【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于大豆多肽提取技術，尤其涉及。
技術介紹
固定化酶是20世紀60年代發展起來的新技術，一般是將酶與不溶性載體結合起來，使酶在一定的空間內呈封閉狀態，能連續的進行反應，反應后的酶通過過濾或離心等方法回收重復使用。固定化酶作為酶應用領域中的一個主要研究方向，目前大都通過將酶固定在不溶性聚合物或無機載體上，形成的固定化酶在大分子底物轉化中由于聚合物載體的存在而大大降低了酶的結合容量和反應能力。此外，固定化使用的試劑和載體成本高昂、固定效率偏低，真正投入工業化應用的固定化酶不多，因而進一步開發更簡便、更適用的固定化方法仍是該領域追求的目標。交聯酶聚集體技術是一種無載體固定化酶技術，酶的固定化是通過對基本純化的、高濃度的蛋白質樣品的共價交聯來實現的。與傳統固定化酶相比，該固定化方法獲得的固定化酶有較高的催化劑比表面，單位體積活性大、空間效率高，有較高的酶催化活性，受底物擴散限制的影響較小，在極端條件下及有機溶劑中和蛋白酶中的操作穩定性，成本低廉、設備簡單，無需載體，應用范圍廣。然而將交聯酶聚集體技術——無載體固定化酶技術應用于酶解大豆分離蛋白提取大豆多肽的研究未見報道，現有的提取大豆多肽的方法存在酶不能回收重復使用，成本高等問題。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題是克服上述現有技術的不足，提供，達到簡化工藝、提高酶的重復利用率及降低成本的目的。本專利技術所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的，該方法包括以下步驟(I)將protex-6L 堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中，加入乙醇沉淀聚集，所述的乙醇濃度50-90%，聚集時間10-50min，...
【技術保護點】
一種無載體固定化酶制備大豆多肽的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：（1）將protex?6L堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中，加入乙醇沉淀聚集，所述的乙醇濃度50?90%，聚集時間10?50min，聚集后再加入戊二醛進行交聯得交聯酶聚集體即固定化堿性蛋白酶，所述的戊二醛濃度10?50%，交聯時間1?3h；（2）將大豆分離蛋白加水混合配制成大豆分離蛋白溶液，調節pH和溫度，再加入步驟（1）中得到的固定化酶進行酶解，酶解時間2?4h，加酶量3000?7000U/g，酶解pH?8?10，酶解溫度40?80℃，酶解后回收固定化酶，酶解液經離心分離得上清液，上清液經冷凍干燥即得大豆多肽。
【技術特征摘要】
1.一種無載體固定化酶制備大豆多肽的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1) 將protex-6L堿性蛋白酶溶解于磷酸鹽緩沖液中，加入乙醇沉淀聚集，所述的乙醇濃度 50-90%，聚集時間10-50min，聚集后再加入戊二醛進行交聯得交聯酶聚集體即固定化堿性蛋白酶，所述的戊二醛濃度10-50%，交聯時間l-3h ;(2)將大豆分離蛋白加水混合配制成大豆分離蛋白溶液，調節PH和溫度，再加入步驟(I)中得到的固定化酶進行酶解，酶解時間 2_4h，加酶量3000-7000U/g，酶解pH...
【專利技術屬性】
技術研發人員：江連洲，李楊，齊寶坤，馮紅霞，王歡，隋曉楠，王中江，王勝男，
申請(專利權)人：東北農業大學，
類型：發明
國別省市：
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