癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法技術

本發明專利技術涉及一種癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法，包括如下步驟：采用陽極氧化法制備AAO模板，并對其進行表面改性，改變表面的親溶劑性質；把改性模板放置到多種抗癌藥物的混合溶液中，在常壓或減壓條件下輔助制備納米藥物；用酸或堿溶解除去模板，得到單分散且比例、形貌可控的多藥納米結構；清洗后得到純的單分散納米藥物；合成功能化的表面活性劑分子，同時引入靶向單元；用合成的表面活性劑對納米藥物進行功能化；本發明專利技術方法是用模板法輔助制備各種疏水抗癌藥物的多藥協同納米結構，改變制備條件可以得到不同配方、形貌和尺寸的納米藥物，所制備的納米藥物具有高的載藥量、良好的穩定性、安全性、更低的毒副作用和優異的抗癌活性。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于醫藥領域，涉及一種藥物制劑的制備方法，尤其是涉及一種。
技術介紹
惡性腫瘤是嚴重危害人類健康和生命的疑難疾患，居疾病死亡率之首。化學療法在腫瘤治療中占較大比例，近40年來發展很快，療效不斷提高，但目前的抗癌藥物大多存在水溶性差、對腫瘤組織的選擇性差、療效低、毒性大、使用單一藥物治療易產生多藥耐藥性等缺點，限制了臨床應用，并難以實現劑型的多樣化。增加疏水藥物的水溶性、克服耐藥性具有十分重要的現實意義和研究價值，是醫藥化學領域亟待解決的問題。為了增加抗癌效果并減小毒副作用，全球許多科學家都競相研發最新型的納米藥物載體材料和技術，致力于把疏水性藥物通過某些載體包裹以對其進行增溶。近年來，隨著生物技術的不斷發展，各種新型的藥物載體層出不窮，其制備工藝逐步完善，作用機制進一步闡明、劑型逐步改善、毒性和免疫原性大幅降低，特別是大量實驗數據證明大多數的藥物載體可以提高藥物治療指數、降低藥物毒性、減小藥物副作用、減小劑量。盡管藥物載體發展迅速，且具備了許多優點和特點，其臨床應用并不像預期的那樣廣泛，主要原因在于載體的引入極大的降低了載藥量、載體的存在給機體增加了額外的代謝負擔、載體的合成成本高且耗時，更重要的是，具有協同治療效果的多組分藥物很難同時且定量成比例的進入同一劑型，使得具有最佳治療效果的納米多藥體系無法精確的控制制備。另外，載體基藥物在體液環境中的分布和穩定存在也面臨著極大的挑戰。隨著癌癥診斷和治療業的發展，制備高載藥量、尺寸均一且比例可控的多組分藥物協同體系成為必要。
技術實現思路
本專利技術要解決的技術問題是提供一種；該方法是用模板法輔助制備各種疏水抗癌藥物的多藥協同納米載藥體系，改變制備條件可以得到不同配方、形貌和尺寸的納米多藥載藥體系，所制備的納米多藥載藥體系具有高的載藥量、良好的穩定性、安全性、更低的毒副作用和優異的抗癌活性。為解決上述技術問題，本專利技術一種，包括如下步驟采用陽極氧化法制備AAO模板(即多孔陽極氧化鋁模板)，并對其進行表面改性，改變表面的親溶劑性質；把改性模板放置到多種抗癌藥物的混合溶液中，在常壓或減壓條件下輔助制備納米藥物；用酸或堿溶解除去模板，得到單分散且比例、形貌可控的多藥納米結構；清洗后得到純的單分散納米藥物；合成功能化的表面活性劑分子，同時引入靶向單元；用合成的表面活性劑對納米藥物進行功能化；除去多余的表面活性劑并進行后續的穩定性和生物學測 試。具體步驟如下I)制備AAO模板；2)納米顆粒的制備將兩種以上具有協同效應的疏水藥物加入到有機溶劑中，配制成濃度為I毫摩爾/升溶液至飽和溶液，得到藥物溶液^fAAO表面改性后浸泡在藥物溶液中> 5分鐘,取出硬模板晾干,重復浸泡和晾干步驟> 10次；3)去除模板用O. l-10mol/L的Na0H、5wt%_50wt%的H3PO4或磷酸+鉻酸混合酸溶解去除模板；4)收獲納米顆粒用水清洗去模板后的納米藥物體系，除去反應副產物，得到單分散的納米藥物；5)表面活性劑的合成以末端帶氨基的聚乙二醇(以后簡稱PEG)為親水端，含有18個碳鏈長度的馬來酸酐(簡稱PMHC18)的兩親性表面活性劑；作為疏水端，通過-NH2和-COOH的縮合反應，制備PEG-PMHC18的兩親性表面活性劑；6)載藥體系的制備取納米藥物溶于水中，制得納米藥物水溶液；取步驟5)制得的表面活性劑溶于水中，制成表面活性劑水溶液；將納米藥物水溶液和表面活性劑水溶液混合，使兩個體系混合均勻， 通過超聲、震蕩或機械攪拌使得兩者通過疏水相互作用、靜電作用和/或范德華力作用實現穩定包裹(即納米藥物的功能化)，制得多藥載藥體系。優選地，所述PEG的分子量范圍為2000-20000。本專利技術可以通過載藥體系的體外釋放及生物學表征數碼照片、電子顯微鏡、動態光散射儀和紫外-可見分光光度法測定了載藥體系的穩定性，并測定載藥體系的體外釋放行為、細胞內吞、體外和體內毒性等，來驗證這本專利技術的方法的有效性。優選地，步驟I)中，制備AAO模板的條件如下取純度> 99. 999%的鋁片并對其進行預處理，電解液為5wt%的硫酸、磷酸或草酸溶液；加入適量乙醇調控模板的制備過程；氧化電壓180V，氧化溫度15°C，氧化時間為7小時。優選地，所述預處理包括退火、去油潰、拋光和清洗步驟。優選地，步驟2)中，所述兩種以上具有協同效應的疏水藥物選自下列物質中的兩種以上的物質紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、秋水仙堿、長春新堿、甲氨蝶呤、他莫西芬、替尼泊苷、順鉬、6-巰基嘌呤。優選地，步驟2)中，所述有機溶劑選自下列物質中的一種或幾種乙醇、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜。選擇有機溶劑時，應當是所選藥物分子的良溶劑；也即藥物分子在有機溶劑中溶解度高。 優選地，步驟2 )中，所述AAO表面改性是指將AAO置于在下列物質中的一種或多種中進行超聲處理8-12分鐘水、乙醇、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜中，且表面改性最后選擇的溶劑與藥物溶液中的有機溶劑相同。優選地，步驟4)中，除去反應副產物的方法是通過高速離心后棄去上層清液；所述高速離心的轉速為4000-24800轉/分鐘。優選地，步驟6)中，所述納米藥物水溶液的濃度為10-1000umol/L。優選地，步驟6)中，所述表面活性劑水溶液的濃度為0. 1-lOOmg/mL。優選地，步驟6)中，所述納米藥物水溶液表面活性劑水溶液體積比為1:10-10:1。本專利技術具有如下有益效果(I)實驗條件溫和，操作簡單，不需要使用大量的毒性溶劑和添加劑，不需要復雜的合成和制備過程；(2)制備時間短，效率高；(3)原材料來源廣泛、成本低廉,無毒安全；(4)形貌和尺寸均勻可調且易于控制(其中納米顆粒的粒徑為10_200nm，納米棒和納米管的直徑10-200nm，長度500nm-100 μ m)，適合產業化生產；(5)載藥量高(大于90%);(6)生物相容好，動物體內血液循環時間長，大大提高藥物的生物利用率；(7)該方法應用面廣，適用于各種疏水藥物。因此，本專利技術是一種操作簡單、成本低、產率高、納米藥物組分和比例可調、形貌可控、尺寸小、粒徑分布窄、對環境無污染的納米藥物制備方法，為新一代高載藥量的多藥制劑的研制及應用研究提供物質基礎與技術保障，可用于癌癥診斷和治療領域，具有廣泛的應用前景。附圖說明下面結合附圖對本專利技術的具體實施方式作進一步詳細的說明圖1 :空白AAO模板的掃描電子顯微鏡(SEM)圖片(a.正面圖，b.側面圖)；圖2 =AAO模板法制備的吉非替尼(GET)和10-羥基喜樹堿(HCPT) (1:1)納米顆粒的SEM圖片； 圖3 =GET和HCPT (1:1)納米多藥釋放體系的細胞內吞過程(激光共聚焦熒光顯微鏡照片a. 30min, b. lh, c. 2h, d. 3h)；圖4 GET和HCPT (1:1)納米多藥釋放體系的細胞毒性研究(納米多藥與納米單藥培養不同時間對腫瘤細胞殺傷效果的MTT測試a. 24h, b. 48h)；圖5 =PEG-PMHC18和FA_PEG_PMHC18的生物相容性研究圖；圖6 =AAO模板法制備GET和HCPT (1:1)多藥載藥體系形貌調控過程的S本文檔來自技高網...

【技術保護點】
癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：1）制備AAO模板；2）納米顆粒的制備：將兩種以上具有協同效應的疏水藥物加入到有機溶劑中，配制成濃度為1毫摩爾/升溶液至飽和溶液，得到藥物溶液；將AAO表面改性后浸泡在藥物溶液中≥5分鐘，取出硬模板晾干，重復浸泡和晾干步驟≥10次；3）去除模板：用0.1?10mol/L的NaOH、5wt%?50wt%的H3PO4或磷酸+鉻酸混合酸溶解去除模板；4）收獲納米顆粒：用水清洗去模板后的納米藥物，除去反應副產物，得到單分散的納米藥物；5）表面活性劑的合成：以末端為氨基的PEG為親水端，含有18個碳鏈長度的馬來酸酐作為疏水端，通過?NH2和?COOH的縮合反應，制備PEG?PMHC18；6）載藥體系的制備：取納米藥物溶于水中，制得納米藥物水溶液；取步驟5）制得的表面活性劑溶于水中，制成表面活性劑水溶液；將納米藥物水溶液和表面活性劑水溶液混合，使兩個體系混合均勻，通過超聲、震蕩或機械攪拌使得表面活性劑對納米藥物進行穩定包裹,制得產品。

【技術特征摘要】
1.癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于，包括如下步驟1)制備AAO模板；2)納米顆粒的制備將兩種以上具有協同效應的疏水藥物加入到有機溶劑中，配制成濃度為I毫摩爾/升溶液至飽和溶液，得到藥物溶液^fAAO表面改性后浸泡在藥物溶液中 ^ 5分鐘，取出硬模板晾干，重復浸泡和晾干步驟> 10次；3)去除模板用O.l-10mol/L的Na0H、5wt%-50wt%的H3PO4或磷酸+鉻酸混合酸溶解去除模板；4)收獲納米顆粒用水清洗去模板后的納米藥物，除去反應副產物，得到單分散的納米藥物；5)表面活性劑的合成以末端為氨基的PEG為親水端，含有18個碳鏈長度的馬來酸酐作為疏水端，通過-NH2和-COOH的縮合反應，制備PEG-PMHC18 ；6)載藥體系的制備取納米藥物溶于水中，制得納米藥物水溶液；取步驟5)制得的表面活性劑溶于水中，制成表面活性劑水溶液；將納米藥物水溶液和表面活性劑水溶液混合， 使兩個體系混合均勻，通過超聲、震蕩或機械攪拌使得表面活性劑對納米藥物進行穩定包裹，制得廣品。2.根據權利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優選地，步驟I) 中，制備AAO模板的條件如下取純度> 99. 999%的鋁片并對其進行預處理，電解液為5wt% 的硫酸、磷酸或草酸溶液；加入適量乙醇調控模板的制備過程；氧化電壓180V，氧化溫度 15°C，氧化時間為7小時。3.根據權利要求2所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優選地，所述預處理包括退火、去油潰、拋光和清洗步驟。4.根據權利要求1所述納米多...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張曉宏，李亞楠，歐雪梅，
申請(專利權)人：中國科學院理化技術研究所，
類型：發明
國別省市：