本發明專利技術涉及分子生物學技術，具體的說一種對累代選育對蝦新品種的鑒定方法。采用線粒體控制區的引物擴增并測序待鑒定群體的線粒體控制區；將測序所得線粒體控制區符合累代選育群體單倍型的待鑒定群體再利用5對微衛星位點進行擴增，將擴增所的產物進行微衛星分型；而后利用微衛星分型數據進行判別分析，進而得到累代選育對蝦新品種；采用本發明專利技術通過分子標記進行鑒定，可以克服表型特征難以鑒別累代選育新品種的困難，可以在對蝦個體較小時完成檢測，不受對蝦發育時期和個體大小的影響，可以提高鑒定的準確率，通過該鑒別方法，可以實現累代選育對蝦新品種的鑒別。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及分子生物學技術，具體的說是。
技術介紹
凡納濱對蝦是我國和世界上目前養殖面積最大,產量最高的對蝦，占我國對蝦養殖產量的81 世界對奸養殖產量的66%。良好的種質資源,是凡納濱對奸養殖業健康持續發展的先決條件，因此凡納濱對蝦的人工選育工作的開展引起科研人員和企業的高度重視。結合家系選育和群體選育，凡納濱對蝦選育工作可以實現優良生產性狀如生長快、抗逆性強、抗病力高等的選擇，提高餌料系數、養成率和產量，相比于普通的未經選育的群體具有較大的優勢。自張留所(張留所，相建海凡納濱對蝦微衛星位點在兩個選育家 系中遺傳的初步研究.遺傳2005，27(6):6)等報道選育工作開展后，陳錨(陳錨，吳長功，相建海，黃皓，劉小林，劉翠紅，何建國，孫成波凡納濱對蝦的選育與家系的建立.海洋科學2008，32(11) :5)、黃永春(黃永春，艾華水，殷志新，黃仙德，李色東，翁少萍，何建國凡納濱對蝦抗WSSV選育家系的抗病與生長特性.臺灣海峽2011，30(3))、梁華芳(梁華芳，杜國平，黃海立，吳灶和，葉富良，邱德全，孫成波凡納濱對蝦快速生長家系選育的初步研究.廣東海洋大學學報2011，31(3))等均報道了選育工作的開展，選育群體與未經選育的群體間生長性狀、抗病性狀均有顯著差異。2010年以來，相繼有三個凡納濱對蝦新品種獲得批準，分別是“中科一號”、“科海一號”和“中興一號”。然而在實際生產中，這些累代選育的新品種之間的表型差異較小，很難通過外觀的差異將其區分，這給引種鑒定和更進一步的選擇育種研究帶來了很大困難，因此亟需建立一種對累代選育對蝦新品種進行鑒定的方法。微衛星標記是近年發展起來的用于遺傳多樣性研究技術，因其具有高效、多態、共顯性標記等特點，特別適合研究種群的遺傳變異和分化，成為針對家系或品種鑒別的主要手段。目前的對蝦選育是通過針對某一性狀的累代選育，其遺傳特性上趨于均一化，且由于是在某一基礎群上進行的選育，因此來源較為單一，這就為通過微衛星和線粒體控制區域進行種質鑒定提供了可能。
技術實現思路
本專利技術目的在于提供一種對累代選育對蝦新品種進行鑒定的方法。為實現上述目的本專利技術采用的技術方案為—種對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，采用線粒體控制區的引物擴增并測序待鑒定群體的線粒體控制區；將擴增所得線粒體控制區序列符合累代選育群體單倍型的待鑒定群體再利用5對微衛星位點進行擴增，將擴增所的產物進行微衛星分型；而后利用微衛星分型數據進行判別分析，進而得到累代選育對蝦新品種；所述5對微衛星位點引物為權利要求1.一種對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于采用線粒體控制區的引物擴增并測序待鑒定群體的線粒體控制區；將擴增所得線粒體控制區序列符合累代選育群體單倍型的待鑒定群體再利用5對微衛星位點引物進行擴增，將擴增所的產物進行微衛星分型；而后利用微衛星分型數據進行判別分析，進而得到累代選育對蝦新品種； 所述5對微衛星位點引物為2.按權利要求I所述對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于所述累代選育對蝦新品種為凡納濱對蝦“科海一號”。3.按權利要求2所述對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于采用線粒體控制區的引物擴增待鑒定群體的線粒體控制區；將擴增所得序列具SEQID1、SEQID2和/或SEQID3所示序列的待鑒定群體再利用5對微衛星位點進行擴增，將擴增所的產物進行微衛星分型；將分型數據進行轉換，利用判別公式進行對累代選育對蝦新品種的鑒別；判別公式為Zl=-4. 00561+5. 40776*Χ1+2. 08033^X2+1. 41601*Χ3+1· 97728^X4+2. 21149*Χ5Z2=-l. 15643+0. 30931*Χ1+0. 14533^X2+0. 61950^X3+1. 2762(^X4+0. 79256*Χ5 其中Χ1、Χ2、Χ3、Χ4、Χ5分別為五個微衛星位點分型的轉化數據。4.按權利要求3所述對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于將所述微衛星分型數據進行轉換，將含有累代選育對蝦新品種特異性標記的記為1，不含有特異性標記的記為O。5.按權利要求4所述對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于所述判別公式中Ζ1>Ζ2為累代選育對蝦新品種，ΖΚΖ2為其他群體。6.按權利要求I所述對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于所述線粒體控制區的引物對為CRF: 5 ’ -ACCATTGACCTAAAAGTGAAAGAAC-3，CRR: 5 ’ -ATCAATAAATATAAATTAACTACGC-3，。全文摘要本專利技術涉及分子生物學技術，具體的說一種對累代選育對蝦新品種的鑒定方法。采用線粒體控制區的引物擴增并測序待鑒定群體的線粒體控制區；將測序所得線粒體控制區符合累代選育群體單倍型的待鑒定群體再利用5對微衛星位點進行擴增，將擴增所的產物進行微衛星分型；而后利用微衛星分型數據進行判別分析，進而得到累代選育對蝦新品種；采用本專利技術通過分子標記進行鑒定，可以克服表型特征難以鑒別累代選育新品種的困難，可以在對蝦個體較小時完成檢測，不受對蝦發育時期和個體大小的影響，可以提高鑒定的準確率，通過該鑒別方法，可以實現累代選育對蝦新品種的鑒別。文檔編號C12Q1/68GK102888459SQ20121038463公開日2013年1月23日 申請日期2012年10月11日 優先權日2012年10月11日專利技術者相建海, 于洋, 張曉軍, 李富花 申請人:中國科學院海洋研究所本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種對累代選育對蝦新品種的鑒定方法，其特征在于：采用線粒體控制區的引物擴增并測序待鑒定群體的線粒體控制區；將擴增所得線粒體控制區序列符合累代選育群體單倍型的待鑒定群體再利用5對微衛星位點引物進行擴增，將擴增所的產物進行微衛星分型；而后利用微衛星分型數據進行判別分析，進而得到累代選育對蝦新品種；所述5對微衛星位點引物為：引物名序列引物名序列KHv1F5’？TTACCGCCTAAGAGCGAATG？3’KHv1R5’？TGTCCTTTCGTACCAGTCAAG？3’KHv2F5’？GATGTACACAACTGTACTTCG？3’KHv2R5’？GAGATGATAAGAGAACGAAAG？3’KHv3F5’？GAGAGCAAATAAGAAAGGGC？3’KHv3R5’？AGGATGCAAATGATAACGAG？3’KHv4F5’？CGAAGAGATTTATCCAGGG？3’KHv4R5’？CGTGCATTATTATCCTTTCC？3’KHv5F5’？ATGCTGCATCATCTCTGAC？3’KHv5R5’？AGGAAAAGACGGTGAAATAG？3’
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：相建海，于洋，張曉軍，李富花，
申請(專利權)人：中國科學院海洋研究所，
類型：發明
國別省市：
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