本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種固相多肽合成生長抑素的方法，包括如下步驟：以2-氯三苯基醇樹脂為起始原料，按照固相合成的方法依次連接具有保護基團的氨基酸，其間依次脫去Fmoc-保護基團，用TBTU及HOBT為縮合劑進行接肽反應(yīng)，得保護的還原型十四肽樹脂后，同步進行脫側(cè)鏈保護基團及切肽，獲得還原型生長抑素，并在pH為7～9的條件下用雙氧水氧化，獲得生長抑素粗品，再經(jīng)C18高效液相柱進行分離純化，再經(jīng)冷凍干燥后，制得生長抑素精品。本發(fā)明專利技術(shù)具備規(guī)模化生產(chǎn)能力，工藝穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低，三廢減少，副產(chǎn)物少，質(zhì)量穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低，極具市場競爭力。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生長抑素的生產(chǎn)方法，尤其涉及固相多肽合成生長抑素的新生產(chǎn)工藝。
技術(shù)介紹
中文名生長抑素。其他名稱生長抑素釋放抑制激素，商品名施他寧。英文名Somatostatin，Stilamin0結(jié)構(gòu)式權(quán)利要求1.，其特征在于，包括如下步驟以2-氯三苯基醇樹脂為起始原料，按照固相合成的方法依次連接具有保護基團的氨基酸，其間依次脫去Fmoc-保護基團，用TBTU及HOBT為縮合劑進行接肽反應(yīng)，得保護的還原型十四肽樹脂后，同步進行脫側(cè)鏈保護基團及切肽，獲得還原型生長抑素，并在pH為7 9的條件下用雙氧水氧化，獲得生長抑素粗品，再經(jīng)C18高效液相柱進行分離純化，再經(jīng)冷凍干燥后，制得生長抑素精品。2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，依次連接具有保護基團的氨基酸，獲得保護十四肽樹脂，其間依次脫去Fmoc-保護基團的方法，包括如下步驟 (1)生產(chǎn)Fmoc-Cys (Trt)-樹脂 將2-氯三苯基醇樹脂，加入DCM，室溫攪拌溶脹，加入氯化亞砜，再于室溫反應(yīng)2 3小時，抽干，用DCM洗漆，抽干； ·2_氯三苯基醇樹脂與氯化亞砜的重量比為1 I 2 ; 加入DMF，再加入用DMF溶解的Fmoc-Cys (Trt) -OH和DIPEA，于32 38°C反應(yīng)I. O ·1. 5小時，再加甲醇，32 37 °C反應(yīng)30 90分鐘，抽干，樹脂用甲醇洗滌一次，用DMF洗洗，抽干； DMF中，F(xiàn)moc-Cys(Trt)-OH 2-氯三苯基醇樹脂=I 2 I，摩爾比; DIPEA 2-氯三苯基醇樹脂=5 7 1，摩爾比；(2)生產(chǎn)Fmoc-Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂 在步驟(I)的Fmoc-Cys(Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，用DMF洗滌，抽干，加入用DMF溶解的Fmoc-Ser (tBu) _0H、TBTU、H0BT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF洗滌，抽干，獲得Fmoc-Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(3)生產(chǎn)Fmoc-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂 在步驟(2)的Fmoc-Ser (tBu)-Cys (Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 26. 5 % PIP的DMF溶液，脫帽，抽干，分別用甲醇和DMF洗滌，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Thr (tBu) _0H、TBTU、H0BT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF 洗漆，抽干，獲得 Fmoc-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(4)生產(chǎn)Fmoc-Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂 在步驟(3)的Fmoc-Thr(tBu)-Ser(tBu)_Cys(Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 ·26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，用甲醇洗滌一次，用DMF洗五次，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Phe-OH、TBTU, HOBT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF洗漆二次，抽干，獲得 Fmoc-Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(5)生產(chǎn)Fmoc-Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂 在步驟(4)的Fmoc-Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂中，加入重量濃度為·25.5 26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，用甲醇洗滌一次，用DMF洗五次，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Thr (tBu) _0H、TBTU、H0BT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF 洗漆，抽干，獲得 Fmoc-Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(6)生產(chǎn)Fmoc-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂 在步驟(5)的 Fmoc-Thr (tBu)-Phe-Thr (tBu)-Ser (tBu)-Cys (Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，用甲醇和DMF洗滌，抽干；加入用DMF 7L溶解的Fmoc-Lys (Boc) _0H、TBTU、HOBT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用 DMF 洗搽，抽干，獲得 Fmoc-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(7)生產(chǎn)Fmoc-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂在步驟(6)的 Fmoc-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，依次用甲醇和DMF洗滌，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Trp-OHJBTlHOBT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF洗搽，抽干，獲得 Fmoc-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(8)生產(chǎn)Fmoc-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂在步驟(7)的 Fmoc-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，依次用甲醇和DMF洗搽，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Phe-OH、TBTU、HOBT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF洗搽，抽干，獲得 Fmoc-Phe-Trp-Lys (Boc)-Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂；(9)生產(chǎn)Fmoc-Phe-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂在步驟(8)的 Fmoc-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-樹脂中，加入重量濃度為25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脫帽反應(yīng)，抽干，用甲醇和DMF洗搽，抽干; 加入用DMF試劑溶解的Fmoc-Phe-OH、TBTU、HOBT和NMM的混合物，縮合反應(yīng)，抽干，用DMF 洗搽，抽干，獲得 Fmoc-Phe-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (t本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
固相多肽合成生長抑素的方法，其特征在于，包括如下步驟：以2?氯三苯基醇樹脂為起始原料，按照固相合成的方法依次連接具有保護基團的氨基酸，其間依次脫去Fmoc?保護基團，用TBTU及HOBT為縮合劑進行接肽反應(yīng)，得保護的還原型十四肽樹脂后，同步進行脫側(cè)鏈保護基團及切肽，獲得還原型生長抑素，并在pH為7～9的條件下用雙氧水氧化，獲得生長抑素粗品，再經(jīng)C18高效液相柱進行分離純化，再經(jīng)冷凍干燥后，制得生長抑素精品。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：周逸明，崔頎，蔡華成，
申請(專利權(quán))人：上海蘇豪逸明制藥有限公司，周逸明，崔頎，
類型：發(fā)明
國別省市：
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