一種疫苗組合物及其制備方法和應用技術

本發明專利技術提供了一種疫苗組合物，該疫苗組合物包括豬瘟病毒抗原和豬藍耳病抗原，其中，該豬瘟病毒為豬瘟兔弱毒化株，該豬藍耳病抗原為高致病性豬藍耳病病毒，該豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為100∶1—100∶10，該疫苗組合物可以消除兩種抗原之間的干擾作用，達到一針預防兩種傳染病的目的，大大減少了免疫次數及動物應激反應。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種預防和治療豬瘟、豬藍耳病的疫苗組合物。
技術介紹
豬痕(classicalswine fever, CSF)是由豬痕病毒(classical swine fevervirus, CSFV)引起的一種嚴重危害養豬業的毀滅性傳染病。該病死亡率高達 80-90%，世界動物衛生組織(OIE)將其列為OIE疾病名錄，我國也將其列為一類傳染病。豬瘟的防制歷來是全世界豬瘟存在國非常重視的課題，為此各國都投入了大量的人力、物力。 目前疫苗接種仍是控制豬瘟的重要手段。我國生產的豬瘟兔化弱毒疫苗有脾淋苗、乳兔組織苗、牛睪丸原代細胞苗及最近兩年發展起來的豬睪丸傳代細胞苗，疫苗免疫仍是我國防控豬瘟的基本手段。豬繁殖與呼吸綜合征(又稱豬藍耳)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)引起的以母豬發熱、流產，斷奶前后的仔豬死亡率升高，不同年齡豬呼吸障礙等為臨床特征的疾病。目前，該病是嚴重影響世界養豬業發展的重要疾病之一。疫苗接種是預防該病最有效的方法，國內外已有商品化的豬繁殖與呼吸綜合征疫苗。既有滅活疫苗，也有用弱毒株制備的活疫苗。由于豬場的區域性及流行病學特征不同，有的豬場免疫經典藍耳病的弱毒苗，有的免疫高致病性藍耳病的弱毒苗，臨床上給藍耳病的免疫帶來了很多困擾。豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)是一種正鏈RNA病毒，目前已發現兩種基因型 歐洲型和美洲型，目前兩種基因型在我國均有檢出。PRRSV基因組大小約15kb，有多個開放閱讀框，其中第一個開放閱讀框(ORFla和ORFlb)含有PRRSV基因組的80%的序列，其編碼有關RNA復制和轉錄的蛋白，包括RNA依賴性RNA聚合酶。(Straw et al，Diseases of Swine, 9th edition, chapter 24(2006))。ORFla 和 ORFlb 被翻譯成一個多聚蛋白 (poly-protein)，該多聚蛋白被其中含有的蛋白酶活性區域切割成多個非結構蛋白，包括 Nspl_Nspl2(見，Vries et al, Seminarsin Virology,8 :33-47(1997) ；Allende et al, Journal of General Virology, 80 :307-315 (1999))。根據對國內高致病性藍耳病毒株的遺傳變異分析，高致病性毒株是目前優勢流行毒株，且變異較快。高致病性豬藍耳病為一類動物疫病，是目前嚴重危害中國養豬業的一類疫病，表現為對呼吸系統、繁殖系統、神經系統、免疫系統、消化系統均有強的致病力。病毒毒力極強，豬感染高致病性豬藍耳病病毒可以產生高水平的病毒血癥，高致病性豬藍耳病對豬場造成的經濟損失極大，有很多豬場因為該病遭到毀滅性打擊，高致病性豬藍耳病病毒已是我國現階段藍耳病流行的主導毒株這一事實已毋庸置疑。PRRSV變異株各毒株0RF5基因氨基酸同源性為96% -100%,且NsP2基因都有30 個氨基酸的缺失，現有技術的毒株NVDC-JXA1-R，并作為預防高致病性藍耳病疫情政府招標用疫苗株，在控制高致病性藍耳病疫情中起到重要作用。隨后又有兩株高致病性藍耳病變異株TJ M-F92株和HuN4-F112株活疫苗上市，上述毒種的效力和免疫效果上基本一致。經典株藍耳病毒株大多為美洲分離株，經典藍耳病為二類動物疫病，表現為對仔豬呼吸系統和母豬繁殖系統有較強的致病力，病毒傳播能力較強，經典藍耳病病毒的復制能力要比高致病性藍耳病病毒低10000倍以上，豬群一旦感染高致病性豬藍耳病病毒，經典的藍耳病病毒就很難在豬體內檢測到。目前主要有豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗R98株、 豬藍耳病ATCCVR-2332株、豬藍耳病CH-1R株。目前，PRRS活疫苗使用的弱毒株均為人工馴化毒株，均經過傳代致弱而成為無毒力，且有良好的免疫原性的弱毒疫苗株，PRRSV變異株各毒株之間的同源性很高。通過對全國各地分離的PRRSV變異株進行完整的0RF5和部分Nsp2基因序列比較分析發現，來自不同豬場的PRRSV高度同源，新分離毒株的GP5基因相互之間也是高度同源，同源性達到 98. 5—100% (參見CN 101280292A說明書第9頁2. 2. 7序列分析)。目前，普遍使用的 PRRSV活疫苗使用的變異株毒株有NVDC-JXAl-R株、TJM-F92株和HuM-Fl 12株，雖然不同毒株在毒力和生物學特征等方面存在差異，但其免疫原性相似，因為PRRS活疫苗變異毒株之間高度同源，具有免疫原性的蛋白均存在。因此，使用不同變異毒株的活疫苗，均可取得很好的免疫效果。藍耳病弱毒疫苗株除了變異株還有經典毒株，目前應用的疫苗毒株有豬繁殖與呼吸綜合征R98株、ATCCVR-2332株、CH-1R株，經典毒株之間的同源性很高，其交叉保護性也很好，均能夠很好地抵抗經典毒株強毒的攻擊。各毒株制備的疫苗對經典藍耳病強毒株均有良好的免疫保護性。豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株和經典毒株之間的同源性僅為69. 8-86. 2%，到目前為止也有經典毒株制備的疫苗可以保護高致病性藍耳病毒的攻擊的成功例子，但普遍認為，經典毒株對防控高致病性藍耳病的效果遠不如變異株的弱毒株疫苗的效果好。如果飼養管理水平較好，且飼養范圍內未發生病藍耳病流行的，經典株與變異株制備的疫苗也會有一定的交叉保護性。這兩種豬的傳染病對養豬的危害非常嚴重，目前免疫接種仍是我國防制豬瘟、豬藍耳病的重要措施。并且有文獻表明豬藍耳病疫苗與豬瘟疫苗同 時免疫會使疫苗的效力顯著降低(湖北畜牧獸醫，2009年第7期，豬藍耳病免疫對豬瘟免疫效果影響的試驗)，也有文獻表明兩種抗原同時免疫基本上無免疫抑制，其所指“基本上無免疫抑制”是指不會顯著削弱對方的免疫效果(CN102727883A豬繁殖與呼吸綜合征與豬瘟二聯苗及其用途)。但在臨床免疫程序中，這兩種疫苗一般要間隔七天以上才能免疫另外一種疫苗，這也從側面說明了在現有條件下，這兩種疫苗同時免疫會發生干擾現象。但是由于兩種疫苗的免疫時間比較接近，在臨床應用上，多針次、多劑量、多種免疫程序難以合理安排，既繁瑣、費時、費力、增加成本，且容易造成漏種，直接影響免疫效果。杜喜忠等(“豬藍耳病免疫對豬瘟免疫效果影響的試驗”，《湖北畜牧獸醫》，2009 年第7期，第21頁，郵發代號38-352)公開了豬藍耳病弱毒苗與豬瘟活疫苗同時免疫會對豬瘟免疫產生一定的影響，導致豬瘟活疫苗抗體滴度會降低1-2個滴度。
技術實現思路
為解決現有技術的不足，本專利技術目的在于提供一種治療和預防豬瘟、豬藍耳病的疫苗組合物，，解決現有疫苗同時免疫時會產生干擾的問題，提供了該疫苗組合物中兩類抗原的最佳配比。本專利技術的主要目的在于提供一種疫苗組合物，所述疫苗組合物包括豬瘟病毒抗原和豬藍耳病病毒抗原，其中，所述豬瘟病毒為豬瘟兔弱毒化株，所述豬藍耳病抗原為高致病性豬藍耳病病毒，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為100 1—100 10。優選地，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為100 3—100 10。優選地，所述豬藍耳病抗原包括HuM-Fl 12株、附00及41_1 株、1'本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種疫苗組合物，所述疫苗組合物包括豬瘟病毒抗原和豬藍耳病抗原，其中，所述豬瘟病毒為豬瘟兔弱毒化株，所述豬藍耳病抗原為高致病性豬藍耳病病毒，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為100∶1??100∶10。

【技術特征摘要】
1.一種疫苗組合物，所述疫苗組合物包括豬瘟病毒抗原和豬藍耳病抗原，其中，所述豬瘟病毒為豬瘟兔弱毒化株，所述豬藍耳病抗原為高致病性豬藍耳病病毒，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為100 1—100 10。2.根據權利要求1所述的疫苗組合物，其中，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為 100 3—100 10。3.根據權利要求1所述的疫苗組合物，其中，所述豬藍耳病抗原包括HUN4-F112株、NVDC-JXA1-R 株、TJM-F92 株活的病毒。4.一種疫苗組合物，所述疫苗組合物包括豬瘟病毒抗原和豬藍耳病抗原，其中，所述豬瘟病毒為豬瘟兔弱毒化株，所述豬藍耳病抗原為經典豬藍耳病病毒，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為100 1-1000 I。5.根據權利要求4所述的疫苗組合物，其中，所述豬藍耳病抗原與豬瘟病毒抗原含量比例為 100 1-300 I。6.根據...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張許科，孫進忠，白朝勇，
申請(專利權)人：普萊柯生物工程股份有限公司，
類型：發明
國別省市：