抗血管生成藥劑及使用這種藥劑的方法技術

抗血管生成藥劑或多肽，其包含與CD2第一結構域基本相似的氨基酸片段，其中多肽包含由兩個片段所形成的β-折疊。也包括使用這種藥劑和多肽的方法。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】抗血管生成藥劑及使用這種藥劑的方法先前相關申請數據本申請對2010年7月13日提交的序列號為61/363,933的美國臨時專利申請要求優先權，其內容通過引用包含于此。
本公開內容涉及抑制或預防血管生成從而控制或治療依賴血管生成的疾病，該疾病以血管增生或以依賴于血管增生為特征。本公開內容還涉及抗血管生成藥劑與化學治療劑的聯合應用。
技術介紹
血管生成是從已有毛細血管形成新血管的過程，血管生成包括源自內皮祖細胞的血管生長。血管生成是一個由促血管生成分子和抗血管生成分子之間平衡調節的聯合過程。血管生成的刺激（如缺氧或炎癥細胞因子）導致血管生成生長因子，如血管內皮生長因子（VEGF）或成纖維細胞生長因子（FGF）的誘導表達和釋放。這些生長因子刺激已存在的脈管系統中的內皮細胞（EC）增生并從組織中遷移出來形成新的內皮通路。血管生成包括內皮細胞增殖。粥樣硬化斑塊生長、糖尿病性視網膜病、退化性黃斑病、晶狀體后纖維組織增生癥、特發性肺纖維變性、急性成人呼吸窘迫綜合征以及哮喘均與不適當或病理性的血管生成相關。此外，腫瘤進展與新血管形成相關聯，新血管形成提供了一種結構向持續生長的腫瘤組織輸送營養。盡管遠在30多年前就首先提有提議以血液供給為靶點來減緩甚至中止癌癥的進展，直到最近血管生成抑制劑才進入癌癥治療的主流。因此，本領域對減少病理性血管生成的方法和藥劑有著持續的需求。本公開內容的目的正是為了滿足這一需求。附圖說明圖1A為抗血管生成的示意圖，顯示了該蛋白中反平行β-折疊的兩段短鏈。圖1B是抗血管生成的另一示意圖，顯示了該蛋白中反平行β-折疊的兩段短鏈，其中疏水面朝外。圖1C為抗血管生成的另一示意圖，顯示了該蛋白中反平行β-折疊的兩段短鏈，其中疏水面朝內。圖2為折疊（上）及非折疊（下）的抗血管生成的藥劑和宿主蛋白的核磁共振（NMR）譜。圖3A顯示抗血管生成藥劑和本領域現有藥劑（Anginex）相比對HUVEC細胞的增殖分析。圖3B顯示抗血管生成藥劑和本領域現有藥劑（Anginex）相比對M4A4癌癥細胞的增殖分析。圖4A圖示在使用抗血管生成藥劑開始治療后8天的治療的療程里，腫瘤體積保持相對不變。圖4B圖示在使用抗血管生成藥劑開始治療后22天的治療的療程里，腫瘤體積保持相對不變。圖5圖示了首次使用抗血管生成藥劑治療結束時腫瘤重量有著顯著的差異。圖6以圖片方式展示用緩沖液和宿主蛋白治療的小鼠腫瘤以正常的速率生長，而用抗血管生成藥劑治療的小鼠腫瘤生長速度則顯著緩慢。圖7顯示了用抗血管生成藥劑治療小鼠的血管密度試驗結果。圖8顯示任一治療組的小鼠體重沒有顯著變化。圖9顯示細胞存活力可隨劑量而變。圖10顯示了使用不同劑量的抗血管生成藥劑治療14天或以上的腫瘤生長曲線。圖11為和rProAgio-PEG的腫瘤生長曲線。圖12圖示了14天療程結束時的腫瘤重量。定義為幫助理解本文所使用的特定術語，本文作如下定義。“血管生成”定義為已有血管床的任何改變或有助于組織灌注的新脈管系統形成。它包括內皮細胞從已存在血管萌牙而成的新脈管或已有脈管改變大小、成熟方向或流動屬性從而改善組織血流灌注的重構。術語“氨基酸”指天然存在的氨基酸或非天然氨基酸，也指以與天然氨基酸相似的方式發揮功能的氨基酸類似物及氨基酸模擬物。天然編碼的氨基酸為20種常見的氨基酸（丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天門冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸和纈氨酸）及吡咯賴氨酸和硒半胱氨酸。氨基酸類似物指基本化學結構與天然存在的氨基酸相同的化合物，例如其α-碳與氫、羧基、氨基和R基結合。此類類似物可具有修飾過的R基團（如正亮氨酸）或是修飾過的肽鏈骨架，但仍保持其基本化學結構與天然存在的氨基酸相同。非限制性的氨基酸類似物實例包括高絲氨酸、正亮氨酸、蛋氨酸亞砜和甲硫蛋氨酸。術語“保守修飾變體”同時適用于天然和非天然氨基酸、天然和非天然核酸序列，以及它們的組合。對于特定的核酸序列來說，“保守修飾變體”指編碼相同或基本相同的天然及非天然氨基酸序列的那些天然和非天然核酸，或不編碼基本相同序列的天然和非天然核酸序列的天然和非天然核酸。例如，由于遺傳密碼的簡變性，大量功能相同的核酸可編碼任意特定的蛋白質。比如密碼子GCA、GCC、GCG和GCU都編碼氨基酸丙氨酸。因此，在密碼子指定為丙氨酸的每一個位點，密碼子可以變成相應密碼子的任一簡變密碼子而不改變所編碼的多肽。這樣的核酸變異為“沉默變異”，屬于保守修飾變異的一種。同樣舉例來說，本文所述的編碼天然或非天然多肽的每一天然或非天然核酸序列也描述了該天然或非天然核酸的每一可能沉默變異。技術人員將認識到可以將天然或非天然核酸的每一密碼子（AUG和TGG除外，通常AUG是蛋氨酸的唯一密碼子，TGG是色氨酸的唯一密碼子）加以修飾得到功能完全相同的分子。因此，編碼天然和非天然多肽的天然和非天然核酸其每一沉默變異也隱含于所述各序列中。本文所用的術語“有效量”指所給藥的藥劑或化合物的量足以使所治療的不適或疾病的一個或多個癥狀得到一定程序的緩解。其結果可以是疾病信號、癥狀或病因的減少及/或緩解，或是生物系統的任何其它期望的改變。舉例來說，所給藥的藥劑或化合物包括但不限于天然氨基酸多肽、非天然氨基酸多肽、修飾過的天然氨基酸多肽或修飾過的非氨基酸多肽。含有這些天然氨基酸多肽、非天然氨基酸多肽、修飾過的天然氨基酸多肽或修飾過的非天然氨基酸多肽的組合物可以給藥用于預防、增強及/或治療性的處理。任一個體病例的適當“有效”量可以用技術，如劑量升級（爬坡）試驗加以確定。本文所用術語“核酸序列”指構成核酸的核苷酸順序和標識。“核酸”指脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其單鏈或雙鏈形態的聚合體。本術語包括含有已知核苷酸類似物或已修飾的骨架殘基或連鎖的核酸，其可以是合成而得，也可是天然存在或非天然存在，結合特性與參照核酸相似，代謝方式也與參照核酸相似。這樣的類似物實例包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基磷酸鹽、手性甲基磷酸酸鹽、2-O-甲基核糖核苷酸和肽核酸（PNAs）。除非另外特指，特定的核酸序列也隱含了其保守修飾變體（如簡變密碼子置換體）和互補序列，以及明確指明的序列。具體來說，簡變密碼子置換體可以由一個或多個指定或全部密碼子的第三個位點被混合堿基及/或脫氧次黃苷殘基取代而來生成序列而得。術語核酸可以與基因、cDNA、mRNA、寡核苷酸和多核苷酸互換使用。特定的核酸序列也隱含了“剪接變體”。類似地，核酸編碼的特定的蛋白也隱含了該核酸剪接變體所編碼的任意蛋白質。正如其字面所提示的那樣，“剪接變體”是基因替代剪接的產物。經過轉錄后，初始核酸轉錄本可被剪接成不同（替代）的核酸剪接產物來編碼不同的多肽。剪接變體產生的機制各式各樣，其中包括了外顯子的替代剪接。此定義也包括了連讀轉錄而得的源自同一核酸的替代多肽。此定義也包括剪接反應的任意產物，包括剪接產物的重組型。本文中術語“多肽”、“肽”和“蛋白”可以互換使用，指代氨基酸殘基的聚合體。此術語適用于一個或多個氨基酸殘基為相應天然存在的氨基酸的人工化學模擬物的氨基酸聚合體，也適用于天然存在的氨基酸聚合體及非天然存在的氨基酸聚合體。本文所用術本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2010.07.13 US 61/363,9331.修飾的人類或小鼠CD2多肽第一結構域在制備用于減少個體中血管生成的抗血管生成藥劑的用途，其中來源于人類或小鼠CD2多肽第一結構域的修飾的人類或小鼠CD2多肽第一結構域包含由兩個片段、反向平行折疊、朝內的疏水面和朝外的親水面所形成的β-折疊；兩個片段包含在親水性和疏水性之間交替的至少五個氨基酸。2.根據權利要求1所述的用途，其中個體中血管生成相關的病癥選自：腫瘤生長、動脈粥樣硬化、糖尿病性視網膜病、衰老相關的黃斑病以及晶狀體后纖維組織形成。3.根據權利要求1所述的用途，其中修飾的人類或小鼠CD2多肽第一結構域選自：序列IdNo.3、序列IdNo.6、序列IdNo.9、序列IdNo.10及序列IdNo.11。4.根據權利要求1所述的用途，其中抗血管生成藥劑誘導哺乳動物的細胞凋亡。5.根據...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉志仁，詹妮·J·楊，魯蔭，
申請(專利權)人：喬治亞州立大學研究基金會，
類型：
國別省市：