本實用新型專利技術(shù)提供了一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置。所述裝置包括一方形底板和垂直于所述底板的四個側(cè)壁組成的方形平皿;所述方形平皿中至少有兩個相對的所述側(cè)壁可拆卸;所述底板上表面設(shè)有十字形坐標網(wǎng)線。本實用新型專利技術(shù)提供的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置,可以通過底板上的坐標體系,用于直接觀察受檢細胞的遷移及侵襲運動,并可定量其運動距離;操作簡便、精確性高,而且制造簡單,成本低廉;在細胞密度不高時,可以對遷移的細胞直接計數(shù),具有十分廣闊的市場前景。(*該技術(shù)在2022年保護過期,可自由使用*)
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本技術(shù)涉及一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置。
技術(shù)介紹
目前在生物學或醫(yī)學實驗中檢測細胞遷移的方法有細胞劃痕(wound healing)法和Transwell法。細胞劃痕法比較簡單,只需要在長滿的細胞中間用移液槍頭作一劃痕,洗去被劃傷的細胞后,培養(yǎng)24小時內(nèi)觀察細胞遷移即可。該方法比較粗糙,只能定性,不能定量,對于緊密粘附在一起生長的細胞容易引起細胞成片漂起而造成實驗失敗的缺點,同時該方法也不能用于觀察細胞侵襲運動。Transwell法所用裝置由上下兩個小室組成,中間有一孔徑為3-8 μ m的濾膜,上室加入受檢細胞的懸液,下室加入常含生長因子或趨化因子的培養(yǎng)液,置37°C孵育數(shù)小時,最后取濾膜,經(jīng)固定、干燥、染色、脫色等步驟,將處理后的濾膜置顯微鏡下對細胞進行計數(shù)。通過對濾膜下層的細胞計數(shù),來反映細胞的遷移能力。該方·法的缺點主要有裝置的價格昂貴,細胞接種和檢測步驟繁瑣,難以進行實時監(jiān)測活細胞遷移與侵襲運動。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本技術(shù)的目的是提供一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置,包括一方形底板和垂直于所述底板的四個側(cè)壁組成的方形平皿;所述方形平皿中至少有兩個相對的所述側(cè)壁為可拆卸式的;所述底板上設(shè)有十字形坐標網(wǎng)線。該裝置可放于常規(guī)的細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板中,形成一個無細胞空間,當將所述可拆卸的側(cè)壁卸下時,所述細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板中的細胞會向所述底板區(qū)域移動,通過所述十字形坐標網(wǎng)線,可實時監(jiān)測活細胞的遷移與侵襲移動。在上述裝置中,所述側(cè)壁的垂直高度應(yīng)小于常規(guī)細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板的高度,具體可小于15mm,如13_ ;所述底板的邊長可在5_ 30mm之間,以便于將所述方形平皿放置于細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板內(nèi)使用。在上述裝置中,所述底板為正方形或長方形。在上述裝置中,所述底板具體可為長度為20mm、寬度為13mm的長方形。在上述裝置中,所述十字形坐標網(wǎng)線由數(shù)條與所述底板四邊平行的直線組成。在上述裝置中,為了便于觀測和區(qū)分,所述十字形坐標網(wǎng)線將所述平板分隔成四個小方格刻度網(wǎng)區(qū)域;所述小方格的邊長具體可為O. 02_。上述裝置可由常規(guī)的透明材料如塑料制成。使用本技術(shù)所提供的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置,優(yōu)點在于可以通過底板上的坐標體系,直接觀察受檢細胞的遷移及侵襲運動,并可定量其運動距離;操作簡便、精確性高,而且制造簡單,成本低廉;在細胞密度不高時,可以對遷移的細胞直接計數(shù),具有十分廣闊的市場前景。附圖說明圖I為本技術(shù)的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置的立體圖。圖2為本技術(shù)的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置中底板的俯視圖。圖3為將本技術(shù)檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置放置于細胞培養(yǎng)皿中的剖視圖。圖4為將本技術(shù)檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置的兩個側(cè)壁拆除后的剖視圖。圖5為細胞在本技術(shù)檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置底板上遷移的示意圖。圖1-5中,I為底板,2為側(cè)壁,3為細胞培養(yǎng)皿蓋,4為細胞培養(yǎng)皿,5為細胞。具體實施方式以下結(jié)合附圖對本技術(shù)做進一步說明,但本技術(shù)并不局限于以下實施例。本技術(shù)提供的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置(圖I)是一個由長方形底板I和垂直于底板I的四個側(cè)壁2組成的方形平皿,其中兩個相對較長的側(cè)壁可拆卸,另外兩個相對較短的側(cè)壁與底板I是一體的;底板I上表面設(shè)有數(shù)條與底板四邊平行的直線組成十字形坐標網(wǎng)線(圖2),將底板I分隔成四個小方格刻度網(wǎng)區(qū)域,小方格刻度網(wǎng)之間以十字形空白區(qū)域隔開,可用于實時觀察與測定受檢細胞向中間遷移運動以及形態(tài)學參數(shù),每個小方格的邊長為O. 02mm。四個側(cè)壁2的垂直高度均為13mm ;底板I的長度為20mm,寬度為1 3mm η上述檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置中,四個側(cè)壁2還可都設(shè)成可拆卸式的,再根據(jù)實驗的具體情況拆除相應(yīng)的側(cè)壁后進行觀測;底板I還可為正方形;底板I的長度、寬度和側(cè)壁2的垂直高度可以根據(jù)實際需要進行確定;十字形坐標網(wǎng)線的直線之間的距離或小方格大小也可以根據(jù)需要進行確定。使用上述檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置時,在底板I上可鋪入纖維粘連蛋白(fibronectin),層粘連蛋白(Iaminin),膠原蛋白(collagen),玻璃粘連蛋白(vitronectin)或基質(zhì)膠(matrigel)等細胞外基質(zhì)膠,用來觀察與測定受檢細胞的侵襲運動。用于觀測貼壁生長細胞的遷移與侵襲運動時(圖3),在細胞接種前,將方形平皿底板I的底面輕輕涂一些真空硅膠(如美國DOW CORNING公司產(chǎn)品等),即可將其固定于細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板的底面上;然后在細胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板中加入單細胞懸液,靜置培養(yǎng)4-6小時;拆除兩個相對較長的側(cè)壁2 (圖4),繼續(xù)培養(yǎng)6-24小時;部分受檢細胞遷移到底板I的坐標系統(tǒng)區(qū)域(圖5),在光學倒置顯微鏡下觀察與確定細胞移動距離與方向,并根據(jù)觀測時間間隔,計算細胞遷移運動速率,以此來反映細胞的遷移與侵襲能力。權(quán)利要求1.一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置,包括一方形底板(I)和垂直于所述底板的四個側(cè)壁(2)組成的方形平皿;所述方形平皿中至少有兩個相對的所述側(cè)壁(2)可拆卸;所述底板(I)上表面設(shè)有十字形坐標網(wǎng)線。2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的裝置,其特征在于所述側(cè)壁(2)的垂直高度小于15mm。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的裝置,其特征在于所述側(cè)壁(2)的垂直高度為13mm。4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的裝置,其特征在于所述底板(I)為正方形或長方形。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的裝置,其特征在于所述底板(I)的邊長為5mm 30mm。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的裝置,其特征在于所述底板(I)為長度為20mm、寬度為13mm的長方形。7.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的裝置,其特征在于所述十字形坐標網(wǎng)線由數(shù)條與所述底板(I)四邊平行的直線組成。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的裝置,其特征在于所述十字形坐標網(wǎng)線將所述底板(I)分隔成四個小方格刻度網(wǎng)區(qū)域。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的裝置,其特征在于所述小方格的邊長為O.02mm。專利摘要本技術(shù)提供了一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置。所述裝置包括一方形底板和垂直于所述底板的四個側(cè)壁組成的方形平皿;所述方形平皿中至少有兩個相對的所述側(cè)壁可拆卸;所述底板上表面設(shè)有十字形坐標網(wǎng)線。本技術(shù)提供的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置,可以通過底板上的坐標體系,用于直接觀察受檢細胞的遷移及侵襲運動,并可定量其運動距離;操作簡便、精確性高,而且制造簡單,成本低廉;在細胞密度不高時,可以對遷移的細胞直接計數(shù),具有十分廣闊的市場前景。文檔編號C12M1/34GK202705350SQ201220360879公開日2013年1月30日 申請日期2012年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月24日專利技術(shù)者沈國棟, 胡世蓮, 程民, 徐維平, 徐婷娟, 王衛(wèi)東 申請人:安徽省立醫(yī)院本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置,包括一方形底板(1)和垂直于所述底板的四個側(cè)壁(2)組成的方形平皿;所述方形平皿中至少有兩個相對的所述側(cè)壁(2)可拆卸;所述底板(1)上表面設(shè)有十字形坐標網(wǎng)線。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:沈國棟,胡世蓮,程民,徐維平,徐婷娟,王衛(wèi)東,
申請(專利權(quán))人:安徽省立醫(yī)院,
類型:實用新型
國別省市:
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