一種超低分肝素鈉工藝研究制造技術

本發明專利技術公開了一種超低分肝素鈉工藝研究，技術方案是采用分子量8000道爾頓以上的肝素鈉精品提純后，對分子量2000-3000道爾頓、效價10-40U/mg的超低分子肝素鈉通過再次回收、精制得到符合藥用安全的原料藥，在歐洲及美國沒有此產品上市，因此，在醫藥領域屬一類新藥。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及生物
，具體地說涉及從低效價肝素鈉中將蛋白去除，得到超低分子肝素鈉。
技術介紹
肝素鈉是從豬小腸粘膜中提取的一種生化藥品，是手術中不可替代的、挽救生命的、市場不能斷檔的首選藥物。自二十世紀四十年代用于臨床以來，其應用范圍不斷擴大，尤其是二十世紀九十年代以來，該產品臨床主要用于防止血栓形成，治療心血管病、血液病、尿毒癥等。西方國家已開始研究肝素鈉對癌癥的防治作用，其新用途不斷增加，而超低分子肝素鈉是治療血栓的主要藥物，目前世界上還未上市，我公司進行了工藝攻關，已成功解決了治療的目的，并在臨床成功治療了上百例。
技術實現思路
本專利技術提供了一種超低分子肝素鈉工藝研究的方法，是為了攻克國內外治療血栓的疑難雜癥，通過產品的逐級沉淀分離雜質而得到的。在專利技術的技術方案中，包括如下步驟:一、提取1、粗品溶解:開啟水閥，加入一定量飲用水，再將肝素鈉粗品(效價在10-20usp/mg)加入到反應罐中，邊攪邊加，按原 料與飲用水1: ￠-7)比例溶解，攪拌5-10小時至全部溶解；2、酶解:將上一步溶解液，先用鹽酸溶液調PH7.0-8.0，升溫至50_55°C之間時加入胃蛋白酶5-10g/億單位，再加入50g/億單位胰酶，50-55°C保溫4小時；3、急升溫:將上一步酶解液在I小時內升溫至85-90°C，靜止10-30分鐘，開攪拌，通入循環水降溫，待溫度降至50-55°C時，用2-6mol/L氫氧化鈉溶液調PH10.0-12.0，靜止分層20-30小時；4、底部沉淀的雜質離心:虹吸上清，用40-100目濾袋過濾，過濾后的溶液分為上清液和下層沉淀，留上清液待沉淀，下層沉淀放離心機離心，離心后留上層離心液；二、精制1、第一次沉淀:待上述上清液和離心液溫度降至20-30°C，加入20_30g/L氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸將濾液調PH10.0-12.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時;2、第一次氧化:棄去上層廢乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0-12.0，然后加入體積10%雙氧水，氧化15小時；3、第二次沉淀:溶液加入20_30g/L氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸溶液調將溶液PH6.0-7.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；4、第二次氧化:棄去上層廢乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0-12.0，然后加入體積10%雙氧水，氧化15小時；5、第三次沉淀:溶液加入20_30g/L氯化鈉，用鹽酸溶液將溶液調PH10.0-12.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到45 50%，沉淀15小時；6、第三次氧化:棄去上層廢乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0-12.0，然后加入體積10%雙氧水，氧化15小時；7、第四次沉淀:溶液加入20_30g/L氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸溶液調將溶液PH6.0-7.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；8、第四次氧化:棄去上層乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0-12.0，然后加入體積10雙氧水，氧化15小時；9、溶液加入20_30g/L氯化鈉，用鹽酸溶液將溶液調PH10.0-12.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；10、將沉淀物用純化水按2-5L/億單位溶解后，用孔徑0.22-0.3微米濾膜板框機微濾，用乙醇沉淀，使乙醇濃度達75-80%，再加入23-26%的氯化鈉溶液，每I升溶液加6-10ml氯化鈉溶液，靜止沉淀10-12小時；11、將上層乙醇棄去，加入無水乙醇脫水，邊攪邊加，使乙醇濃度為97-99%，靜止24-30小時，棄去上層乙醇，將不銹鋼砂芯棒放在產品中，用真空泵通過管道和過濾瓶把剩余乙醇抽干，待干燥；10、將抽干的產品均勻放置在不銹鋼盤中，放在真空干燥箱中抽真空，用循環水加溫，溫度35-60。。，烘干70-80小時；11、包裝:將產品取出，稱重，使每包裝袋5kg，用封口機封口，放在鋁桶中待驗。根據權利要求2所述的一種超低分肝素鈉工藝研究，其特征在于:第四次沉淀后的溶液進行QA取樣化驗，測吸光度:260nm < 0.2 ；400nm < 0.03 ;分子量2000-3000道爾頓，若不合格，繼續重復上面過程，若合格移交下一工序。具體實施例方式下面結合具體實施例對本專利技術作進一步說明。實施例1 一、提取1、粗品溶解:開啟水閥，加入一定量飲用水，再將肝素鈉粗品IOOKg(效價在10usp/mg)加入到反應罐中，邊攪邊加入600L飲用水溶解，攪拌10小時；2、酶解:將上一步溶解液，用鹽酸溶液調PH8.0，升溫至53°C時加入胃蛋白酶100g，再加入500g胰酶，50°C保溫4小時；3、急升溫:將上一步酶解液升溫至90°C，靜止30分鐘，開攪拌，通入循環水降溫，待溫度降至55°C時，用6mol/L氫氧化鈉溶液調PH10.0，靜止分層30小時；4、底部沉淀的雜質離心:虹吸上清，用40-100目濾袋過濾，過濾后的溶液分為上清液和下層沉淀，留上清液待沉淀，下層沉淀放離心機離心，離心后留上層離心液；二、精制1、第一次沉淀:待上述上清液和離心液溫度降至30°C，加入ISOOOg氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸將濾液調PH12.0，邊攪邊加濃度為95%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在達到50%，沉淀15小時；2、第一次氧化:棄去上層廢乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液調PHl2.0,然后加入30L雙氧水,氧化15小時；3、第二次沉淀:溶液加入9000g氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸溶液調將溶液PH6.0-7.0，邊 攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；4、第二次氧化:棄去上層廢乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH12.0，然后加入30L雙氧水，氧化15小時；5、第三次沉淀:溶液加入9000g氯化鈉，用鹽酸溶液將溶液調PH10.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；6、第三次氧化:棄去上層廢乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH12.0，然后加入30L雙氧水，氧化15小時；7、第四次沉淀:溶液加入9000g/L氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸溶液調將溶液PH6.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；8、第四次氧化:棄去上層乙醇，下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0,然后加入30L雙氧水,氧化15小時；9、溶液加入9000g/L氯化鈉，用鹽酸溶液將溶液調PH10.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時；10、將沉淀物用純化水50L溶解后，用孔徑0.22-0.3微米濾膜板框機微濾，用乙醇沉淀，使乙醇濃度達80%，再加入26%的氯化鈉溶液500ml，靜止沉本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種超低分肝素鈉工藝研究，其特征在于：采用多次氧化和沉淀逐級分離，得到分子量在2000?3000道爾頓，效價在10?40U/mg的超低分子肝素鈉。

【技術特征摘要】
1.一種超低分肝素鈉工藝研究，其特征在于:采用多次氧化和沉淀逐級分離，得到分子量在2000-3000道爾頓，效價在10-40U/mg的超低分子肝素鈉。2.根據權利要求1所述的一種超低分肝素鈉工藝研究，其特征包括如下步驟: 一、提取 (1)、粗品溶解: 開啟水閥，加入一定量飲用水，再將回收的肝素鈉粗品(效價在10-20usp/mg)加入到反應罐中，邊攪邊加，按原料與飲用水1: ￠-7)比例溶解，攪拌5-10小時至全部溶解； (2)、酶解: 將上一步溶解液，先用鹽酸溶液調PH7.0-8.0，升溫至50-55°C之間時加入胃蛋白酶5-10g/億單位，再加入50g/億單位胰酶，50-55°C保溫4小時； (3)、急升溫: 將上一步酶解液在I小時內升溫至85-90°C，靜止10-30分鐘，開攪拌，通入循環水降溫，待溫度降至50-55°C時，用2-6mol/L氫氧化鈉溶液調PH10.0-12.0，靜止分層20-30小時； (4)、底部沉淀的雜質離心: 虹吸上清，用40-100目濾袋過濾，過濾后的溶液分為上清液和下層沉淀，留上清液待沉淀，下層沉淀放離 心機離心，離心后留上層離心液； 二、精制 (1)、第一次沉淀: 待上述上清液和離心液溫度降至20-30°C，加入20-30g/L氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸將濾液調PH10.0-12.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時; (2)、第一次氧化:棄去上層廢乙醇,下層沉淀物用純化水溶解,用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0-12.0，然后加入體積10%雙氧水，氧化15小時； (3)、第二次沉淀:溶液加入20-30g/L氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸溶液調將溶液PH6.0-7.0，邊攪邊加濃度為95 97%的乙醇溶液，使得乙醇的濃度在20°C時達到50%，沉淀15小時； (4)、第二次氧化:棄去上層廢乙醇,下層沉淀物用純化水溶解,用氫氧化鈉溶液將溶液調PH10.0-12.0，然后加入體積10%雙氧水，氧化15小...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉乃山，遲培升，夏襯來，陸玉梅，
申請(專利權)人：青島九龍生物醫藥有限公司，
類型：發明
國別省市：