用于控制外寄生物感染的疫苗組合物制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及核糖體蛋白P0的肽在制備疫苗組合物中的用途，所述疫苗組合物用于控制外寄生物感染和因此其相關(guān)病原體的傳播。所述肽位于蛋白P0的氨基酸267和301之間，并且可以通過重組方法或借助化學(xué)合成來獲得。可以將所述肽融合至載體蛋白或肽，或者融合至免疫增強劑并包含在油性制劑中。包含所述肽的疫苗制劑賦予針對蜱和稱為“海虱”的外寄生物的保護，而在宿主生物中不出現(xiàn)自身免疫的產(chǎn)生。在所述蜱中，可以提及微小扇頭蜱（Rhipicephalus?microplus）、血紅扇頭蜱（Rhipicephalus?sanguineus）和肩突硬蜱（Ixodes?scapularis）這些物種，和在所述海虱中，包括魚虱屬（Caligus）和瘡痂魚虱屬（Lepeophtheirus）的那些。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】用于控制外寄生物感染的疫苗組合物專利
本專利技術(shù)屬于獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別地關(guān)于外寄生物感染和其相關(guān)病原體的傳播的控制。所述控制通過在疫苗組合物的制備中使用核糖體蛋白PO的肽來實現(xiàn)。包含所述肽的疫苗制劑賦予保護，而在宿主生物中不出現(xiàn)自身免疫的產(chǎn)生。現(xiàn)有技術(shù)陸生吸血性外寄生物例如蚊子、跳蚤和蜱是傳播引起疾病的傳染因子的媒介。這些疾病中的一些直接影響人類和/或其情感寄托動物，而其他的則在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中引起巨大的經(jīng)濟損失。由外寄生物傳播的疾病的例子為瘧疾、利什曼病、登革熱、埃利希菌病和萊姆病。蜱被認為是第二的對于人類的疾病傳播者，僅次于蚊子(Parola P.和Raoult D.,Clin.Microbiol.1nfect.2001，7:80-83)。由蜱傳播的血寄生蟲感染在畜牧業(yè)中引起數(shù)十億美元級別的年損失，其主要影響熱帶和亞熱帶地區(qū)中的牛生產(chǎn)。在這方面最重要的疾病之中，包括無形體病、巴貝蟲病、萊姆病(由布氏疏螺旋體(BorreIia burdogferi )引起)和所謂的東海岸熱(由小泰來蟲(Theileria parva)引起)。稱為海風的外寄生物(燒足綱(Copepoda),魚風科(Caligidae))是最近30年在鮭魚業(yè)中最廣泛分布的海洋病原體，其在最近15年擴展至其他養(yǎng)殖魚類物種和鮭科的野生群體(Pike，A.W.和 Wadsworth, S.L.，Advances in Parasitology2000, 44:233-337 ；Ragias, V.等人,Aquaculture2004, 242:727-733)。主要的經(jīng)濟損失由魚風屬(Caligus)和瘡痂魚風屬(Lepeophtheirus)的生物造成。所謂的海風可以在其宿主中引起生理學(xué)變化，包括形成應(yīng)激反應(yīng)、免疫功能下降、無法進行滲透調(diào)節(jié)和死亡，如果不對感染進行治療(Johnson, S.C.等人，Zool Studies2004, 43:8-19)。還存在有一些證據(jù)暗示了，海風可能是用于向魚類傳播由病毒和細菌產(chǎn)生的感染的媒介(Barker, E.D.等人，ParasitologyResearch2009, 105:1173-1177)。已使用了各種各樣的化學(xué)試劑和藥物來控制由蜱和海虱產(chǎn)生的感染。化學(xué)殺蟲劑例如脒、有機磷酸鹽、過氧化氫等的使用目前是用于控制這些外寄生物的基本措施。然而，這些物質(zhì)的密集使用的缺點在于化學(xué)殘留污染食品(魚、肉和奶)、損害環(huán)境和外寄生物形成抗性(Shahein Y.E., Vet.1mmunol, and Immunopatho1.2008, 121:281-289 ；Denholm, 1.Pest Manag Sci2002, 58:528-536 ；Bravo, S.等人，Aquaculture2008, 282:7-12 ;Lees 等A , J.Fish Dis.2008,31:947-951)。從其效力、環(huán)境安全和經(jīng)濟可持續(xù)性的觀點來看，疫苗接種被認為是用于控制外寄生物感染的有希望的備選方案。已經(jīng)用基于重組的蛋白Bm86的針對微小扇頭蜱(Rhipicephalus microplus)的商業(yè)疫苗(TickGARD, Hoechst Animal Health, Australia ；和GAVAC,由Heber Biotec, Cuba進行銷售)證明了為此目的使用通過重組脫氧核糖核酸(DNA)技術(shù)產(chǎn)生的抗原的可行性。 重組的蛋白Bm86在現(xiàn)場研究中具有有效的結(jié)果，當在綜合防治計劃中包括其應(yīng)用時。在海虱的情況下，在使用蛋白質(zhì)作為疫苗候選物方面存在有一些進展，正如Caligus rogercresseyi的akirin-2 (其被命名為my32)的情況，并且進行了攻擊試驗，其中得到有希望的結(jié)果(專利申請W02008/145074 “Secuenciasdeacidos nucleicos y aminoacidos, y vacuna para el control de infestaciones porectoparasitos en peces，，)。對于增加這些疫苗的效力來說，新的保護性抗原的鑒定是限制性步驟。雖然近來已鑒定了新的蜱蛋白質(zhì)并且已提出它們作為可能的保護性分子，但僅對其中有限數(shù)目的蛋白質(zhì)作為通過重組方法產(chǎn)生的抗原在疫苗接種試驗中進行了評價。在海虱(其是以食宿主的粘液、皮膚和血液為生并因此與宿主的免疫系統(tǒng)僅具有有限接觸的外寄生物(Boxaspen, K.1CES Journal of Marine Science2006, 63:1304-1316))的情況下，作為疫苗候選物，調(diào)查了在粘附和進食位點處抑制宿主的免疫應(yīng)答的寄生蟲免疫調(diào)節(jié)蛋白(ffikel, S.K.等人，"Arthropod modulation of host immune responses", The Immunologyof Host-Ectoparasitic Arthropod Relationships.編輯:Wikel, S.K.，CAB Int., 1996,第107-130頁)。還研究了其他與卵黃原蛋白相似的分子和用于粘附至宿主的蛋白(Johnson, S.C.等人，Zool Studies2004, 43:8-19 ；Boxaspen, K.1CES Journal of MarineScience2006，63:1304-1316)，但是由于對于鮭魚被海虱感染的機制和病理學(xué)知之甚少，鑒定出用于預(yù)防和治療該感染的靶標還未獲成功。無論如何，通過在免疫接種試驗中評價不同疫苗候選物來進行的調(diào)查的結(jié)果已表明，參與不同生理過程的各種分子的聯(lián)合使用是用于控制外寄生物感染的可行方法。真核生物的核糖體由獨個的核糖體核糖核酸(rRNA)分子和超過80種蛋白質(zhì)(其組織成大亞基和小亞基)形成。大多數(shù)核糖體蛋白是堿性的(等電點(PD >8.5)，但是也存在有一組酸性蛋白質(zhì)(pl=3.0-5.0)，其在核糖體的大亞基中形成與莖類似的結(jié)構(gòu)。由于其能夠被磷酸化，因而這些酸性蛋白質(zhì)被命名為蛋白P (PO、Pl和P2)，其在核糖體的翻譯活性的調(diào)節(jié)中起著基本作用(Wojda 1.等人，Acta Bioch.Pol.2002，49:947-957)。蛋白P含有大約17個氨基酸的保守的C-末端區(qū)，其最后六個殘基是高度保守的，這是它們之間以及與其他物種的蛋白P的交叉免疫 反應(yīng)性的基礎(chǔ)。蛋白PO對于60S核糖體亞基的裝配來說是極其重要的，其中PO與P1、P2、28S rRNA和因子eEF2直接結(jié)合。其的缺乏會導(dǎo)致產(chǎn)生缺少60S亞基的核糖體，后者對于蛋白質(zhì)合成來說是無活性的，從而導(dǎo)致細胞死亡。蛋白P是高度免疫原性的，并且由于其與自身免疫疾病和與癌發(fā)生的關(guān)聯(lián)，已在人中廣泛地進行了研究。核糖體蛋白的這些應(yīng)用已經(jīng)通過其各自作者的專利而得到了保護。特別地，核糖體蛋白PO是針對各種原生動物和細菌的有希望的疫苗候選物。作為重組抗原(要么使用完整的蛋白質(zhì)，要么使用由最后11-16個氨基酸組成的C-末端區(qū))，或者通過針對鼠弓形體(Toxoplasma gondii)、犬新孢子蟲(Neospora caninum) (ZhangH.等人，Mol.Bioc本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：A·羅德里格斯馬龍，E·費爾南德斯迪亞斯，M·P·埃斯特拉達加西亞，Y·卡普里奧岡薩雷斯，
申請(專利權(quán))人：遺傳工程與生物技術(shù)中心，
類型：
國別省市：