免疫原性組合物制造技術(shù)

本申請公開了一種包含至少2種不同腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜糖的免疫原性組合物，其中一種或多種所述糖選自由通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第一組，而一種或多種不同的糖選自由直接綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第二組。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種免疫原性組合物，所述免疫原性組合物包含綴合到載體蛋白上的細菌莢膜糖，尤其是那些腦膜炎奈瑟氏球菌(N.meningitidis)糖。其還涉及包含這樣的糖綴合物的疫苗和疫苗試劑盒、制備所述免疫原性組合物和疫苗的方法以及本專利技術(shù)疫苗和免疫原性組合物在治療中的用途。其還涉及使用糖綴合物來抗感染的免疫方法以及糖綴合物在制備藥物方面的用途。腦膜炎奈瑟氏球菌是革蘭氏陰性人感染性病原體，其能夠引起細菌性腦膜炎。以有機體的莢膜多糖為基礎(chǔ)，腦膜炎奈瑟氏球菌的十二個血清群已經(jīng)得到了鑒定(A，B，C，H，I，K，L，29E，W135，X，Y和Z)。血清群A(MenA)是導致撒哈拉以南非洲地區(qū)的流行病的最常見原因。血清群B和C是導致發(fā)展中國家的大多數(shù)情況的原因，剩余的情況是由W135和Y引起的)。包含綴合到載體蛋白上的腦膜炎奈瑟氏球菌糖的免疫原性組合物是本領(lǐng)域已知的；載體蛋白具有將T細胞非依賴型多糖抗原轉(zhuǎn)化為能夠引發(fā)免疫記憶應答的T細胞依賴型抗原的已知作用。例如W002/58737公開了一種含有純化的莢膜多糖的疫苗，所述純化的莢膜多糖來自于腦膜炎奈瑟氏球菌血清群A、C、W135和Y并且是綴合到載體蛋白上的。然而，該申請教導，所有的多糖必須基本上以同樣的方式(通過相同的連接基連接到相同的蛋白載體上)進行綴合。仍存在對開發(fā)改善的抗奈瑟氏腦膜炎綴合疫苗的需要。本專利技術(shù)涉及提供一種腦膜炎球菌多糖綴合疫苗，其中可以設(shè)計每種多糖的綴合方式(而不是統(tǒng)一的)以獲得有效的組合疫苗。特別地，使用連接 分子將某些腦膜炎球菌綴合到它們的蛋白載體上而同時其它的腦膜炎球菌進行直接綴合是有利的。以這種方式，可以將那些是次好的免疫原的多糖通過連接物提供給免疫系統(tǒng)，而那些是非常好的免疫原的多糖則可以被直接地綴合以使得它們不會控制對組合物的免疫應答。因此，本專利技術(shù)的一個方面提供了一種包含至少2種不同腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜糖的免疫原性組合物，其中一種或多種所述糖選自由通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA、MenC>MenY和MenW組成的第一組,而一種或多種不同的糖選自由直接綴合到載體蛋白上的MenA> MenC、MenY 和 MenW 組成的第二組。例如，在MenAC疫苗中，MenA可以通過連接物綴合而MenC可以直接地綴合。在MenCY疫苗中，MenC可以通過連接物綴合而MenY可以直接地綴合。在MenACWY疫苗中，MenA可以通過連接物綴合而MenCWY可以直接地綴合，或者MenAC可以通過連接物綴合而MenWY可以直接地綴合。對于含有綴合到相同載體上的多種糖的組合疫苗來說，一個值得考慮的問題是載體的免疫抑制作用:可能使用了太多的載體從而可能抑制了免疫應答。用統(tǒng)一的方法綴合載體將向免疫系統(tǒng)呈現(xiàn)相似的B-和T-細胞抗原表位的混合。然而，如果一種糖和另一種糖的綴合發(fā)生在載體蛋白內(nèi)的不同化學基團上，則蛋白載體在怎樣將它們自身呈現(xiàn)給免疫系統(tǒng)方面可能會有某種程度的不同。因此，在本發(fā) 明單獨的實施方案中提供了一種包含至少2種不同糖的免疫原性組合物，所述糖是分別綴合到同類載體蛋白(例如破傷風類毒素)上的，其中一種或多種糖是通過蛋白載體上的第一類化學基團綴合到載體蛋白上的，一種或多種糖是通過蛋白載體上的第二類(不同的)化學基團綴合到載體蛋白上的。第一和第二類化學基團可以存在于蛋白載體中在蛋白載體的互相排斥的第一和第二系列氨基酸(例如一個系列中的某些天冬氨酸/谷胺酸殘基和第二系列中的某些賴氨酸殘基)上。例如可以將一種糖綴合到載體上的羧基上，而將另一種糖綴合到氨基上。這樣的綴合可以包括每種不同綴合物的在單獨的B-和/或T-細胞抗原表位上的綴合。例如在MenAC疫苗中，可以將MenA連接到載體蛋白上的第一類化學基團(例如羧基)上，而將MenC連接到第二類(例如氨基)上。在MenCY疫苗中，可以將MenC連接到載體蛋白上的第一類化學基團(例如羧基)上，而將MenY連接到第二類(例如氨基)上。在MenACWY疫苗中，可以將MenAC連接到載體蛋白上的第一類化學基團(例如羧基)上，而將MenWY連接到第二類(例如氨基)上，或者可以將MenA連接到載體蛋白上的第一類化學基團(例如羧基)上，而將MenCWY連接到第二類(例如氨基)上。根據(jù)本專利技術(shù)更進一步的方面，其提供了一種使人宿主對由腦膜炎奈瑟氏球菌引起的疾病具有免疫性的方法，其包括向宿主給藥以免疫保護劑量的本專利技術(shù)免疫原性組合物或疫苗。根據(jù)本專利技術(shù)更進一步的方面，其提供了一種用于治療或預防由腦膜炎奈瑟氏球菌引起的疾病的本專利技術(shù)免疫原性組合物。根據(jù)本專利技術(shù)更進一步的方面，其提供了本專利技術(shù)免疫原性組合物或疫苗在制備治療或預防由腦膜炎奈瑟氏球菌引起的疾病的藥物方面的用途。附圖描述附圖說明圖1-A-條形圖顯示了在抗-MenY ELISA中的GMC應答。ENYITO12是由天然MenY多糖制備的MenY-TT綴合物。ENYTTO14是由微流化MenY多糖制備的MenY-TT綴合物，其中所述MenY多糖經(jīng)歷了 40個周期的微流化作用。ENYTT015bis是由微流化MenY多糖制備的MenY-TT綴合物，其中所述MenY多糖經(jīng)歷了 20個周期的微流化作用。-B-條形圖顯示了在抗-MenY SBA試驗中的GMT應答。ENYITO12是由天然MenY多糖制備的MenY-TT綴合物。ENYTTO14是由微流化MenY多糖制備的MenY-TT綴合物，其中所述MenY多糖經(jīng)歷了 40個周期的微流化作用。ENYTT015 bis是由微流化MenY多糖制備的MenY-TT綴合物，其中所述MenY多糖經(jīng)歷了 20個周期的微流化作用。詳細描述本專利技術(shù)的一個方面提供了一種包含至少2種不同腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜糖的免疫原性組合物，其中一種或多種莢膜糖選自由通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第一組,一種或多種不同的糖選自由直接綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第二組。更具體地說是，第一組可以由MenA和MenC,第二組由MenC、MenY和MenW組成。本專利技術(shù)的一個具體實施方案是下述的免疫原性組合物，所述免疫原性組合物包含:通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA莢膜糖和直接綴合到載體蛋白上的MenC莢膜糖；通過連接物綴合到載體蛋白上的MenC莢膜糖和直接綴合到載體蛋白上的MenY莢膜糖；通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA和MenC莢膜糖和直接綴合到載體蛋白上的MenY和MenW莢膜糖；通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA莢膜糖和直接綴合到載體蛋白上的MenC、MenY和MenW莢膜糖。在所有這些實施方案中還可以包括Hib綴合物，它是直接或通過連接物連接到載體蛋白(參見上文或下文中的載體列表，例如TT)上的。在整個本說明書中，術(shù)語“糖”可以表示多糖或低聚糖，或者兩者都包含。多糖是從細菌中分離出來的，或者是從細菌中分離出來并通過已知方法(參見例如EP 497524和EP497525)以及任選地通過微流化作用將尺寸調(diào)整到某一程度的。可以調(diào)整多糖的尺寸從而減少多糖樣品的粘度和/或改善綴合產(chǎn)品的過濾性。低聚糖的重復單元數(shù)少(一般地具有5-30個重復單元)，其一般是水解的多糖。各腦膜炎奈瑟氏本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種包含至少2種不同腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜糖的免疫原性組合物，其中一種或多種糖選自由通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第一組，而一種或多種不同的糖選自由直接綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第二組。

【技術(shù)特征摘要】
2005.06.27 GB 0513069.5;2005.06.27 GB 0513071.1;21.種包含至少2種不同腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜糖的免疫原性組合物，其中一種或多種糖選自由通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第一組,而一種或多種不同的糖選自由直接綴合到載體蛋白上的MenA、MenC、MenY和MenW組成的第二組。2.權(quán)利要求1所述的包含至少2種不同腦膜炎奈瑟氏球菌莢膜糖的免疫原性組合物，其中一種或多種糖選自由通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA和MenC組成的第一組，而一種或多種不同的糖選自由直接綴合到載體蛋白上的MenC、MenY和MenW組成的第二組。3.權(quán)利要求2所述的免疫原性組合物，其包含通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA莢膜糖，和直接綴合到載體蛋白上的MenC莢膜糖。4.權(quán)利要求2所述的免疫原性組合物，其包含通過連接物綴合到載體蛋白上的MenC莢膜糖，和直接綴合到載體蛋白上的MenY莢膜糖。5.權(quán)利要求2所述的免疫原性組合物，其包含通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA和MenC莢膜糖，和直接綴合到載體蛋白上的MenY和MenW莢膜糖。6.權(quán)利要求2所述的免疫原性組合物，其包含通過連接物綴合到載體蛋白上的MenA莢膜糖，和直接綴合到載體蛋白上的MenC、MenY和MenW莢膜糖。7.種包含至少2種分別綴合到同類載體蛋白上的不同糖的免疫原性組合物，其中一種或多種糖是通過蛋白載體上的第一類化學基團綴合到載體蛋白上的，一種或多種糖是通過蛋白載體上的第二類化學基團綴合到載體蛋白上的。8.權(quán)利要求7所述的免疫原性組合物，其中通過蛋白載體上第一類化學基團綴合到載體蛋白上的一種或多種糖與通過蛋白載體上第二類化學基團綴合到載體蛋白上的一種或多種糖不同。9.權(quán)利要求7或8所述的包含至少2種分別綴合到同類載體蛋白上的不同糖的免疫原性組合物，其中一種或多種糖是通過蛋白載體上的羧基基團綴合到載體蛋白上的，一種或多種糖是通過蛋白載體上的氨基基團綴合到載體蛋白上的。10.權(quán)利要求7-9所述的免疫原性組合物，其中蛋白載體上的第一和第二類化學基團存在于載體蛋白上的單獨的B-和/或T-細胞抗原表位上。11.權(quán)利要求7-10所述的免疫原性組合物，其中所述糖選自:腦膜炎奈瑟氏球菌血清群A莢膜糖(MenA)、腦膜炎奈瑟氏球菌血清群C莢膜糖(MenC)、腦膜炎奈瑟氏球菌血清群Y莢膜糖(MenY)、腦膜炎奈瑟氏球菌血清群W莢膜糖(MenW)、B群鏈球菌I群莢膜糖、B群鏈球菌II群莢膜糖、B群鏈球菌III群莢膜糖、B群鏈球菌IV群莢膜糖、B群鏈球菌V群莢膜糖、金黃色葡萄球菌5型莢膜糖、金黃色葡萄球菌8型莢膜糖、來自傷寒殺門氏菌的Vi糖、腦膜炎奈瑟氏球菌LPS(例如L3和/或L2)、卡他莫拉菌LPS、流感嗜血桿菌LPS和來自任意的莢膜肺炎球菌糖，例如來自血清型:1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F 或 33F。12.前述權(quán)利要求任意一項所述的免疫原性組合物，其中各腦膜炎奈瑟...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：RL比曼斯，D布特里奧，C卡皮奧，P德內(nèi)爾，P迪維維耶，J普爾曼，
申請(專利權(quán))人：葛蘭素史密絲克萊恩生物有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：