本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種泡騰片式低分子膠原蛋白肽及其制備方法，主要步驟為：去除非膠原性蛋白、生物酶脫脂、溶膠、胰蛋白酶酶解、硅藻土和大孔樹脂聯(lián)合脫色、濃縮干燥、與多種有益原料混合壓制成泡騰片。它在傳統(tǒng)工藝的基礎(chǔ)上，優(yōu)化溶膠和酶解的工藝條件，得到分子量集中分布在500~1600Da的膠原蛋白肽，簡化后續(xù)工藝操作，降低生產(chǎn)成本，首次提出用硅藻土和大孔樹脂聯(lián)合對(duì)膠原蛋白肽液進(jìn)行脫色，脫色效果好，膠原蛋白肽損失少。在劑型方面引入泡騰片，在美容保濕的基礎(chǔ)上，皮膚透過性好，而且不添加任何防腐劑，使得本化妝品對(duì)人體皮膚更加安全有益。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及膠原蛋白肽提取及應(yīng)用領(lǐng)域，更加具體地說，具體涉及。
技術(shù)介紹
膠原蛋白或稱膠原是由動(dòng)物(從海綿動(dòng)物到脊椎動(dòng)物)細(xì)胞合成的一種生物高分子化合物，廣泛存在于動(dòng)物骨、腱、軟骨和皮膚及其它結(jié)締組織中，約占哺乳動(dòng)物總蛋白1/3，在骨頭與肌腱中約有90%以上，皮膚中約有50%以上的蛋白質(zhì)為膠原蛋白。而膠原蛋白的水解產(chǎn)物膠原蛋白肽具有抗血壓、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、護(hù)膚美容等眾多功效。蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生的膠原蛋白活性肽主要是以化學(xué)法和酶法水解而來，化學(xué)法以酸或堿斷開蛋白質(zhì)肽鍵，由于反應(yīng)環(huán)境較極端，不利于活性的保持，而酶解蛋白質(zhì)生產(chǎn)活性肽的安全性卻很高，能在溫和的條件下進(jìn)行定位水解分裂產(chǎn)生特定的肽，且水解過程易控制，因而近幾年報(bào)道 的活性肽的制備方法均為酶解法。酶的選擇是酶解法生產(chǎn)活性肽的關(guān)鍵，而目標(biāo)活性肽的下游技術(shù)則是決定能否將之用于生產(chǎn)的關(guān)鍵。對(duì)于化妝品級(jí)膠原蛋白肽而言，《皮膠原蛋白的酶法提取及在高附加值領(lǐng)域的應(yīng)用》、《化妝品級(jí)水解蛋白質(zhì)分子量分布的研究》等相關(guān)文獻(xiàn)指出分子量低于2KD或IKD左右的膠原蛋白肽可以很好地滲入人體皮膚，達(dá)到美容護(hù)膚的作用。CN102199649A、CN102154424A、CN102031279A等相關(guān)專利以超濾、納濾設(shè)備為基礎(chǔ)截獲低分子量的膠原蛋白肽，但是從膠原蛋白肽的提取率上說，這種純化方法有一定的局限性，并且成本較高。目前市面上的膠原蛋白化妝品分子量分布較寬，IKD的膠原肽的比重不高，直接影響膠原化妝品的質(zhì)量。并且絕大多數(shù)化妝品里都含有防腐劑，這增加了安全隱患。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法以及相對(duì)應(yīng)的泡騰片劑型和制備方法。不僅解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的化妝品中含有人體難以吸收的高分子膠原蛋白的問題，也解決了工業(yè)生產(chǎn)中膠原蛋白肽分布范圍寬，得率低的問題；同時(shí)首創(chuàng)了不含有防腐劑的膠原化妝品新劑型。本專利技術(shù)的技術(shù)目的通過下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，按照下述步驟進(jìn)行步驟1，除去豬皮中非膠原性蛋白質(zhì)選取新鮮豬皮(即原料豬皮)，清洗，浙干，常溫20-25攝氏度的條件下，用O. Imol/Γ0. 15mol/lNaOH水溶液浸泡，料液比為1:25 1:30 (g/ml,即豬皮的質(zhì)量和NaOH水溶液的體積比)，在100-200轉(zhuǎn)/min下攪拌18tT24h，以除去豬皮里非膠原性蛋白質(zhì)，然后過濾，得豬皮備用。步驟2，脫除豬皮中的脂肪按料液比為l:25 l:30(g/ml，即步驟I處理后的豬皮質(zhì)量和水的體積比)的比例取水，然后加入占原料豬皮質(zhì)量29Γ4%的脂肪酶，調(diào)整溫度和體系的pH值以使加入的脂肪酶活性達(dá)到最大，在100-200轉(zhuǎn)/min的攪拌條件下脫除脂肪。例如使用脂肪酶(天津市諾奧科技發(fā)展有限公司，型號(hào)IF-G-NL2)時(shí)，使用Na2CO3粉末調(diào)節(jié)pH值為9 9. 3，35°C恒溫低速100-200轉(zhuǎn)/min攪拌8h 10h。步驟3，溶膠將脫去脂肪的豬皮置于水中，料液比l:15 l:20(g/ml，即步驟2處理后的豬皮質(zhì)量和水的體積比)，800C的條件下恒溫加熱，低速100-200轉(zhuǎn)/min攪拌4tT6h，得到豬皮和水溶性膠原的混合物。步驟4，制備胰蛋白酶酶解蛋白肽溶液將上一步的豬皮和水溶性膠原的混合物降溫，同時(shí)調(diào)節(jié)混合物溶液的pH值以使加入的胰蛋白酶活性達(dá)到最大，加入胰蛋白酶，E/=100(T2500u/g (即每g原料豬皮對(duì)應(yīng)的胰蛋白酶活性為1000-2500U)，低速100-200轉(zhuǎn)/min攪拌18h_24h。然后將酶解后的蛋 白肽液滅酶活，離心除去不溶物，得到胰蛋白酶酶解蛋白肽液。利用使用胰蛋白酶(天津市諾奧科技發(fā)展有限公司，型號(hào)YDB-G-035)時(shí)，將上一步的豬皮和水溶性膠原的混合物降溫至50°C，保持50°C恒溫。調(diào)節(jié)混合物溶液的pH=7，加入胰蛋白酶，將酶解后的蛋白肽液置于95°C的環(huán)境下5-10min，以滅酶活。步驟5，蛋白肽液脫色配置2wt°/T4wt%的硅藻土的水溶液，抽濾，使濾紙表面形成一層均勻的硅藻土層，以此為過濾介質(zhì)，對(duì)蛋白肽液抽濾。抽濾后的蛋白肽液進(jìn)入樹脂柱進(jìn)行分離，得到澄清透明的膠原蛋白肽液。在使用D296R樹脂(南開大學(xué)化工廠，全稱為大孔強(qiáng)堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂)時(shí)，可控制流速為以2ml/min 6ml/min的流速進(jìn)入D296R型樹脂柱。步驟6，濃縮干燥將澄清透明的膠原蛋白肽液進(jìn)行真空濃縮和噴霧干燥得膠原蛋白肽粉末。在操作時(shí)，可在真空濃縮階段，待體系中出現(xiàn)固形物且固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到整個(gè)澄清透明的膠原蛋白肽液體系(即固形物和液體的總質(zhì)量)的30°/Γ35%時(shí)停止?jié)饪s，并進(jìn)行噴霧干燥。利用上述方法得到的低分子量膠原蛋白肽為原料，制備泡騰片式低分子膠原蛋白肽，具體方案如下泡騰片式低分子膠原蛋白肽，按質(zhì)量份計(jì)，由以下組分組成碳酸氫鈉20 23份檸檬酸16 19份低分子量膠原蛋白肽〗4 18份蘆薈8 14份聚乙一.醇60002 4份甘露醇8~15份山梨醇22~26份組分A5 10份 其中所述組分A為5%PVP70%乙醇，稱5gPVP(天津市江天化工技術(shù)有限公司，型號(hào)為K30，數(shù)均分子量6000)，加入70wt%乙醇的水溶液至100g，攪拌溶解混勻即可。各組分優(yōu)選如下泡騰片式低分子膠原蛋白肽，按質(zhì)量份計(jì)，由以下組分組成碳酸氫鈉22.2份檸檬酸17.8份低分子量膠原蛋白肽15份) *10 I份 聚乙一.醇60003份甘露醇12份山梨醇24份組分A10份制備所述泡騰片式低分子膠原蛋白肽的方法，按照下述步驟進(jìn)行將低分子量膠原蛋白肽(粉料)、蘆薈(粉料)、檸檬酸(粉料)分別研磨成細(xì)粉，過20目篩網(wǎng)，混合均勻后加入組份A后造粒，40— 45°C真空干燥，得到第一顆粒①；將低分子量膠原蛋白肽(粉料)、蘆薈(粉料)、碳酸氫鈉(粉料)分別研磨成細(xì)粉，過20目篩網(wǎng)，混合均勻后加入組份A后造粒，40— 45 °C真空干燥，得到第二顆粒②；然后將甘露醇，山梨醇，聚乙二醇6000混勻，過80目篩，加入上述第一和第二顆粒①②，混合均勻，迅速轉(zhuǎn)移至溫度(20 土 2) V、濕度(40 土 5) %無菌操作間中進(jìn)行壓片制得產(chǎn)品。其中所述甘露醇，山梨醇，聚乙二醇6000三者均為粉末狀固體。在制備第一顆粒和第二顆粒時(shí)，優(yōu)選在44°C真空干燥。在制備第一顆粒和第二顆粒時(shí)，可選擇將低分子量膠原蛋白肽(粉料)、蘆薈(粉料)和組分A等用量地分配在第一顆粒和第二顆粒中。本專利技術(shù)的技術(shù)方案采用溶膠和酶解工藝，得到分子量集中分布在50(T1600D的膠原蛋白肽，省略了進(jìn)行納濾或者超濾工藝；硅藻土和樹脂聯(lián)合脫色，解決了傳統(tǒng)的活性炭脫色后活性炭再生困難的問題和H2O2脫色后有毒物質(zhì)殘留的問題，并利用得到的膠原蛋白采用不含防腐劑的壓片式劑型(泡騰片)，更利于皮膚的美容和安全；這些有益的工藝措施使得生產(chǎn)工藝簡單，原料利用率高，安全可靠，生產(chǎn)成本大大降低。附圖說明圖I為實(shí)施例I膠原蛋白肽分子量的質(zhì)譜圖(質(zhì)譜為德國布魯克·道爾頓的型號(hào)MALDI-TOF)ο圖2為實(shí)施例2膠原蛋白肽分子量的質(zhì)譜圖(質(zhì)譜為德國布魯克·道爾頓的型號(hào)MALDI-TOF)ο圖3為實(shí)施例3膠原蛋白肽分子量的質(zhì)譜圖(質(zhì)譜為德國布魯克·道爾頓的型號(hào)MALDI-TOF)ο本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，其特征在于，按照下述步驟進(jìn)行：？步驟1，除去豬皮中非膠原性蛋白質(zhì)，其中用0.1mol/l~0.15mol/lNaOH水溶液浸泡原料豬皮，料液比為1:25~1:30，以除去豬皮里非膠原性蛋白質(zhì)？步驟2，脫除豬皮中的脂肪，其中按料液比為1:25~1:30的比例取水，然后加入占原料豬皮質(zhì)量2%~4%的脂肪酶，調(diào)整溫度和體系的pH值以使加入的脂肪酶活性達(dá)到最大，脫除脂肪？步驟3，溶膠，其中將脫去脂肪的豬皮置于水中，料液比1:15~1:20,80℃的條件下恒溫加熱，低速100？200轉(zhuǎn)/min攪拌4h~6h，得到豬皮和水溶性膠原的混合物？步驟4，制備胰蛋白酶酶解蛋白肽溶液，將上一步的豬皮和水溶性膠原的混合物降溫，同時(shí)調(diào)節(jié)混合物溶液的pH值以使加入的胰蛋白酶活性達(dá)到最大，加入胰蛋白酶，E/[S]=1000~2500u/g，然后將酶解后的蛋白肽液滅酶活，離心除去不溶物，得到胰蛋白酶酶解蛋白肽液？步驟5，蛋白肽液脫色，配置2wt%~4wt%的硅藻土的水溶液，抽濾，使濾紙表面形成一層均勻的硅藻土層，以此為過濾介質(zhì)，對(duì)蛋白肽液抽濾，抽濾后的蛋白肽液進(jìn)入樹脂柱進(jìn)行分離，得到澄清透明的膠原蛋白肽液？步驟6，濃縮干燥，將澄清透明的膠原蛋白肽液進(jìn)行真空濃縮和噴霧干燥得膠原蛋白肽粉末。...
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：朱宏吉，張華，王世鵬，滕欣余，路明月，姜珊，方潔，張鑫，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：天津大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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