片狀細胞培養物解離系統技術方案

一種用于將片狀細胞培養物解離成單個細胞的系統，其為在將片狀的細胞培養物解離成單個細胞時用于使細胞的損傷達到最低限度的系統，所述系統包括：（i）使片狀細胞培養物解離的反應部，（ii）用于獲取存在于反應部內的細胞的粒度分布的相關信息的傳感器部、以及（iii）由傳感器部所獲取的信息計算細胞的粒度分布、判斷并輸出解離狀態的解析部。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及用于解離片狀的細胞培養物的系統及方法、以及用于評價片狀的細胞培養物的解離狀態的系統及方法。
技術介紹
雖然近年心臟病治療在不斷革新進步，但仍然沒有建立起重癥心力衰竭的治療體系。作為心力衰竭的治療法，進行的是利用β阻滯劑、ACE抑制劑的內科治療，但對于這些治療不很奏效的重癥化的心力衰竭，則進行輔助人工心臟、心臟移植等置換型治療，也即外科治療。這類成為外科治療對象的重癥心力衰竭包括多種起因，如進行性心臟瓣膜癥、高 度的心肌缺血所致、急性心肌梗塞和其合并癥、急性心肌炎、缺血性心肌病(ICM)、擴張型心肌病(DCM)等所致的慢性心力衰竭及其急性加重等。根據上述原因和重癥度，而應用瓣膜成形術/置換術、冠狀動脈架搭橋術、左心室成形術、機械輔助循環等。其中，對于ICM、DCM所致的高度左心室功能低下導致的心力衰竭而言，僅僅心臟移植和利用了人工心臟的置換型治療可以視為其的有效治療方法。但是，這些重癥心力衰竭患者的置換型治療存在慢性的供體不足、需要持續進行免疫抑制、引發合并癥等很多需要解決的問題，難以稱為適用于所有重癥心力衰竭的普適治療法。由于這樣嚴峻的心臟移植現狀，在一個時期內曾嘗試進行巴提斯塔(Batistaoperation)術等其它外科治療，雖然作為心臟移植的代替治療而廣受關注，但最近這些手術的限制也逐漸顯現，需要在手術法的改良和適應性的確立方面繼續努力。由這樣的現狀出發，作為重癥心力衰竭治療的解決方案，正在不斷推進新型再生醫療的開發。在重癥心肌梗塞等中，心肌細胞陷入功能衰竭，進而發生成纖維細胞的增殖、間質纖維化，而呈現心力衰竭。隨著心力衰竭的加重，心肌細胞受損直至細胞死亡，由于心肌細胞幾乎不發生細胞分裂，因此心肌細胞數減少，心臟功能下降進一步加劇。對于這類重癥心力衰竭患者的心臟功能恢復而言，細胞移植法被認為是有用的，并已經開始了自身骨骼肌成肌細胞的臨床應用。近年，針對這些問題，通過使用利用組織工程學的溫度響應性培養皿，提供一種包括來自于成體心肌以外部分的細胞的、能夠用于心臟的三維結構的片狀細胞培養物和其制造方法(專利文獻I)。在臨床應用這樣的細胞培養物時，為了確保其有效性、安全性，需要通過實施品質試驗來進行品質管理。并且，在進行片狀的細胞培養物的品質試驗時，還需要對構成細胞培養物的細胞的細胞數、存活性、純度等進行確認，但為了進行這些評價，利用酶將細胞培養物消化等而解離成單個細胞也是必不可少的。現狀是，細胞培養物的解離例如如下進行將細胞培養物放入管中，加入胰蛋白酶等酶，在培養箱內通過酶反應進行細胞間結合的解離，在規定時間后由培養箱取出，攪拌管內，確認細胞培養物的解離狀態，在未完全解離時，再次放入培養箱內，然后手動重復同樣的操作直至細胞培養物完全解離。為了適當進行解離細胞的評價，利用酶反應的細胞培養物的解離需要充分進行使得不殘留細胞塊等。另一方面，當酶反應時間過長時會損傷細胞，從而不適合進行細胞的評價。因此，用于細胞培養物的解離的酶反應需要設置為必要的最低限度，為了適當進行細胞培養物的解離，需要在酶反應中再三確認解離的狀態。但是，截至目前尚不存在用機械收到評價細胞培養物的解離狀態的手段，需要操作者以肉眼進行確認，難以使酶反應時間達到最佳且導致操作者勞動量的增大。現有技術文獻專利文獻專利文獻I :日本特開2007 - 528755號公報
技術實現思路
·專利技術要解決的問題本專利技術涉及的是，為了對用于人及動物的疾病、傷病的治療的片狀的細胞培養物進行品質管理，通過酶消化等將細胞培養物適當解離。為了適當進行解離細胞的特性確認，需要以不傷害細胞的必要的最低限度的解離操作來制備可靠地進行了解離的、不殘留細胞塊的細胞。本專利技術的目的在于提供能夠簡便可靠地進行構成細胞培養物的細胞的解離操作的系統，以制備適合實施片狀細胞培養物的品質管理的細胞。_9] 用于解決問題的方案本專利技術人發現，為了在解離片狀細胞培養物時獲得適合品質管理的細胞，需要加入胰蛋白酶等細胞解離劑并在適于酶反應的溫度條件下邊適當攪拌邊頻繁地確認細胞的解離狀態。并且發現，超過必要量的酶處理、攪拌操作會損傷細胞，進而會增大污染的風險，因此應使解離處理停止于最低限度，反復進行研究結果發現，可以基于細胞的粒度分布用機械手段評價片狀細胞培養物的解離狀態，使全部作業自動化，從而完成了本專利技術。gp，本專利技術涉及以下方案。(I) 一種用于將片狀細胞培養物解離成單個細胞的系統，其包括(i)使片狀細胞培養物解離的反應部，(ii)用于獲取存在于反應部內的細胞的粒度分布的相關信息的傳感器部，以及(iii)由傳感器部所獲取的信息計算細胞的粒度分布、判斷并輸出解離狀態的解析部。(2)根據上述(I)所述的系統，其中，片狀細胞培養物含有骨骼肌成肌細胞。(3)根據上述(I)或(2)所述的系統，其包括用于對反應部內的細胞的解離進行調整的反應調整部。(4)根據上述(3)所述的系統，反應調整部包括環境調整部、化學作用調整部及機械作用調整部中的至少一者。(5)—種用于在將片狀細胞培養物解離成單個細胞的處理中判斷片狀細胞培養物的解離狀態的系統，其包括(i)獲取接受解離處理的片狀細胞培養物中的細胞的粒度分布的相關信息的傳感器部，和(ii)由傳感器部所獲取的信息計算細胞的粒度分布、判斷并輸出解離狀態的解析部。(6) 一種將片狀細胞培養物解離成單個細胞的方法，其包括(i)將片狀細胞培養物供于解離處理的工序，(ii)獲取接受解離處理的片狀細胞培養物的細胞的粒度分布的相關信息的工序，和(iii)由獲取的信息計算細胞的粒度分布、判斷并輸出解離狀態的工序。(7) —種判斷片狀細胞培養物的解離狀態的方法，其包括基于接受解離處理的片 狀細胞培養物中的細胞的粒度分布判斷并輸出解離狀態的工序。(8)根據上述(6)或(7)所述的方法，片狀細胞培養物含有骨骼肌成肌細胞。專利技術的效果根據本專利技術的系統，由于調制了適合實施片狀細胞培養物的品質管理的細胞，因此不僅能夠簡便、可靠且自動地進行構成片狀細胞培養物的細胞的解離操作、使解離操作對細胞的損傷降至最低，而且能夠大幅消減操作者的勞動量。此外，通過與細胞培養用的培養箱以及片狀細胞培養物的剝離裝置、用于解析解離細胞的特性的裝置如用于測定細胞數的細胞計數裝置(例如 y々 >公司制造的庫爾特(coulter)計數器)、用于測定存活性的死活細胞自動測定裝置、用于測定純度的流式細胞儀一體化，還能夠使從細胞的培養、片狀的細胞培養物的制作、至其品質管理實現自動化。附圖說明圖I是本專利技術系統的一個方式的框圖。圖2是本專利技術系統的一個方式的解離判定處理的流程圖。圖3是進行了解離的、不含聚集物的片狀細胞培養物的粒度分布圖。圖4是解離過程中的、含有聚集物的片狀細胞培養物的粒度分布圖。圖5表不本專利技術系統的一個方式的整體圖。圖6表不本專利技術系統的一個方式的部分剖面圖。圖7是本專利技術系統的一個方式中的解離判定處理的流程圖。圖8是本專利技術系統的一個方式中的溫度調整子程序處理的流程圖。具體實施例方式本專利技術涉及用于將片狀細胞培養物解離成單個細胞的系統，所述系統包括(i)使片狀細胞培養物解離的反應部，(ii)用于獲取存在于反應部內的細胞的粒度分布的相關信息的傳感器部(iii)由傳感器部所獲取的信息計算細胞的粒度分布、判斷本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：山本敬，
申請(專利權)人：泰爾茂株式會社，
類型：
國別省市：