一種檢測農、獸藥殘留的裝置制造方法及圖紙

本發明專利技術公開了一種檢測農、獸藥殘留的裝置，包括上樣系統和量熱免疫傳感器，上樣系統包括加樣閥，加樣閥通過管道分別與樣品罐，底物罐，載液罐，再生液罐連接；量熱免疫傳感器包括HPLC泵，HPLC泵通過管道分別與第一、第二熱調節器的上端口連接，第一、第二熱調節器的下端口分別通過管道與第一、第二ProteinG瓊脂糖凝膠柱14的下端口連接，第一、第二ProteinG瓊脂糖凝膠柱的上端口分別通過管道與廢液罐11連接，N2000色譜數據工作站10與惠斯通電橋7電連接，惠斯通電橋分別與第一、第二ProteinG瓊脂糖凝膠柱電連接，加樣閥4與HPLC泵6通過管道連接。本發明專利技術的裝置高特異性快速檢測農、獸藥殘留。

【技術實現步驟摘要】
一種檢測農、獸藥殘留的裝置
本專利技術屬于生物
，涉及一種檢測農、獸藥殘留的裝置。
技術介紹
量熱生物傳感器探索的是生物反應中最基本的特性一吸熱或產熱。幾乎所有的物理、化學、生物的反應，尤其在酶催化反應中都涉及熱量交換。尤其在酶催化反應中，通常伴有20?IOOkJ moF1的熱量變化。1962年Clark和Lyons首先提出酶電極概念并對酶催化反應進行量熱研究。上世紀70年代人們制備出了如今我們稱為量熱生物傳感器的裝置。其共性之一就是使用固定化酶，一方面降低成本另一方面提高了反應效能。量熱計的研究著力于量熱裝置的研發，主要檢測經酶催化底物后流動相溫度的變化。與其它分析方法相比較，固定化酶與量熱技術的結合具有諸多優勢，諸如:可對大多數生物樣品進行分析、固定化酶可重復使用、檢測不受樣品光學或離子環境特性的干擾，可實現連續流動相下檢測、檢測過程簡便、可引入參比部件等。酶量熱傳感器最先用于對葡萄糖及尿素的檢測，然后逐漸應用于臨床醫學、環境監測、食品衛生、工業過程監測等領域。由于檢測熱信號反應總的放熱量，因而缺乏檢測特異性。對于由于載液與樣品在PH及離子強度上的不匹配造成的非特異性信號響應可以通過對樣品稀釋加以克服，也可以在檢測裝置中放入惰性的參比柱進行信號差異性檢測以去除非特異性信號。量熱檢測方法中由于上樣量太少不足以產生放熱信號的穩定態而是以峰的形式出現。在一定底物濃度下峰高正比于放熱量。峰面積及峰上升斜率與底物濃度呈線性關系。量熱酶聯免疫吸附檢測(TELISA)是基于酶聯免疫吸附檢測方法基本原理并結合量熱儀檢測標記酶催化特異性底物產生的熱信號的檢測方法。專利CN103134930A公開了一種“用于農藥阿特拉津的量熱酶聯免疫吸附(TELISA)檢測方法”，其固相載體采用表面氨基化修飾的可控多孔玻璃珠(CPG)。在應用這個儀器檢測過程中需要使用戊二醛等化學試劑將抗體與固相載體偶聯，偶聯效果的不同，直接影響了檢測的重復性。
技術實現思路
本專利技術的目的是克服現有技術的不足，提供一種檢測農、獸藥殘留的裝置。本專利技術的技術方案概述如下:—種檢測農、獸藥殘留的裝置，包括上樣系統和量熱免疫傳感器，上樣系統包括加樣閥4，加樣閥4通過管道分別與樣品罐1，底物罐2，載液罐3，再生液罐5連接；量熱免疫傳感器包括HPLC泵6，HPLC泵6通過管道分別與第一熱調節器8的上端口和第二熱調節器13的上端口連接，第一熱調節器8的下端口通過管道與第一 ProteinG瓊脂糖凝膠柱9下端口連接，第二熱調節器13的下端口通過管道與第二 ProteinG瓊脂糖凝膠柱14的下端口連接,第一 ProteinG瓊脂糖凝膠反應柱9上端口和第二 ProteinG瓊脂糖凝膠柱的上端口 14分別通過管道與廢液罐11連接，N2000色譜數據工作站10與惠斯通電橋7電連接，惠斯通電橋分別與第一 ProteinG瓊脂糖凝膠柱和第二 ProteinG瓊脂糖凝膠柱電連接,所述加樣閥4與HPLC泵6通過管道連接。本專利技術的優點:本專利技術的一種檢測農、獸藥殘留的裝置中的Protein G瓊脂糖凝膠能對小鼠源IgG抗體Fe片段特異結合，省去現有技術的化學偶聯過程，避免CPG玻璃珠與抗體偶聯效果不同對檢測結果的影響，進一步增強了方法通用性的優勢。本專利技術可以實現不同目標物的檢測。專利技術的裝置可以高特異性快速檢測農、獸藥殘留，為其在食品安全檢測領域的進一步應用奠定基礎。【附圖說明】圖1本專利技術一種檢測農、獸藥殘留的裝置示意圖。圖2檢測阿特拉津(ATR)原理示意圖。圖3羧基化阿特拉津_β -內酰胺酶質譜圖。圖4本專利技術檢測阿特拉津(ATR)標準曲線。【具體實施方式】下面結合附圖和具體實施例對本專利技術作進一步的說明。一種檢測農、獸藥殘留的裝置，包括上樣系統和量熱免疫傳感器，上樣系統包括加樣閥4，加樣閥4通過管道分別與樣品罐1，底物罐2，載液罐3，再生液罐5連接；量熱免疫傳感器包括HPLC泵6，HPLC泵6通過管道分別與第一熱調節器8的上端口和第二熱調節器13的上端口連接，第一熱調節器8的下端口通過管道與第一 ProteinG瓊脂糖凝膠柱9下端口連接，第二熱調節器13的下端口通過管道與第二 ProteinG瓊脂糖凝膠柱14的下端口連接,第一 ProteinG瓊脂糖凝膠反應柱9上端口和第二 ProteinG瓊脂糖凝膠柱的上端口 14分別通過管道與廢液罐11連接，Ν2000色譜數據工作站10與惠斯通電橋7電連接，惠斯通電橋分別與第一 ProteinG瓊脂糖凝膠柱和第二 ProteinG瓊脂糖凝膠柱電連接,所述加樣閥4與HPLC泵6通過管道連接。本專利技術一種檢測農、獸藥殘留的裝置，包括上樣系統和量熱免疫傳感器，經上樣系統通入載液并平衡流動體系后，使用經過優化配比的β_內酰胺酶與羧基化抗原偶聯物、抗體復合物，以及待測樣品(樣品罐)經孵育后，由上樣系統進入量熱免疫傳感器的ProteinG瓊脂糖凝膠上的識別位點，接下來通過上樣系統加入氨芐西林溶液(底物罐)經酶催化產生熱信號，并被惠斯通電橋收集、轉化后在Ν2000色譜數據工作站(酶量熱工作站)上，以峰信號顯示并記錄。檢測完成后使用再生液(再生液罐)對量熱免疫傳感器中管路進行沖洗，對ProteinG瓊脂糖凝膠進行再生。在檢測過程中產生的廢液進入廢液罐。最終根據數據繪制檢測標準曲線。實施例1以農藥(除草劑)阿特拉津為目標物采用本專利技術的裝置進行檢測:I實驗方法1.1 β -內酰胺酶與羧基化阿特拉津分子的偶聯(I)將9.2mg羧基化阿特拉津溶于200 μ L N, N- 二甲基亞酰胺(DMF)中，震蕩使其完全溶解；(2)將6.0mg N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)加入步驟⑴的混合溶液中，溶解完全后攪拌下快速加入10.2mgl-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC-HCL)，室溫避光攪拌反應8小時，得到溶液A ；(3)稱取催化活性為IOku的內酰胺酶溶解溶于雙蒸水6.5mL中，制備溶液B，4°C保存；(4)室溫下，500轉/分鐘攪拌下，將溶液A滴加到溶液B中，滴加完畢后置于4°C繼續緩慢攪拌12小時；(5)將步驟(4)產物用0.02mol/L、pH = 7.0磷酸鹽緩沖液4°C透析I天，期間換透析液4次，得羧基化阿特拉津-β -內酰胺酶，分裝于EP管中，_20°C保存備用。對所得產物進行質譜鑒定(MALD1-T0F-MS)，結果圖3。由圖3結果可知，β -內酰胺酶的分子量約為28678，如圖3Β。偶聯后羧基化阿特拉津-β-內酰胺酶分子量約為31783，如圖3Α。羧基化阿特拉津分子量約為283.38。因此可知產物中蛋白-小分子摩爾比約為11:1，證明偶聯成功。1.2采用本專利技術的一種檢測農、獸藥殘留的裝置檢測阿特拉津:(I)將經0.22 μ m針式濾器過濾及超聲除氣后的含質量濃度為2%的二甲基亞砜的0.02mol ?ΛρΗ = 7.0的PBS載液貯存于載液罐3中，通過加樣閥4，以流速400 μ LmirT1作為載液平衡流動體系通過量熱免疫傳感器，獲得穩定的基線信號；(2)以 0.02mol L—1，pH = 7.0 的 PBS 為溶劑配制梯度濃度為 OngmL'0.lQngmL、0.39ng mL \ 0.78ng mL \ 1.56ng本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種檢測農、獸藥殘留的裝置，包括上樣系統和量熱免疫傳感器，上樣系統包括加樣閥(4)，加樣閥(4)通過管道分別與樣品罐(1)，底物罐(2)，載液罐(3)，再生液罐(5)連接；量熱免疫傳感器包括HPLC泵(6)，HPLC泵(6)通過管道分別與第一熱調節器(8)的上端口和第二熱調節器(13)的上端口連接，第一熱調節器(8)的下端口通過管道與第一ProteinG瓊脂糖凝膠柱(9)下端口連接，第二熱調節器(13)的下端口通過管道與第二ProteinG瓊脂糖凝膠柱(14)的下端口連接，第一ProteinG瓊脂糖凝膠反應柱(9)上端口和第二ProteinG瓊脂糖凝膠柱的上端口(14)分別通過管道與廢液罐(11)連接，N2000色譜數據工作站(10)與惠斯通電橋(7)電連接，惠斯通電橋分別與第一ProteinG瓊脂糖凝膠柱和第二ProteinG瓊脂糖凝膠柱電連接，所述加樣閥(4)與HPLC泵(6)通過管道連接。

【技術特征摘要】
1.一種檢測農、獸藥殘留的裝置，包括上樣系統和量熱免疫傳感器，上樣系統包括加樣閥(4)，加樣閥(4)通過管道分別與樣品罐(1)，底物罐(2)，載液罐(3)，再生液罐(5)連接；量熱免疫傳感器包括HPLC泵出)，HPLC泵(6)通過管道分別與第一熱調節器(8)的上端口和第二熱調節器(13)的上端口連接，第一熱調節器(8)的下端口通過管道與第一 ProteinG瓊脂糖凝膠柱(9)下端口連接，第二熱調節器(13...

【專利技術屬性】
技術研發人員：寧保安，孫思明，高志賢，彭媛，白家磊，郄志偉，
申請(專利權)人：中國人民解放軍軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所，
類型：發明
國別省市：天津;12