一種新穎乳酸菌株、含有其的抑菌組合物及其用途，包括：一種新穎乳酸戊糖片球菌株(Pediococcus?pentosaceus)，或該菌株的繼代培養后代；該菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.5235，該菌株可以抑制發光桿菌(或稱巴斯德桿菌)(Photobacterium?damselae)等病原菌的生長；以及包含該乳酸菌PP49菌株的組合物，該組合物為動物飼料添加劑或動物用醫療組合物等形式。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種新穎乳酸菌株，特別是指一種可以降低發光桿菌 (Photobacterium damselae)生長且可提升海鱺對發光桿菌抵抗力的乳酸菌株，以及含有該乳酸菌株的組合物及該組合物的用途。
技術介紹
隨著全球人口的增加，人類對于糧食的需求也與日俱增；在捕魚業漁獲量日漸減少的情況下，養殖漁業成為重要的肉品供應來源之一。海鱺(Rachycentron canadum)是一種熱帶海洋魚類，也是海鱺科(Rachycentridae)唯一的魚種。因為海鱺對環境的高忍受度以及其快速的生長率，海鱺成為理想的海水箱網養殖魚種。臺灣海鱺養殖業始于1990 年代初期；于1997年人工育種成功后，此高經濟價值的魚種便廣泛地被養殖于海水箱網中 (Liao et al.，2004)。盡管海鱺產量逐年增加，但包括發光桿菌(或稱巴斯德桿菌)(Photobacterium damselae subsp. piscicida, Pdp)與弧菌(Vibrio)等的細菌性病原菌已對海鱺魚苗造成嚴重的疫情。其中發光桿菌Pdp對海鱺造成的威脅最嚴重，死亡率也最高。發光桿菌Pdp 為革蘭氏陰性菌，會造成感染魚的內臟產生白色的結節，并且由受感染的吞噬細胞散布傳染。到目前為止，海鱺養殖業者對抗發光桿菌Pdp最主要的方法是使用抗生素；然而，發現有越來越多對抗生素產生抗性的發光桿菌，而且使用抗生素也會有藥物殘留等食品安全的問題。另一方面，由于海鱺的免疫記憶力(immune memory)不像許多其它的魚種(如石斑魚)那么有效，因此對海鱺接種發光桿菌疫苗的效果并不穩定。由此可見，上述常規針對海鱺抵抗發光桿菌感染的方法仍有諸多不足，并非權宜之計，而亟待加以改良。在許多研究中，乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB)已被使用作為益生菌 (probiotics)。乳酸菌產生的有機酸與細菌素(bacteriocin)能夠抑制或直接殺死許多微生物(Ercolani et al. , 1976 ；Mathur et al. , 2005),且乳酸菌抗酸及抗膽汁的能力可以提高該菌在動物腸胃道的存活率(Irianto et al.，2002)。此外，前人研究顯示，約有I % 至10%的腸道細菌具有成為益生菌的潛力(Sugita et al.，2002)。因此，本申請專利技術人鑒于上述常規針對海鱺抵抗發光桿菌感染的方法所衍生的各種缺點，以及乳酸菌作為益生菌的可能性，亟思加以改良創新，并經多年苦心孤詣潛心研究后，終于成功研發完成本申請的新穎乳酸菌株、含有其的組合物及其用途。
技術實現思路
本說明書中所述的所有技術性及科學術語，除非另外有所定義，均為本領域普通技術人員可共同了解的意義。本專利技術的目的在于提供一種新穎乳酸菌株-乳酸戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus),該菌株篩選自饑餓三天后海鱺的腸道。本專利技術的再一個目的在于提供一種含有新穎乳酸菌株-乳酸戊糖片球菌 (Pediococcus pentosaceus)的組合物，該組合物具有抑制發光桿菌(Photobacterium damselae)等病原菌生長，以及提升海鱺免疫力的效果。本專利技術的另一個目的在于提供一種含有新穎乳酸菌株-乳酸戊糖片球菌 (Pediococcus pentosaceus)的組合物的應用，所述組合物可作為魚飼料、魚疫苗的添加劑，以增進魚類抵抗發光桿菌等病原菌的能力。可達成上述專利技術目的的新穎乳酸菌株、含有其的組合物及其用途，包括一種新穎乳酸戍糖片球菌株(Pediococcus pentosaceus),或所述菌株的繼代培養后代；所述菌株篩選自海鱺腸道樣品，并經過耐酸性、耐膽鹽性篩選，以及喂食海鱺后進行攻毒試驗所得到可以幫助海鱺抵抗發光桿菌Pdp感染的乳酸菌株。所述新穎乳酸戍糖片球菌株(P. pentosaceus)已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心、保藏編號為CGMCC No. 5235的菌株，保藏日期為2011年9月9曰。將本專利技術所篩選的乳酸戍糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株培養懸浮液與發光桿菌Pdp —起培養，結果顯示，本專利技術的新穎乳酸戊糖片球菌PP49菌株可以抑制病原菌發光桿菌Pdp的生長。將本專利技術的乳酸戍糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株與市售魚飼料混合以喂食海鱺，結果顯示本專利技術乳酸戊糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株可明顯促進海鱺生長率；搭配接種發光桿菌疫苗后，可以增加海鱺對發光桿菌Pdp感染的抵抗力，其相對存活率顯著高于只有接種疫苗的魚以及對照組。本專利技術進一步提供含有本專利技術的乳酸戍糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株的組合物，所述組合物用于抑制發光桿菌Pdp的生長；所述組合物可制成動物飼料添加劑或動物用醫療組合物等形式。其中所述組合物可進一步包含藥學上可接受的載體，所述載體包含但不限于 溶劑(solvent)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer) > 黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、穩定劑(stabilizing agent)、螯合劑 (chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、 潤滑劑(lubricant)、表面活性劑(surfactant)、佐劑(adjuvant),及其它類似或適用本專利技術的載體。本專利技術還提供增強魚類對抗發光桿菌的免疫力的方法，包含對魚類施予有效量的乳酸戊糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株、或含有其的組合物及發光桿菌疫苗，即可增強其對抗發光桿菌的免疫力；其中所述乳酸戍糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株可進一步混合于飼料或動物用醫療組合物中喂食魚類，并搭配該發光桿菌疫苗接種，以提高其對抗發光桿菌的免疫力。另外，本專利技術亦提供前述乳酸戍糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株用于制備保護魚類免于感染發光桿菌的藥物的方法或用途。本專利技術所述的新穎乳酸戍糖片球菌(P. pentosaceus)PP49菌株,亦應包含其繼代培養的后代或突變株，但仍具有與本專利技術所述的菌種相同的特性、基因體(genomic)或功能性。術語“有效量”是指對于個體的用量，該用量可有效增進、改善該個體的免疫力以對抗發光桿菌，進而預防及保護該個體免于感染發光桿菌及其衍生的相關疾病。術語“預防、保護”是指相較于未使用本專利技術的疫苗者，使用本專利技術的疫苗者將可有效增強其免疫力以對抗發光桿菌，增加其存活率，進而預防及保護其免于發光桿菌引起的疾病及其衍生的相關疾病。附圖說明圖I為海鱺腸道乳酸菌株抑制發光桿菌Pdp生長的曲線圖；取乳酸戊糖片球菌 (P. pentosaceus)菌株PP49培養懸浮液加入發光桿菌Pdp生長培養基中培養該菌,并觀察發光桿菌Pdp的生長量；陰性對照組以BHI液體培養基混合MRS液體培養基(pH值為6. 2) 培養發光桿菌Pdp，而陽性對照組則是以BHI液體培養基混合調整過pH值的MRS液體培養基(pH值為5)培養本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種新穎乳酸菌株，所述菌株為一種乳酸戊糖片球菌株(Pediococcus?pentosaceus)，其為保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心、保藏編號為CGMCC?No.5235的菌株，或所述保藏菌株的繼代培養后代。
【技術特征摘要】
2011.04.28 TW 1001147691.一種新穎乳酸菌株，所述菌株為ー種乳酸戍糖片球菌株(Pediococcuspentosaceus)，其為保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心、保藏編號為CGMCC No. 5235的菌株，或所述保藏菌株的繼代培養后代。2.ー種包含如權利要求I所述的乳酸菌株的組合物。3.如權利要求2所述的組合物,其中所述組合物用于抑制發光桿菌(Photobact...
【專利技術屬性】
技術研發人員：胡宏熙，齊肖琪，
申請(專利權)人：生合生物科技股份有限公司，澎湖科技大學，
類型：發明
國別省市：
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