黃酮碳苷類6"羥基-酯衍生物的制備方法和用途技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了黃酮碳苷類6″羥基-酯衍生物的一種制備方法，以來源豐富但活性較弱的黃酮碳苷類6″羥基提取物為底物，在微生物脂肪酶及有機(jī)溶劑存在的條件下，使其與羧酸進(jìn)行酯化反應(yīng)，從而區(qū)位特異合成獲得自然界罕見但活性較強(qiáng)的黃酮碳苷類6″羥基-酯衍生物。反應(yīng)過程中，以薄層色譜或高效液體色譜的檢測方法進(jìn)行監(jiān)控，直至所有的起始原料被消耗，反應(yīng)完成后，脂肪酶被過濾掉，酯化產(chǎn)物用有機(jī)溶劑洗滌并純化。該方法底物易得，制備工藝簡便，特異性高，反應(yīng)條件溫和，所得產(chǎn)物易于純化，為黃酮碳苷類6″羥基-酯衍生物在功能食品、飲料、化妝品、醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域的應(yīng)用提供了充足的原料保障。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的一種制備方法，屬于黃酮類化合物活性改性

技術(shù)介紹
酶催化反應(yīng)條件溫和，有機(jī)溶劑用量少，耗能低，環(huán)境污染極小。更重要的是，酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)具有高度的區(qū)域和立體選擇性，極佳的產(chǎn)率和純度(尤其是映體過量和ee值)。根據(jù)這些優(yōu)勢，在合適的條件下，酶催化技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于許多食品、飲料和醫(yī)藥材料的エ業(yè)生產(chǎn)過程，特別是在藥物和手性中間體的制備。但是，酶法轉(zhuǎn)化很少被使用于修飾和優(yōu)化天然產(chǎn)物的活性。黃酮類化合物廣泛存在于蔬菜、水果、牧草和藥用植物中，且多以糖苷形式存在，具有明顯較低的毒性和抗炎抑菌、抗氧化、抗輻射、降血糖、抗癌、抗腫瘤以及增強(qiáng)免疫能力等藥理作用。過去，黃酮類化合物的研究主要集中在黃酮氧苷和苷元上，自上世紀(jì)90年代以來，由于分析儀器和分析技術(shù)快速發(fā)展，隨著植物黃酮研究和開發(fā)的深入，越來越多碳苷黃酮類化合物相繼被發(fā)現(xiàn)。在所有的碳苷黃酮中，單糖碳苷黃酮以異牡荊苷(isovitexin)(la)、牡荊苷(vitexin) (lb)、異連草苷(isoorientin) (Ic)、連草苷(orientin) (Id)最為常見，它們具有較好的藥理活性，且植物來源廣泛，如大麥、竹葉、短瓣金蓮花、白花敗醬草等，尤其是在禾本科植物的竹葉中，葒草苷、異葒草苷、牡荊苷和異牡荊苷作為特征組分含量較高。碳苷黃酮擁有強(qiáng)力的抗炎抑菌和抗氧化的特性，有文獻(xiàn)報(bào)告指出，用羧酸區(qū)域選擇性酯化黃酮碳苷類6羥基，會(huì)增強(qiáng)其抗菌與抗氧化活性。與此同吋，亦有文獻(xiàn)提及，可以從長花鐵線蓮(Clematis rehderiana)中提取和純化少量抗氧化功能高的黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物。但是，這些黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物在天然物中存在的例子是非常罕見的，并沒有碳苷黃酮那 么普遍。因此，需要對黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物的制備作進(jìn)ー步的研究。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的一種制備方法，以及由此制得的黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物的用途。本專利技術(shù)的技術(shù)解決方案是黃酮碳苷類6 羥基-酯衍生物的制備方法，其特征在干以黃酮碳苷類6羥基提取物為底物，在微生物脂肪酶及有機(jī)溶劑存在的條件下，使其與羧酸進(jìn)行酯化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為20°C 75°C。進(jìn)ー步地，上述的黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物的制備方法，反應(yīng)過程中，以薄層色譜或高效液體色譜的檢測方法進(jìn)行監(jiān)控，直至所有的起始原料被消耗；酷化反應(yīng)完成后，脂肪酶被過濾掉，酷化產(chǎn)物用有機(jī)溶劑洗滌并純化。更進(jìn)一歩地，上述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法中，所述黃酮碳苷類6羥基提取物為，黃酮碳苷6羥基異牡荊苷，或黃酮碳苷6羥基牡荊苷，或黃酮碳苷6羥基異葒草苷，或黃酮碳苷6羥基葒草苷；所述羧酸為對香豆酸，或咖啡酸。更進(jìn)一歩地，上述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法中，所述微生物脂肪酶為，黑曲霉，或南極念珠菌，或皺落念珠菌，或米赫毛霉，或洋蔥假單胞菌，或熒光假單胞菌，或delemar根霉；尤其是B型南極念珠菌屬脂肪酶，或洋蔥假單胞菌的固定形式的脂肪酶。更進(jìn)一歩地，上述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法中，所述酯化反應(yīng)過程中的有機(jī)溶劑為甲苯、叔丁基甲基醚、こ基醚、THF、MeCN、CH2Cl2、CHCl3、己烷、1，4_ ニ氧雜環(huán)己烷、叔戊醇、ニ甲基亞砜，或其混合物，尤其是“叔戊醇/ ニ甲基亞砜”混合溶剤。再進(jìn)ー步地，前述任意一項(xiàng)制備方法獲得的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的用途，其特征在于將制得的黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物與生理相容的載體一起制成制劑組合物，用于生產(chǎn)功能食品、飲料、化妝品或藥品。由此，本專利技術(shù)探索出黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的ー種新的制備方法，以來源豐富但活性較弱的黃酮碳苷類6羥基為底物，通過酶催化反應(yīng)，從而區(qū)位特異合成獲得自然界罕見但活性較強(qiáng)的黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物，為黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物在功能食品、飲料、化妝品、醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域的應(yīng)用提供了充足的原料保障。該制備方法底物易得，制備エ藝簡便，特異性高，反應(yīng)條件溫和，所得產(chǎn)物易于純化。具體實(shí)施例方式本專利技術(shù)掲示了黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的一種制備方法，該衍生物自然界罕見稀有，但比碳苷黃酮擁有更佳的抗氧化、抗輻射、抗抑制菌感染等生物活性作用，可作為功能食品、飲料、化妝品和醫(yī)藥中的重要成份。 具體地，本專利技術(shù)以來源豐富但活性較弱的黃酮碳苷類6羥基提取物為底物，在微生物脂肪酶及有機(jī)溶劑存在的條件下，用酶催化反應(yīng)的方法使其與對香豆酸、咖啡酸等羧酸進(jìn)行酯化，從而區(qū)位特異合成黃酮碳苷類6羥基-酷衍生物。反應(yīng)過程如下式所示: 眾:ス旗於 OH O3OH O 1 -- 2 R1 = H, OHR1 = H, OH R2 = H, OHR2= H1 OH R3 = H, R5R3 = H, R5, R7 R4 = H1R5JL JLR4 = H1R5, R7OHR6= ^OH hoAoH,.尸パ OHorOH or 0H 3 2 OH3 2 OH式中，も,2,3,4,5,6,7取代基已給出了具體的選擇范圍，對應(yīng)于各種選擇，可以形成一系列具體的制備方法。其中，用于本專利技術(shù)的羧酸(3)，隨著取代基R6的不同可以有三種選擇，優(yōu)選對香豆酸和咖啡酸。本專利技術(shù)所用的“微生物脂肪酶”包括催化酶鍵的水解和形成的酶，是所述酶起始分離自非真核生物源，如黑曲霉，南極念珠菌，皺落念珠菌，米赫毛霉，洋蔥假單胞菌，熒光假單胞菌，delemar根霉。但是，選擇用于本專利技術(shù)的酶并不局限于從原始源中直接分離和純化，也可以通過合成或重組的方式，或者通過其它合適的方式而制備。這些酶可以來自ー些商業(yè)源，另外，這些酶制劑還可以來自各種供應(yīng)商，可以具有不同的商品名，它們作為不同微生物源的粗品，通過部分純化、純化或固定形式來使用。尤其是，來自B型南極念珠菌屬的脂肪酶被發(fā)現(xiàn)非常適用于本專利技術(shù)，例如以產(chǎn)物品名NOVO SP435或N0V0ZYM 435得自 Novo Nordisk,或者，以 CHIRAZYME L-2 得自 Roche Molecular Biochemicals andBioCatalytics。此外,洋蔥假單胞菌的脂肪酶,尤其其固定形式,脂肪酶PS_C(如,可作為“Amano” II脂肪酶得自Amano)，可在合成角度上像N0V0ZYM435脂肪酶ー樣進(jìn)行反應(yīng)，盡管反應(yīng)速率較慢。對于本專利技術(shù)的方法，微生物脂肪酶與合適的溶劑相結(jié)合，用于催化黃酮碳苷類6羥基(I)和羧酸(3)的反應(yīng)。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員容易選擇合適的溶劑，如甲苯，叔丁基甲基醚(TBME)，こ基醚，THF，MeCN, CH2Cl2, CHCl3,己烷，1，4_ ニ氧雜環(huán)己烷，叔戊醇，ニ甲基亞砜或包括這些溶劑的混合物。在本專利技術(shù)ー個(gè)實(shí)施方案中，使用“叔戊醇/ ニ甲基亞砜”混合物。根據(jù)本專利技術(shù)技術(shù)方案，制備時(shí)溫度控制在20°C 75°C。在一個(gè)實(shí)施方案中，本專利技術(shù)的酶法反應(yīng)可在約20°C 約75°C，`或約25°C、27°C、30°C，40°C 約70°C，或約32°C，或約37°C 約65°C下進(jìn)行；另ー實(shí)施方案中，是在約30°C 約55°C，或在室溫 約45°C下進(jìn)行。通常，反應(yīng)在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行，直至所有的起始原料被消耗。反應(yīng)進(jìn)程可以通過各種技術(shù)，如薄層色譜(TLC)本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
黃酮碳苷類6″羥基?酯衍生物的制備方法，其特征在于：以黃酮碳苷類6″羥基提取物為底物，在微生物脂肪酶及有機(jī)溶劑存在的條件下，使其與羧酸進(jìn)行酯化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為20℃～75℃。

【技術(shù)特征摘要】
1.黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法，其特征在于以黃酮碳苷類6羥基提取物為底物，在微生物脂肪酶及有機(jī)溶劑存在的條件下，使其與羧酸進(jìn)行酯化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為20°C 75°C。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法，其特征在于反應(yīng)過程中，以薄層色譜或高效液體色譜的檢測方法進(jìn)行監(jiān)控，直至所有的起始原料被消耗； 酯化反應(yīng)完成后，脂肪酶被過濾掉，酯化產(chǎn)物用有機(jī)溶劑洗滌并純化。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法，其特征在于所述黃酮碳苷類6羥基提取物為，黃酮碳苷6羥基異牡荊苷，或黃酮碳苷6羥基牡荊苷，或黃酮碳苷6羥基異葒草苷，或黃酮碳苷6羥基葒草苷。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法，其特征在于所述羧酸為對香豆酸，或咖啡酸。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃酮碳苷類6羥基-酯衍生物的制備方法，其特征在于所述微生物脂肪酶為，黑曲霉，或南...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：禇慧林，
申請(專利權(quán))人：禇慧林，
類型：發(fā)明
國別省市：