本發明專利技術公布了一種副干酪乳桿菌等混合菌生產的發酵飼料及其制備和應用方法。由副干酪乳桿菌（CICC20296）、枯草芽孢桿菌(ACCC10619)、釀酒酵母(CICC32236)先液體單獨發酵培養，再將發酵液按體積比1:1:1混合，接種到固體培養基中混合均勻后，置于密封容器中厭氧發酵，10-37℃培養75~240小時，產品活菌數可達200-300×108cfu.g-1，產品無需干燥直接飼用。本發明專利技術提出的發酵飼料的制備方法減少了抗生素的使用，所得到的發酵飼料含有大量的菌體蛋白、豐富的氨基酸和維生素等營養物質，有利于促進腸道菌群平衡，提高禽畜機體免疫力，提高生產性能，降低飼養成本。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物發酵領域，具體涉及一種副干酪乳桿菌等混合菌生產的發酵飼 料及其制備和應用方法。
技術介紹
在動物日糧中添加抗生素顯著促進了動物生產，并對集約化畜牧業的發展做出了 重大貢獻。然而隨著時間的推移，飼料中添加抗生素的危害日益顯現，并受到社會的廣泛關 注。歐盟自2006年I月起全面禁止在畜禽飼料中添加抗生素。隨后，日本和韓國等亞洲國 家也相繼制定了畜禽無抗生素飼養規范。在生豬等飼養中不得添加抗生素目前已經是國際 公認的食品安全標準。無抗發酵飼料是利用有益微生物發酵飼料，形成富含大量活性有益微生物、有機 酸及微生物代謝產物，且不含有任何抗生素的微生物發酵飼料。以提供真蛋白及乳酸菌為 主，長期飼用的畜禽體內無抗生素殘留。富含大量的乳酸菌、酵母菌，在微生物的作用下合 成動物所需要的氨基酸、維生素、消化酶和乳酸等，使飼料的營養更全面，生物效價更高。不 但可以彌補常規飼料中容易缺乏的氨基酸，而且能使其它粗飼料原料營養成份迅速轉化， 達到增強消化吸收利用效果。使用微生物發酵飼料喂養的家畜家禽，其體內不含殘留抗生素和有害的化學添加 劑，不但使食用肉的標準達到和超過了歐盟食用肉的標準，而且使肉中的風味物質提高了， 口感更好。同時，由于畜群患病幾率減低，生長穩定，操作簡便，從而大大降低了農民的飼養 成本，提高了養殖經濟效益，特別適合在我國廣大農村推廣使用?！盁o抗發酵飼料”的研發將促進“無抗豬肉”的生產，為老百姓，提高我國畜禽養殖 業飼料轉化利用率、豬肉品質，增強飼料工業產品的國際競爭力。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種副干酪乳桿菌等混合菌生產的發酵飼料及其制備和應 用方法，本專利技術提出的發酵飼料的制備方法減少了抗生素的使用，所得到的發酵飼料含有 大量的菌體蛋白、豐富的氨基酸和維生素等營養物質，有利于促進腸道菌群平衡，提高禽畜 機體免疫力,提高生產性能,降低飼養成本。一種混合菌發酵飼料的制備方法由副干酪乳桿菌(CICC20296)、枯草芽孢桿菌 (ACCC10619)、釀酒酵母(CICC32236)分別液體發酵培養，發酵液按體積比1:1:1混合后進 行固體發酵培養而成。具體包括以下步驟(I)液體發酵將經過斜面活化的副干酪乳桿菌取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件 為MRS培養基，35 37°C，pH自然，靜置培養18 22h ;然后按3 7%接種量接種進行液體 發酵培養，所述培養基為MRS培養基，所述發酵條件為35 37°C，pH自然，裝液量50 70%，靜置培養36 60h ；將經過斜面活化的枯草芽孢桿菌取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為:LB培養基，28 32°C，ρΗ6· 8 7. 2，搖床轉速18(T220r / min，培養16 20h ;然后按 21%接種量接種進行液體發酵培養，所述培養基為LB培養基，所述發酵條件為28 32°C， pH6. 8 7. 2，裝液量10 30%，搖床轉速180^220r / min，培養20 24h ;將經過斜面活化的釀酒酵母取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為 PDA培養基，26 30°C，pH6. 2 6. 8，搖床轉速18(T250rpm ;培養16 20h ;然后按4 8%接種量接種進行液體發酵培養，所述培養基為PDA培養基，所述發酵條件為26 3(TC，pH6. 2^6. 8， 裝液量10 30%，搖床轉速18(T250rpm ;培養26 34h ；(2)固體發酵分別取步驟(I)得到的三種發酵液按體積比1:1:1混合，按質量百分比3-10%的接種量將發酵液與培養基主料充分混合，含水量控制在35飛5%范圍；培養基主料包括畜禽全價料或者飼料原料；(3)將步驟(2)得到的混合物料置于密封容器中，在1(T37°C發酵環境溫度下靜止發酵，連續固態厭氧發酵75 240小時；產品活菌數達20(Γ300X IO8Cfu. g—1。上述飼料原料包括麥麩、玉米粉、豆餅粉中的一種或幾種。上述固體發酵在密封的發酵罐、發酵池、塑料容器或真空袋中完成。一種發酵飼料，是由上述的方法制備而成的飼料。上述的發酵飼料的應用方法是直接，或者添加到飼料中喂飼畜禽；在飼料或者飼料原料中添加質量濃度為5%-30%。本專利技術產品無需干燥可直接飼用。本專利技術使用的副干酪乳桿菌(CICC20296)和釀酒酵母(CICC32236)購自中國工業微生物菌種保藏管理中心，枯草芽孢桿菌(ACCC10619)購自中國農業微生物菌種保藏管理中心。本專利技術提出的發酵飼料的制備方法減少了抗生素的使用，所得到的發酵飼料含有大量的菌體蛋白、豐富的氨基酸和維生素等營養物質，有利于促進腸道菌群平衡，提高禽畜機體免疫力,提高生產性能,降低飼養成本。具體實施方式以下結合實 施例旨在進一步說明本專利技術，而非限制本專利技術。實施例1(I)液體發酵將經過斜面活化的副干酪乳桿菌(CICC20296)取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，MRS培養基，35°C，pH自然，靜置培養18h ;然后按3%接種量接種進行液體發酵培養，所述培養基為MRS培養基，所述發酵條件為35°C，pH自然，裝液量50%，靜置培養36h ；將經過斜面活化的枯草芽孢桿菌(ACCC10619)取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，1^培養基，281，？冊.8，搖床轉速180r / min，培養16h ;然后按2%接種量接種進行液體發酵培養，所述培養基為LB培養基，所述發酵條件為28°C，pH6. 8，裝液量10%，搖床轉速 180r / min，培養 20h ；將經過斜面活化的釀酒酵母(CICC32236)取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養， PDA培養基，26°C，pH6. 2，搖床轉速180rpm ;培養16h ;然后按4%接種量接種進行液體發 酵培養，所述培養基為PDA培養基，所述發酵條件為26°C，pH6. 2，裝液量10%，搖床轉速 180rpm ;培養 26h ；(2)固體發酵培養基主料畜禽全價料(或麥麩、玉米粉、豆餅粉等飼料原料);接種分別取發酵液按體積比1:1:1混合，以3%接種量將發酵液與固體培養基充 分混合，含水量控制在35% ；(3)將混合物料置于密封容器中(固體發酵可在密封的發酵罐、發酵池、塑料容器、 真空袋中完成，采用兩步法發酵)，在10°c發酵環境溫度下進行連續固態厭氧發酵240小 時；(4)產品活菌數可達200X IO8Cfu. g_S產品無需干燥直接飼用。實施例2(I)液體發酵將經過斜面活化的副干酪乳桿菌(CICC20296)取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培 養，MRS培養基，36°C，pH自然，靜置培養20h ;然后按5%接種量接種進行液體發酵培養，所 述培養基為MRS培養基，所述發酵條件為36°C，pH自然，裝液量60%，靜置培養48h ；將經過斜面活化的枯草芽孢桿菌(ACCC10619)取一環斜面菌株接種到種子搖瓶 培養，LB培養基，30°C，pH7.0，搖床轉速200r / min，培養18h ;然后按5%接種量接種進行 液體發酵培養，所述培養基為LB培養基，所述發酵條件為30°C，pH7. 0，裝液量20%，搖床 轉速 200r / min，培養 22h。將經過斜面活化的釀酒酵母(CICC32236)取一環斜面菌株接本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種混合菌發酵飼料的制備方法，其特征是：由副干酪乳桿菌（CICC20296）、枯草芽孢桿菌(ACCC10619)、釀酒酵母(CICC32236)分別液體發酵培養，發酵液按體積比1:1:1混合后進行固體發酵培養而成。
【技術特征摘要】
1.一種混合菌發酵飼料的制備方法，其特征是由副干酪乳桿菌(CICC20296)、枯草芽孢桿菌(ACCC10619)、釀酒酵母(CICC32236)分別液體發酵培養，發酵液按體積比1:1:1混合后進行固體發酵培養而成。2.根據權利要求1所述的方法，其特征是，具體包括以下步驟 (1)液體發酵 將經過斜面活化的副干酪乳桿菌取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為MRS培養基，35 37°C，pH自然，靜置培養18 22h ;然后按3 7%接種量接種進行液體發酵培養，所述培養基為MRS培養基，所述發酵條件為35 37°C，pH自然，裝液量50 70%，靜置培養36 60h ； 將經過斜面活化的枯草芽孢桿菌取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為LB培養基，28 32°C，pH6. 8 7. 2，搖床轉速180 220r / min，培養16 20h ;然后按2 8%接種量接種進行液體發酵培養，所述培養基為LB培養基，所述發酵條件為28 32°C，pH6. 8 7. 2，裝液量10 30%，搖床轉速180 220r / min，培養20 24h ； 將經過斜面活化的釀酒酵母取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為PDA培養基，26 30°C，pH6. ...
【專利技術屬性】
技術研發人員：周映華，劉惠知，胡新旭，高書鋒，周小玲，繆東，王升平，舒燕，曾發嬌，
申請(專利權)人：湖南省微生物研究所，
類型：發明
國別省市：
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