一種用于大規模、高通量基因分型的貝類DNA快速提取方法技術

本發明專利技術提供了一種用于大規模、高通量基因分型的貝類DNA快速提取方法，首先選取少量鰓絲組織作為取樣組織，然后進行蛋白消化裂解細胞釋放DNA，僅需離心吸取上清棄除沉淀，上清溶液稀釋后即可用于后續分子標記分型工作，省略了常規DNA提取方法的蛋白抽提和DNA沉淀等過程，其整個流程可在一小時內完成，具有操作快速簡單、提取的DNA質量高且保質期長等優點，可用于SNP等常見分子標記的準確分型；而且僅取用貝類的一兩根鰓絲，對貝類生存、生長、發育等影響很小，適用于對大量樣本或是珍貴樣本的研究工作，是一種優良的適用于貝類的快速有效非致死性的DNA的提取方法。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】
一種用于大規模、高通量基因分型的貝類DNA快速提取方法，其特征在于它包括以下步驟：?（1）、剪取貝類的鰓絲組織為取樣組織；（2）、向剪取的鰓絲組織中加入細胞裂解液，使鰓絲懸浮于所述細胞裂解液中，每毫克鰓絲組織加入100ul裂解液，所述細胞裂解液的組分為：100?mM?NaCl、10?mM?Tris?HCl和1?mM?EDTA，所述細胞裂解液的pH?為8.0；再向所述細胞裂解液中添加蛋白酶K和SDS，使蛋白酶K濃度為0.3?mg/mL，所述SDS的質量體積比為0.50%；?（3）、將步驟（2）得到的混合液置于37?56℃水浴中消化至裂解液變澄清，消化過程中顛倒混勻使細胞充分裂解；（4）、將步驟（3）得到的混合液置于沸水浴中煮沸以滅活所述蛋白酶K；（5）、待步驟（4）的溶液冷卻后，離心，吸取上清液即DNA溶液，將DNA溶液稀釋后即可用于基因分型工作。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：包振民，毛俊霞，王師，苗艷，張玲玲，胡曉麗，付曉騰，
申請(專利權)人：中國海洋大學，
類型：發明
國別省市：