本發明專利技術公開了促紅細胞生成素微球在制備治帕金森病藥物中的應用，所述的促紅細胞生成素微球是：自然提取的促紅細胞生成素、基因重組表達促紅細胞生成素、聚乙二醇修飾的促紅細胞生成素、糖基化修飾的促紅細胞生成素或人血清融合的促紅細胞生成素中的一種與多糖制備成顆粒，所述顆粒再與緩釋材料制備成微球。本發明專利技術的優點在于：發掘了促紅細胞生成素微球的新醫療用途，開拓了一個新的應用領域，促紅細胞生成素微球治療和預防帕金森病具有長效緩釋、無毒副作用、順應性好、減輕病人痛苦、價格低等優點，易于被患者接受，促紅細胞生成素微球制備工藝簡單，對環境友好，在治療和預防帕金森病中有良好的應用前景。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及促紅細胞生成素微球的新用途，具體地說，是促紅細胞生成素微球在制備治帕金森病藥物中的用途。
技術介紹
帕金森病(Parkinson’ s disease, PD)是中老年人常見的神經系統退行性疾患，主要與黑質致密區多巴胺能神經元變性缺失及由此造成的黑質紋狀體通路多巴胺遞質減少有關。經過多年的臨床實踐，一般認為，左旋多巴仍是最有效的治療帕金森病藥物。但左旋多巴長期應用后，大部分患者會出現癥狀波動、異動癥(levodopa-induced dyskinesia,LID)和精神癥狀，即H)運動并發癥，加之實驗室發現高濃度多巴胺(dopamine，DA)和左旋 多巴會由于自身氧化產生自由基，可導致神經細胞變性壞死，因此，聯合其他藥物共同預防和治療ro病癥十分迫切。研究發現紋狀體GRKs和Arrestins表達的變化與H)的發展關系密切。近年研究表明，PD運動并發癥的發生與表達Dl受體的直接通路及其下游cAMP依賴性蛋白激酶(PKA)、ERK等信號轉導通路被激活關系密切，其下游信號轉導蛋白多巴胺和環磷腺苷調節的憐酸化蛋白 _32 (dopamine and cAMP-regulated phosphoprotein of Mr 32000,DARPP-32)的蛋白Thr75位點磷酸化表達的改變可能參與了異動癥的發病。目前認為使用左旋多巴控釋劑、多巴胺受體激動劑、B型單胺氧化酶(monoamineoxidase-B type,MA0_B)抑制劑和兒茶酌·-氧位-甲基轉移酶抑制劑(eateehol-O-methyltransferase inhibitor, C0MTI)可延緩運動并發癥的出現。但是西藥預防和治療產生的副作用較大，容易形成耐藥性，不宜長期服用。促紅細胞生成素(Erythropoietin, ΕΡ0)是一種參與調節紅細胞前體細胞分化、增殖、抑制凋亡的糖蛋白激素，可以增加紅血球的數目。近年來越來越多的研究表明，EPO在神經發育、神經保護和成年神經元修復、生存、再生過程中均發揮著非常廣泛和復雜的作用，而且認為它的神經保護作用是一種不依賴于其促進紅細胞生成功能的直接作用。另外，EPO及其受體(Erythropoietin receptor, EPO-R)在哨齒類、哺乳類及人類的神經元和膠質細胞均有表達。關于促紅細胞生成素對H)模型的保護作用及其機制的實驗研究已有報道，但是關于促紅細胞生成素與多糖、緩釋材料制備的微球在治療和預防H)病癥藥物中的應用還未見報道。
技術實現思路
本專利技術的目的是針對現有技術中的不足，提供一種促紅細胞生成素微球在制備治帕金森病藥物中的應用。為實現上述目的，本專利技術采取的技術方案是促紅細胞生成素微球在制備治帕金森病藥物中的應用，所述的促紅細胞生成素微球是自然提取的促紅細胞生成素、基因重組表達促紅細胞生成素、聚乙二醇修飾的促紅細胞生成素、糖基化修飾的促紅細胞生成素或人血清融合的促紅細胞生成素中的一種與多糖制備成促紅細胞生成素多糖顆粒，所述促紅細胞生成素多糖顆粒再與緩釋材料制備成促紅細胞生成素微球。所述的促紅細胞生成素多糖顆粒是指促紅細胞生成素與多糖在聚乙二醇溶液中通過冷凍干燥或噴霧干燥制備得到，所述多糖是葡聚糖或海藻酸鈉中的一種。所述的緩釋材料為聚乳酸(PLA)、聚羥基乙酸-聚乳酸(PLGA)、聚己內酯(PCL)、聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)或聚羥基乙酸-聚乳酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)中的一種。所述的促紅細胞生成素微球是通過水包油-油包固(S/0/W)的方法或水包油-油包油-油包固(S/0/0/W)的方法制備得到。所述的促紅細胞生成素微球是通過皮下注射或顱內注射。 所述的促紅細胞生成素微球的注射劑量為10萬單位 500萬單位/kg。所述的促紅細胞生成素微球的注射頻率為7天 60天一次。本專利技術優點在于 1、本專利技術發掘了促紅細胞生成素微球的新醫療用途，開拓了一個新的應用領域； 2、該促紅細胞生成素微球作為藥物治療和預防ro病癥具有長效緩釋、無毒副作用、順應性好、減輕病人痛苦、價格低等優點，易于被患者接受； 3、促紅細胞生成素微球制備工藝簡單，對環境友好，在治療和預防ro病癥中有良好的應用前景。附圖說明附圖I是大鼠腦脊液EPO含量結果。附圖2是免疫組化檢測大鼠腦內EPO結果。附圖3是免疫組化檢測大鼠腦內EPO-R結果。附圖4是免疫組化檢測大鼠黑質TH細胞結果。附圖5是大鼠腦內黑質多巴胺能神經元計數結果。附圖6是大鼠黑質TH的檢測結果。附圖7是大鼠紋狀體TH的檢測結果。具體實施例方式下面結合附圖對本專利技術提供的具體實施方式作詳細說明。實施例I促紅細胞生成素微球的制備 一、制備促紅細胞生成素多糖顆粒 ①用超純水分別制備10% (w/w)的聚乙二醇(PEG)水溶液和10% (w/w)的葡聚糖水溶液。精確稱取SOOmg自然提取的促紅細胞生成素溶于7.2ml超純水中待用。②在0°C 4°C條件下，將上述的葡聚糖水溶液、促紅細胞生成素水溶液和PEG水溶液按照體積比為1: 1: 5、1: 1:10、1: 1:20或1: 1:40的比例混合，然后旋渦震蕩30s 60s充分混勻。③將促紅細胞生成素、PEG和葡聚糖形成的混合溶液冷凍過夜，然后真空冷凍干燥。④將步驟③所得的樣品用二氯甲烷洗滌三次除去PEG連續相，獲得載促紅細胞生成素多糖顆粒。得到的促紅細胞生成素多糖顆粒的粒徑為O. 3 5μπι，這些玻璃體顆粒光滑圓整，粒徑分布均勻，促紅細胞生成素的結構得到較好的保護，避免了在劑型制備過程中失活。二、制備促紅細胞生成素微球 ①稱取Ig聚乙烯醇(PVA)和5g NaCl，加超純水94g，然后加熱、攪拌，至PVA完全溶脹，停止加熱，繼續緩慢攪拌，待溶液呈澄清透明且無氣泡后，停止攪拌，放于4°C冰箱待用。該溶液中PVA濃度為1% (w/w), NaCl濃度為5% (w/w)。②精確稱取緩釋材料聚羥基乙酸-聚乳酸(PLGA) 200mg，加二氯甲烷800mg，漩渦振蕩，使PLGA溶于二氯甲烷中，得PLGA的二氯甲烷溶液，濃度為20 % (w/w)，現用現配，以 防二氯甲烷揮發。③稱取促紅細胞生成素多糖顆粒10mg，均勻分散于O. 5g步驟②中的PLGA的二氯甲燒溶液中，磁力攪拌15min,轉速1800rpm,充分攪拌使得促紅細胞生成素多糖顆粒均勻分散于PLGA的二氯甲烷溶液中，將所得初乳分散于含I % (w/w) PVA和5% (w/w)氯化鈉的水溶液中，以2200rpm的轉速勻衆成復乳(S/0/W),于Imin內轉移到4°C的10% (w/w)氯化鈉的水溶液中固化，攪拌3 4小時后收集陳化的蛋白微球，用超純水洗滌三次，在冰相預凍過夜，再真空冷凍干燥，制得粒徑在50 μ m 120 μ m的微球。需要說明的是，促紅細胞生成素還可以是基因重組表達促紅細胞生成素、聚乙二醇修飾的促紅細胞生成素、糖基化修飾的促紅細胞生成素或人血清融合的促紅細胞生成素中的一種。所述的促紅細胞生成素多糖顆粒還可以是促紅細胞生成素與多糖在聚乙二醇溶液中通過噴霧干燥制備得到，所述多糖還可以是海藻酸鈉。所述的緩釋材料還可以是聚乳酸(PLA)、聚己內酯(PCL)、聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)或聚羥基乙酸-聚乳酸-本文檔來自技高網...
【技術保護點】
促紅細胞生成素微球在制備治帕金森病藥物中的應用，其特征在于，所述的促紅細胞生成素微球是：自然提取的促紅細胞生成素、基因重組表達促紅細胞生成素、聚乙二醇修飾的促紅細胞生成素、糖基化修飾的促紅細胞生成素或人血清融合的促紅細胞生成素中的一種與多糖制備成促紅細胞生成素多糖顆粒，所述促紅細胞生成素多糖顆粒再與緩釋材料制備成促紅細胞生成素微球。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉振國，袁偉恩，戚辰，張奇昕，
申請(專利權)人：上海交通大學醫學院附屬新華醫院，
類型：發明
國別省市：
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