用于治療腸炎的益生菌組合物制造技術(shù)

所述組合物包含有效量的植物乳桿菌CECT7484、植物乳桿菌CECT7485和乳酸片球菌CECT7483。該組合物可用于治療胃腸道疾病或病癥，諸如炎性腸病、腸易激綜合征或腹部膨脹和氣脹。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來(lái)華專(zhuān)利技術(shù)】用于治療腸炎的益生菌組合物本申請(qǐng)要求2010年I月28日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/299，116和歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)EP10151998的權(quán)益，它們通過(guò)引用并入本文。本專(zhuān)利技術(shù)涉及醫(yī)學(xué)、微生物學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域，并具體地，涉及一種新穎的益生菌組合物。具體地，已經(jīng)分離出植物乳桿菌iLac tobaciIlus plan tarum )和乳酸片球菌(.Pediococcus acidilaciici )的新菌株，并組合在可用于治療胃腸道疾病(諸如腸炎(例如，炎性腸病)和腸易激綜合征)的制劑中。
技術(shù)介紹
潰瘍性結(jié)腸炎(UC)、隱窩炎和克羅恩氏病是炎性腸病(IBD)的實(shí)例，所述炎性腸病的特征在于腸中的慢性炎癥。臨床癥狀是腹瀉、腹痛、偶然性直腸出血、體重減輕、疲倦和 有時(shí)發(fā)熱。盡管會(huì)發(fā)生在任何年齡，IBD最常見(jiàn)于青少年和年輕的成年人中，所以這些人可能遭受延遲的發(fā)育和矮化的生長(zhǎng)。在歐洲和美國(guó)，該疾病的頻率與I型糖尿病類(lèi)似。IBD的臨床進(jìn)程有很大差異。具有輕度至中度征狀的患者無(wú)需住院治療。但是，10-15%的患者會(huì)發(fā)生該疾病的嚴(yán)重進(jìn)程，其在許多情況下繼之以外科手術(shù)。在醫(yī)學(xué)上，通過(guò)減少炎癥并從而控制胃腸道征狀來(lái)治療IBD。但是，目前尚不能在醫(yī)學(xué)上治愈IBD。結(jié)腸切除術(shù)可以消除UC，但是會(huì)降低生活質(zhì)量和增加并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。可利用的醫(yī)學(xué)治療包括使用5-對(duì)氨水楊酸(5-ASA)、皮質(zhì)類(lèi)固醇和免疫調(diào)節(jié)藥物。通常使用5-ASA進(jìn)行輕度至中度IBD征狀的長(zhǎng)期治療,而皮質(zhì)類(lèi)固醇和免疫調(diào)節(jié)藥物被用于治療嚴(yán)重的征狀。腹瀉或腹痛作為5-ASA的副作用而出現(xiàn)，而皮質(zhì)類(lèi)固醇的長(zhǎng)期使用經(jīng)常顯示出嚴(yán)重的副作用，包括骨質(zhì)減輕、感染、糖尿病、肌肉消瘦和精神病學(xué)障礙。免疫調(diào)節(jié)藥物會(huì)抑制免疫系統(tǒng)，這會(huì)控制IBD征狀。但是，產(chǎn)生的免疫受損的狀態(tài)會(huì)使患者易感許多疾病。腸易激綜合征(IBS)是一種特征在于腹痛和/或不適的病癥，其與改變的大便習(xí)慣或排便有關(guān)，其中征狀不能通過(guò)結(jié)構(gòu)或生化異常來(lái)解釋。緊迫性、氣脹和不完全腸運(yùn)動(dòng)的感覺(jué)也常見(jiàn)于IBS中。因此，它被歸類(lèi)在功能性胃腸道病癥中，所述功能性胃腸道病癥包括下述疾病諸如功能性氣脹、非心源性胸痛、非潰瘍性消化不良和慢性便秘或腹瀉(Longstreth G. H.等人，2006)。值得注意的是，IBS對(duì)發(fā)病率和超出腹痛和不適以外的生活質(zhì)量具有重大影響，因?yàn)橛嘘P(guān)的征狀會(huì)影響患者的健康感和正常地起功能的能力(Dean B. B.等人，200δ)。在用于治療IBS的藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域，存在大量活動(dòng)。在這點(diǎn)上，不同的抗抑郁藥已經(jīng)獲得普及，盡管它們?cè)谂R床試驗(yàn)中的效力是不大的，并且它們的臨床實(shí)用性受到不利副作用的限制。血清素能性藥劑已經(jīng)表現(xiàn)出對(duì)IBS的總體征狀的效力。但是，最近關(guān)于安全性的憂慮已經(jīng)嚴(yán)重地限制了它們的應(yīng)用。因此，IBS的新穎療法的開(kāi)發(fā)具有極大利益。益生菌被定義為“活的微生物，其在以特定數(shù)目攝入以后，會(huì)發(fā)揮超出固有的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)以外的健康益處”(Araya Μ.等人，2002; Guarner F.等人，1998)。來(lái)自雙歧桿菌屬的幾種乳酸細(xì)菌和種是益生菌，這暗示，已經(jīng)證實(shí)它們會(huì)促進(jìn)特定健康效應(yīng)。益生細(xì)菌必須滿(mǎn)足與沒(méi)有毒性、生存力、附著和有益效果有關(guān)的幾個(gè)要求。這些益生菌特征是菌株依賴(lài)性的，甚至在相同種的細(xì)菌之間是不同的。因此，重要的是，找到具有在所有益生菌要求方面具有更好性能的那些菌株。已經(jīng)進(jìn)行了使用單獨(dú)的或與抗生素相組合的益生菌的人臨床試驗(yàn)，以鑒別這樣的菌株和/或制劑其用于治療具有IBD或IBS的患者，或用于保持已經(jīng)治療過(guò)的IBD患者處于緩解中。WO 96/29083和EP 554418公開(kāi)了 2種寄居于腸的乳桿菌屬菌株，包括植物乳桿菌 299v (DSM 6595)和干釀乳桿菌(ZacioAaciBw1S casei )鼠李糖亞種( / · Rhamnosus)271 (DSM 6594)。EP 415941公開(kāi)了用于制備營(yíng)養(yǎng)組合物的方法，所述方法包括用酶處理燕麥粥，然后與乳桿菌混合。美國(guó)專(zhuān)利7195906公開(kāi)了從切除的并洗過(guò)的人胃腸道中分離出的雙歧桿菌屬菌株，其用于治療炎性疾病，特別是胃腸道炎癥性活動(dòng)，諸如IBD和IBS。盡管具有有前途的潛力，需要大幅提高用于治療炎性腸病(諸如IBD)以及其它胃腸道疾病(諸如IBS)的益生菌的效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的專(zhuān)利技術(shù)人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，包含乳桿菌屬和片球菌屬菌株的組合物可有效地治療腸炎。具體地，已經(jīng)分離出3種屬于植物乳桿菌屬和乳酸片球菌屬的新的益生菌菌株，所述菌株當(dāng)組合進(jìn)單一制劑形式時(shí)會(huì)有效地治療腸炎。因而，在第一個(gè)方面，本專(zhuān)利技術(shù)提供了一種組合物，所述組合物包含有效量的植物乳桿菌CECT 7484、植物乳桿菌CECT 7485和乳酸片球菌CECT 7483或其突變體或變體。植物乳桿菌菌株CECT 7485和CECT 7484以及乳酸片球菌菌株CECT 7483于2009年2月4日保藏在西班牙典型培養(yǎng)物保藏中心(Valencia，西班牙)。所有3種保藏的菌株都是活的，并保持與它們的保藏有關(guān)的所有特征。本文使用的術(shù)語(yǔ)“有效量”是指這樣的活性劑的量其足夠高以遞送希望的益處，但是足夠低以避免在醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)的嚴(yán)重副作用。顯而易見(jiàn)，通過(guò)使用保藏的菌株作為原料，本領(lǐng)域的技術(shù)人員通過(guò)常規(guī)誘變或重新分離技術(shù)可以常規(guī)地得到其它突變體或其衍生物，它們保留或增強(qiáng)本文所述的形成本專(zhuān)利技術(shù)組合物的菌株的有關(guān)特征和優(yōu)點(diǎn)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)判斷用于測(cè)定菌株的抗炎活性、免疫調(diào)節(jié)活性或抗-IBS活性或抗-腹部氣脹活性的適當(dāng)方法。在下面的實(shí)施例中，顯示了用于測(cè)量該活性的可行方法的實(shí)例。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述突變體是遺傳修飾的突變體。在本專(zhuān)利技術(shù)的第一方面的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述變體是天然存在的變體。形成本專(zhuān)利技術(shù)的第一方面的組合物的一部分的菌株，可以是活細(xì)胞的形式。或者，所述菌株可以是非活細(xì)胞的形式。通常使用的菌株乳酸片球菌CECT 7483、以及植物乳桿菌CECT 7484和CECT 7485是活細(xì)胞的形式。但是，也可以延伸至非活細(xì)胞，諸如含有由乳酸片球菌CECT 7483、以及植物乳桿菌CECT 7484和CECT 7485生產(chǎn)的有益因子的殺死的培養(yǎng)物或組合物。這可以包括熱殺死的微生物或通過(guò)暴露于改變的pH、聲處理、輻射或遭受壓力而殺死的微生物。由于非活細(xì)胞產(chǎn)品制備更簡(jiǎn)單，可以將細(xì)胞容易地?fù)饺胨幬镏校屹A存要求的限制比活細(xì)胞少很多。當(dāng)以本專(zhuān)利技術(shù)的組合物的形式使用時(shí)，所述菌株優(yōu)選地具有1:1:1的濃度比。菌株CECT 7483,CECT 7484和CECT 7485表現(xiàn)出針對(duì)幾種病原性的和潛在病原性的細(xì)菌菌株的顯著抑制活性，同時(shí)表現(xiàn)出針對(duì)人胃腸道菌叢(flora)的常見(jiàn)共生菌株的微小拮抗作用。此外，這3種菌株表現(xiàn)出它們之間的顯著抑制活性的缺乏，因而允許它們組合使用在單一制劑中。這是適當(dāng)?shù)模驗(yàn)檫@意味著，在本專(zhuān)利技術(shù)的第一方面定義的組合物會(huì)在腸中發(fā)揮有益效果，這是由于3種菌株中的每一種的“完整”作用。將這些菌株組合成單一配方(即本專(zhuān)利技術(shù)的組合物)，會(huì)在不同的腸炎動(dòng)物模型中表現(xiàn)出改善臨床癥狀(諸如體重減輕和腹瀉)的能力。與這些結(jié)果相一致，本專(zhuān)利技術(shù)的組合物顯示出顯著減少急性(IL-6)和慢性(IFNy )細(xì)胞因子的獨(dú)特能力。多個(gè)乳酸細(xì)菌種具有明顯(appar本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來(lái)華專(zhuān)利技術(shù)】...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：J埃斯帕達(dá)勒馬佐，J庫(kù)內(nèi)卡斯特拉納，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：AB生物學(xué)有限公司，
類(lèi)型：
國(guó)別省市：