)，非法制造、 銷售和使用克倫特羅，導(dǎo)致克倫特羅在動物生產(chǎn)中禁而不絕，造成的食品安全事件屢有發(fā) 生。由于克倫特羅主要在動物養(yǎng)殖階段使用，并且大部分以原型藥物的形式從尿液中排出。 因此，動物養(yǎng)殖環(huán)節(jié)是各級管理部門和食品企業(yè)克倫特羅監(jiān)測的重點(diǎn)，其方法主要是采用 酶聯(lián)免疫試紙卡或試劑盒對養(yǎng)殖動物的尿液進(jìn)行克倫特羅篩查檢測。但是，酶聯(lián)免疫試紙 卡或試劑盒本身具有假陽性和假陰性的誤判風(fēng)險(xiǎn)，易受環(huán)境等因素影響導(dǎo)致失效，對操作 環(huán)境和人員水平有一定要求，加之市售產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，一般用戶缺乏專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室條 件進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)，從而難以對此類產(chǎn)品的質(zhì)量做出合理的判斷，導(dǎo)致了檢測結(jié)果可靠性差。 使用陰性和陽性質(zhì)控樣品對檢測產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)證是提高檢測準(zhǔn)確度和可靠性的重要手段。然 而，由于動物尿液不便于保存、運(yùn)輸和現(xiàn)場操作，質(zhì)控樣品只能現(xiàn)用現(xiàn)配，所以在酶聯(lián)免疫 試紙卡和試劑盒中的應(yīng)用很少。因此，開發(fā)出易于保存、運(yùn)輸和便于現(xiàn)場操作的質(zhì)控用動物 尿液樣品對于提高克倫特羅檢測產(chǎn)品結(jié)果可靠性十分必要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的之一是提供一種制備克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉的方法。 本專利技術(shù)所提供的制備克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉的方法，包括下述a)和 b)： 所述a)為陰性樣品的制備，具體步驟如下：采集新鮮尿液，立即進(jìn)行離心處理，收 集上清液，得到離心凈化后的尿液；接著將所述離心凈化后的尿液干燥，得到陰性尿液干 粉； 所述b)為陽性樣品的制備，具體步驟如下：采集新鮮尿液，立即進(jìn)行離心處理，收 集上清液，得到離心凈化后的尿液；接著向所述離心凈化后的尿液中加入克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品， 混勻，得到含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液；最后將所述含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液干燥，得到陽性 尿液干粉。 上述方法步驟a)中，所述新鮮尿液來源于已知來源并確定從未食用過克倫特羅 的動物；其中，所述動物具體可為豬、牛、羊等。 所述尿液的采集時(shí)間與動物的排尿時(shí)間間隔不超過10分鐘，以保證尿液的新鮮 程度。 所述離心處理的條件為：1500 Xg離心5?15分鐘。 所述干燥為在真空濃縮儀中進(jìn)行的室溫干燥；所述干燥的時(shí)間為4-6小時(shí)。 所述干燥的具體操作如下：將所述離心凈化后的尿液置于樣品瓶中，將所述含有 尿液的樣品瓶置于真空濃縮儀內(nèi)進(jìn)行室溫干燥，得到尿液干粉，立即對盛有尿液干粉的樣 品瓶加蓋密封，得到所述陰性尿液干粉。 所得陰性尿液干粉用ImL純水溶解后形成的克倫特羅陰性動物尿液復(fù)原液中，克 倫特羅的含量小于0. Ing/mL。 當(dāng)需要制備大量的陰性尿液干粉時(shí)，上述方法步驟1)的具體操作如下：將每次排 尿后的新鮮尿液收集，立即進(jìn)行離心處理，收集上清液，隨后將所述上清液于2?6°C下暫 存不超過24小時(shí)；將多次排出的經(jīng)離心凈化后暫存的尿液混合，于-18°C以下的溫度下凍 存；在所凍存的尿液的總量達(dá)到要求后，將所述凍存后的尿液回溫至室溫，震蕩混勻，得到 均勻一致的尿液；最后將所述均勻一致的尿液干燥，得到所述陰性尿液干粉。 上述方法步驟b)中，所述新鮮尿液的來源與步驟1)中新鮮尿液的來源相同，同樣 來源于已知來源并確定從未食用過克倫特羅的動物；所述動物具體可為豬、牛、羊等。 所述尿液的采集時(shí)間與動物的排尿時(shí)間間隔不超過10分鐘，以保證尿液的新鮮 程度。 所述離心處理的條件為：1500 Xg離心5?15分鐘。 所述干燥為在真空濃縮儀中進(jìn)行的室溫干燥；所述干燥的時(shí)間為4-6小時(shí)。 所述干燥的具體操作如下：將所述含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液置于樣品瓶中，將所 述含有尿液的樣品瓶置于真空濃縮儀內(nèi)進(jìn)行室溫干燥，得到尿液干粉，立即對盛有尿液干 粉的樣品瓶加蓋密封，得到所述陽性尿液干粉。 所得陽性尿液干粉用與濃縮前尿液體積相同的純水溶解后得到的克倫特羅陽性 動物尿液復(fù)原液中，克倫特羅的含量與配置濃度比值介于80-120%。 當(dāng)需要制備大量的陽性尿液干粉時(shí)，上述方法步驟1)的具體操作如下：將每次排 尿后的新鮮尿液收集，立即進(jìn)行離心處理，收集上清液，隨后將所述上清液于2?6°C下暫 存不超過24小時(shí)；將多次排出的經(jīng)離心凈化后暫存的尿液混合，于-18°C以下的溫度下凍 存；在所凍存的尿液的總量達(dá)到要求后，將所述凍存后的尿液回溫至室溫，震蕩混勻，得到 均勻一致的尿液；接著向所述均勻一致的尿液中加入克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品，混勻后得到含克倫 特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液；最后將所述含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液干燥，得到所述陽性尿液干粉。 由上述方法制備得到的克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉也屬于本專利技術(shù)的保護(hù) 范圍。 所述克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉包括獨(dú)立包裝的陰性尿液干粉和陽性尿 液干粉。 本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供所述克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉的用途。 本專利技術(shù)所提供的克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉的用途是將所述動物尿液干 粉用作克倫特羅酶聯(lián)免疫試紙卡和試劑盒使用中的質(zhì)控樣品。 具體使用方法為：分別向所述陰性尿液干粉和陽性尿液干粉中加入與濃縮前尿液 體積相同的純水；充分震蕩，使尿液干粉全部溶解；按照克倫特羅酶聯(lián)免疫試紙卡或試劑 盒的操作步驟分別對所述陰性和陽性樣品進(jìn)行驗(yàn)證檢測，根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果的符合性對試紙卡 或試劑盒產(chǎn)品進(jìn)行現(xiàn)場使用過程中的質(zhì)量控制。 實(shí)驗(yàn)證明，本專利技術(shù)提供的克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉，能夠在常溫下密封 長期保存，克倫特羅能夠長期穩(wěn)定存在，不會發(fā)生降解。并且，在向干粉中加入適量純水后， 干粉溶解形成的溶液與利用新鮮動物尿液配制的克倫特羅酶聯(lián)免疫試紙卡和試劑盒質(zhì)控 樣品在應(yīng)用上無差異，可以替代新鮮動物尿液配制而成的克倫特羅檢測質(zhì)控樣品。本專利技術(shù) 可以方便地用于克倫特羅酶聯(lián)免疫試紙卡和試劑盒現(xiàn)場質(zhì)控，而且生產(chǎn)過程簡單，易于保 存、運(yùn)輸和使用，克服了一般質(zhì)控樣品配制中動物尿液不好保存、運(yùn)輸，需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)室條 件等不足。 【具體實(shí)施方式】 下面通過具體實(shí)施例對本專利技術(shù)進(jìn)行說明，但本專利技術(shù)并不局限于此。 下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法；下述實(shí)施例中所 用的試劑、生物材料等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。 下述實(shí)施例中所采用的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品為德國Dr. Ehrensorfer公司產(chǎn)品，其CAS 號：21898-19-1，純度 >98. 5%。 下述實(shí)施例中所采用的克倫特羅膠體金快速檢測試紙卡（豬尿）為北京勤邦生物 技術(shù)有限公司產(chǎn)品，產(chǎn)品編號：B001，檢測限：3ng/ml(ppb)。 下述實(shí)施例中所采用的克倫特羅ELISA檢測試劑盒為北京勤邦生物技術(shù)有限公 司產(chǎn)品，產(chǎn)品編號：A041，檢測限：0? lng/ml (ppb)。 實(shí)施例1、克倫特羅檢測質(zhì)控用陰性豬尿液干粉的制備 本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種制備克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉的方法，包括下述a)和b)：所述a)為陰性樣品的制備，具體步驟如下：采集新鮮尿液，離心處理，收集上清液，得到離心凈化后的尿液；接著將所述離心凈化后的尿液干燥，得到陰性尿液干粉；所述b)為陽性樣品的制備，具體步驟如下：采集新鮮尿液，離心處理，收集上清液，得到離心凈化后的尿液；接著向所述離心凈化后的尿液中加入克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品，混勻，得到含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液；最后將所述含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液干燥，得到陽性尿液干粉。
【技術(shù)特征摘要】
1. 一種制備克倫特羅檢測質(zhì)控用動物尿液干粉的方法，包括下述a)和b): 所述a)為陰性樣品的制備，具體步驟如下：采集新鮮尿液，離心處理，收集上清液，得 到離心凈化后的尿液；接著將所述離心凈化后的尿液干燥，得到陰性尿液干粉； 所述b)為陽性樣品的制備，具體步驟如下：采集新鮮尿液，離心處理，收集上清液，得 到離心凈化后的尿液；接著向所述離心凈化后的尿液中加入克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品，混勻，得到含 克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液；最后將所述含克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品的尿液干燥，得到陽性尿液干粉。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟a)中，所述新鮮尿液來源于已知來 源并確定從未食用過克倫特羅的動物； 所述動物為豬、牛或羊； 所述尿液的采集時(shí)間與動物的排尿時(shí)間間隔不超過10分鐘； 所述離心處理的條件為：1500 Xg離心5?15分鐘； 所述干燥為...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：蘇曉鷗，王瑞國，程劼，王培龍，樊霞，李陽，張維，
申請(專利權(quán))人：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：北京;11
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。