來自金黃色葡萄球菌的多肽和使用方法技術

本發明專利技術提供可從葡萄球菌屬物種分離出來的分離的多肽。本發明專利技術還提供包括一種或多種該多肽的組合物，以及所述多肽的制備方法和使用方法。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及。本申請要求享受于2005年2月14日提交的美國臨時申請序列號60/652,843的權益，其內容全部引入本文作為參考。
技術介紹
革蘭氏陽性細菌是顯著多樣化的一類生物，可導致人類和動物多種疾病。一些病原體被公認對人類和/或動物健康是重要的，包括屬于棒狀桿菌科、腸球菌科、微球菌科、分支桿菌科、諾卡菌科和消化球菌科家族的細菌，包括這樣的細菌種類:放線菌屬物種、雙岐桿菌屬物種、棒狀桿菌屬物種、腸球菌屬物種、丹毒絲菌屬物種、真細菌屬物種、皮球菌屬屬物種、乳酸桿菌屬物種、微球菌屬物種、動彎桿菌屬物種、分枝細菌屬物種、消化鏈球菌屬物種、丙酸桿菌屬物種和葡萄球菌屬物種。這些病原體在許多不同的動某種類中導致多種臨床癥狀。這樣感染的治療在歷史上是攻擊革蘭氏陽性生物體共同結構和功能的抗生素。但是，許多更加普遍存在的革蘭氏陽性生物體發展了對幾類抗生素的抗性，使感染的治療困難。對人類和食物生產動物廣泛使用抗生素治療細菌疾病，可能是許多對抗生素有抗性的革蘭氏陽性生物體菌株種類增生的主要原因。因此，對發現不同的預防或消除動物和人類革蘭氏陽性生物體感染的治療方法有巨大的需求。在農業動物中的葡萄球菌感染在農業產業中許多重要的疾病是革蘭氏陽性生物體導致的。革蘭氏陽性細菌感染導致的臨床病癥實例包括乳房炎、敗血病、肺炎、骨髓炎、腦膜腦炎、淋巴管炎、皮炎、生殖道感染、子宮炎、圍產期疾病、垂體膿腫、關節炎、粘液囊炎、睪丸炎、膀胱炎和腎盂腎炎、干酪性壞死淋巴腺炎、肺結核，潰瘍性淋巴管炎、丹毒、蹄葉炎、tyzzer疾病、破傷風、波特淋菌中毒、腸炎、惡性腫脹、羊炭疽、桿菌性血紅蛋白尿、腸原性毒血癥。葡萄球菌屬物種特別能夠感染許多不同種類的農業動物，并能導致大量經濟損失。例如，美國牛奶產業估計每頭奶牛每年由于乳房炎損失約185美元，乳房炎經常是金黃色葡萄球菌導致的疾病。因為在美國有9百50萬頭產奶奶牛，乳房炎每年的代價大約為約18億美元。這大約是農場牛奶銷售額總價值的10%，這個損失的三分之二是由于減少了亞臨床感染奶牛的牛奶產量而引起的。其它損失是由于棄去異常牛奶和用抗生素治療的奶牛產奶受到抑制所致，感染奶牛被提早更換的費用，精選奶牛減少銷售價值，藥物和獸醫服務費用，和增加的勞動力費用。除了在牛奶產業盛行以外，革蘭氏陽性球菌導致的乳房炎在山羊和綿羊中也常見。金黃色葡萄球菌導致的另外的動物疾病包括馬的葡萄狀菌病，家禽的化膿性滑膜炎和骨髓炎，兔子的鼻塞，豬的流產，和羊羔的扁虱膿毒癥。葡萄球菌的其它種類是犬(S.1ntermedius)和豬(S.hycius)的主要皮膚病原體。在家禽種類中，葡萄球菌病原體導致心內膜炎和敗血病。人類葡萄球菌感染葡萄球菌屬也是人類的病原體，導致各種各樣的感染。種類金黃色葡萄球菌是人類粘膜和皮膚的常見建群者，是能夠導致多種人類感染的條件性病原體。例如，金黃色葡萄球菌是幾種皮膚感染的病因性媒介，包括膿皰病、癤病、蜂窩織炎(cellulitis)、和燙傷皮膚綜合征以及潛在致命的手術后傷口感染。此外，免疫減弱的個體在醫院環境下暴露于金黃色葡萄球菌可導致器官感染例如肺炎、尿路感染、骨髓炎、關節炎、菌血癥和心內膜炎。金黃色葡萄球菌還是中毒癥、最著名的中毒休克綜合征和食物中毒的病因性媒介。葡萄球菌腸毒素B導致的食物中毒是食物致疾病的最常見原因，甚至超過沙門氏菌病、彎曲菌病和利斯特菌病。其它種類的葡萄球菌也導致人類疾病；表皮葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌和人肉孢子蟲通常感染建群醫療器械，腐生葡萄球菌與婦女尿路感染有關。葡萄球菌的毒性機制葡萄球菌感染多種宿主組織，通過以下方式躲避免疫系統:產生幾種類型分泌蛋白、表面表達毒性因子，和代謝系統被設計為在有限資源中生存，和宿主環境相關的活性防御。建群是建立感染的必需的第一個步驟；許多因子包括被膜、脂磷壁質酸和磷壁酸是幫助建群的常見結構的成分。此外，表面蛋白例如葡萄球菌纖維連接蛋白結合蛋白和骨唾液酸糖蛋白結合蛋白特異性與宿 主組織成分結合。葡萄球菌病原體通常產生毒素，并是高度破壞性的；幾種人類疾病包括食物中毒、中毒休克綜合征和表皮脫落皮膚病癥是細胞外分泌毒素蛋白的直接結果。單個分離菌可以編碼20-30個不同的分泌毒素的基因。一些分泌的蛋白產物是超級抗原，能非特異性地與抗原-產生細胞的MHC類II分子結合，同時與T細胞的T-細胞受體結合。結合誘導T細胞信號，導致高水平前炎癥因子的釋放，最終誘導宿主由于不可抵抗的免疫響應的損傷。另一類在表面表達的毒性因子偽裝來自宿主免疫系統的細菌。例如，金黃色葡萄球菌表面-表達的蛋白A通過與宿主抗體Fe成分結合抑制調理素作用和噬菌作用。許多蛋白酶、溶血素(α、β、Υ和δ)、核酸酶、脂肪酶、透明質酸酶和膠原質還幫助細菌從環境細胞提取營養素，保護它們對抗宿主的防御。在葡萄球菌中抗生素抗性⑶C估計在美國每年有接近二百萬人受到醫院源性感染，每年導致90，000例死亡。在這些致命感染中70%是由抗生素-抗性細菌導致的。在微生某種類中抗生素-抗性的增加在皮膚和粘膜建群者例如金黃色葡萄球菌中特別明顯。例如，絕大部分從醫院環境分離的金黃色葡萄球菌是對青霉素抗性的，50%還對半合成青霉素類例如二甲氧基苯青霉素、萘夫西林和苯唑西林有抗性。這些分離菌，被稱作MRSA (二甲氧基苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌)在1970年代第一次被發現，現在在醫院環境中已經明確地確立。最近出現幾例在社區的MRSA感染，其中被感染的個體以前沒有暴露于醫院或健康護理工作者。這個令人擔憂的趨勢通過MRSA分離菌的分離被強化，該分離菌對用于治療MRSA的糖肽萬古霉素敏感性差。按照CDC對萬古霉素抗性的定義非常少的菌株曾表現出對萬古霉素真正的抗性，但是幾種MRSA菌株曾被鑒定為包含對萬古霉素敏感性降低的亞群落，或VISA (萬古霉素中間體金黃色葡萄球菌)。因為將萬古霉素抗性菌株和萬古霉素中間體菌株分離是相對新的進展，只有很少關于它們在醫院和/或社區流行性的數據。偶爾地，對萬古霉素具有完全抗性的和帶有可能從腸球菌某種獲得的抗性質粒的VRSA (萬古霉素抗性金黃色葡萄球菌)也曾從人體中找到。預防和治療葡萄球菌屬感染的策略許多對多種抗生素抗性的革蘭氏陽性病原體的出現激發了旨在發展預防性疫苗以對抗疾病研究的努力。設計施用給患者的疫苗是為了引起免疫系統長期記憶效應，以致在未來時間遭遇到該病原體時，免疫系統能更快速和更有效地清除該病原體。目前，對抗革蘭氏陽性病原體的具有廣泛保護作用的疫苗還沒有得到，所述革蘭氏陽性病原體是與許多嚴重的人類疾病相關的，特別是與葡萄球菌感染的那些疾病相關的。發展預防葡萄球菌感染疫苗的方法包括報導使用微生物表面成分識別粘連基質分子的那些:[MSCRAMMS(Nilsson 等 1998.JClin InvestlOl:2640-9 ；Menzies 等 2002.J InfectDisl85:937-43 ；Fattom 等 2004.Vaccine22:880-7]，表面多糖類(McKenney 等 2000 ；McKenney 等 1999.Science284: 1523-7 ；Maira-Litran 等 2002.1nfect Tmmun70:4433-40 ；Maira-L本文檔來自技高網...

【技術保護點】
組合物，所述組合物包含：分離的全細胞，其包含分子量為88kDa、55kDa、38kDa、37kDa、36kDa、35kDa或33kDa的至少五種多肽，其中分子量通過在十二烷基硫酸鈉－聚丙烯基酰胺凝膠上的電泳測定，其中所述多肽由當在包含鐵螯合劑的介質中培養時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達，并且不由當在不含鐵螯合劑的介質中生長時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達，其中組合物保護動物對抗金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636的激發。

【技術特征摘要】
2005.02.14 US 60/652,8431.組合物，所述組合物包含: 分離的全細胞，其包含分子量為88kDa、55kDa、38kDa、37kDa、36kDa、35kDa或33kDa的至少五種多肽，其中分子量通過在十二烷基硫酸鈉一聚丙烯基酰胺凝膠上的電泳測定，其中所述多肽由當在包含鐵螯合劑的介質中培養時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達，并且不由當在不含鐵螯合劑的介質中生長時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達，其中組合物保護動物對抗金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636的激發。2.權利要求1的組合物，其進一步包含可藥用載體。3.權利要求1的組合物，其中所述分離的全細胞進一步表達具有分子量150kDa、132kDa、120kDa、75kDa、58kDa、50kDa、44kDa、43kDa、41kDa 或 40kDa 的至少一種多肽，所述多肽由當在不含鐵螯合劑的介質中生長時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達。4.組合物在制備用于治療患有由葡萄球菌屬物種導致的感染或有風險患有由葡萄球菌屬物種導致的感染的患者感染的藥物中的用途，其中該組合物包含: 分離的全細胞，其包含分子量為88kDa、55kDa、38kDa、37kDa、36kDa、35kDa或33kDa的至少五種多肽，其中分子量通過在十二烷基硫酸鈉一聚丙烯基酰胺凝膠上的電泳測定，其中所述多肽由當在包含鐵螯合劑的介質中培養時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達，并且不由當在不含鐵螯合劑的介質中生長時的金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636表達，其中組合物保護動物對抗金黃色葡萄球菌ATCC菌株19636的激發。5.權利要求4的用途，其中患者是哺乳動物。6.權利要求5的用...

【專利技術屬性】
技術研發人員：DA艾默里，DE斯特勞布，L溫德林，LL合朗奧爾森，
申請(專利權)人：埃皮托皮克斯有限責任公司，
類型：發明
國別省市：